2018_2019高中生物第1章微生物技术1.1培养基对微生物的选择作用课件北师大版选修1.ppt

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1、第1节 培养基对微生物的选择作用,1.能说出培养基的类型、用途和基本成分。 2.比较消毒和灭菌的区别。 3.举例说明常用的消毒与灭菌的方法。 4.能记住培养基的配制方法。 5.研究培养基对微生物的选择作用。,一,二,一、培养基的制备 1.培养基 (1)概念 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的 营养基质,用以培养、分离、鉴定和保存各种微生物。 (2)成分 一般包括水分、碳源、氮源、微量元素和无机盐等。 (3)种类 培养基按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。后者常用琼脂做凝固剂。,一,二,2.培养基的配制和灭菌 (1)培养基的制备包括配制和灭菌两大步骤。 (2)配制关键:准确

2、称量、调准pH、规范制作棉塞、彻底灭菌。 (3)主要制作流程:称量溶化调pH分装加塞和包扎 灭菌摆斜面及倒平板。 (4)由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有多种不同的微生物,配制好的培养基必须立即灭菌,及时杀灭培养基中的微生物,同时防止微生物大量繁殖造成的培养基营养成分的改变。 (5)常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。通过高压、高温蒸汽使菌体蛋白质凝固变性以达到灭菌的目的。,一,二,思考： 日常生活中的牛奶在进入市场销售前要进行消毒,可采用哪种消毒方法呢? 提示:用巴氏消毒法对牛奶进行消毒,可以杀死牛奶中的微生物,同时使牛奶的营养成分不会被破坏。,一,二,二、培养基对微生物的选择作用 1.菌

3、落 微生物通过某种方法接种到适于生长的固体培养基表面上,在适宜的温度下培养一段时间后,单个的菌体或孢子就可以生长繁殖成一个个肉眼可见的细胞群体,称为菌落。 2.培养基对微生物的选择作用的原理 不同种微生物对营养要求不一样,通过选择不同的培养基,人为控制培养基的pH、碳源、氮源、渗透压等条件,使选择的培养基利于某类或某种微生物的生长,而不利于其他微生物的生存,可以达到分离、培养不同微生物的目的。 例如,细菌生长需要的氮源高,pH中性或微碱性,因此培养细菌常采用牛肉膏蛋白胨培养基。酵母菌和霉菌生长所需的碳源含量高,pH偏酸性,因此分离真菌常采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基。,一,二,3.培养基对微生物的

4、选择作用的意义 在科研和生产实践中具有重要意义,它是分离和纯化不同类型微生物的基础。,1.培养基的成分与微生物生长所需的营养,2.培养基的类型及其应用,3.配制培养基的原则 (1)目的要明确 (2)营养要协调 (3)pH要适宜 4.消毒与灭菌的比较,二者的区别:前者去除的是部分微生物,后者去除的是所有微生物。,5.三种常用灭菌方法的比较,6.倒平板的注意事项 (1)培养基灭菌后,需要冷却到5060 后,才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。 (2)倒平板前,要将装有培养基的锥形瓶瓶口通过火焰灼烧,以防止瓶口的微生物污染培养基。

5、(3)平板冷凝后,需将平板倒置。平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 (4)倒平板过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,空气中的微生物可能会在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此不要再继续使用这个平板培养微生物。,题型一,题型二,题型三,题型四,微生物的营养 【例题1】 下列关于微生物的营养的说法,正确的是( ) A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B.凡是碳源都能提供能量 C.除水以外的无机物仅提供无机盐 D.无机氮源也可能提供能量 解析:对某些微生物来说,含

6、C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源。CO2可以作为光能自养微生物的碳源,但不能提供能量。CO2和N2是无机物,也可以分别作为微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能量。 答案:D,题型一,题型二,题型三,题型四,易错警示含C、H、O、N的化合物既可以作为一部分微生物的碳源,又可以作为氮源;有机碳源能提供能量,无机碳源不能提供能量。,题型一,题型二,题型三,题型四,无菌操作相关技术 【例题2】 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌?( ) A.接种针、手、

7、培养基 B.高压锅、手、接种针 C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、高压锅 解析:高压蒸汽灭菌锅通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手可以进行消毒。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种针。 答案:C,题型一,题型二,题型三,题型四,反思领悟微生物培养过程中的无菌操作包括消毒和灭菌两大类,各自具有不同的方法。应对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;对用于培养微生物的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。,题型一,题型二,题型三,题型四,培养基的制备 【例题3】 下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是( ) A.操作顺序为称量、溶化、分装、调pH、加塞和

8、包扎、灭菌、摆斜面及倒平板 B.将配制的培养基分装入试管或锥形瓶内 C.待培养基冷却至5060 后,制成斜面或平板后备用 D.配制好的培养基必须立即灭菌 解析:制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序是称量、溶化、调pH、分装、加塞和包扎、灭菌、摆斜面及倒平板。 答案:A,题型一,题型二,题型三,题型四,选择培养基的特点与应用 【例题4】 氯苯化合物是重要的有机化工原料,不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图甲)筛选出能高效降解氯苯化合物的微生物SP1菌。培养基配方如下表。,题型一,题型二,题型三,题型四,(1)配制号固体培养基时,除添加号液体培养基成分外,还应添加1%的 。 (2)

9、培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是 。 (3)从用途上来说,号培养基和号培养基分别属于 培养基和 培养基。在号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是 。 (4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为 。,题型一,题型二,题型三,题型四,(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的号培养液中培养,得到生长曲线(图乙)。从图乙可知,SP1菌在 的培养条件下最早停止生长,其原因是 。,题型一,题型二,题型三,题型四,解析:(1)固体培养基必须含有适量的琼脂。(2)配制培养基时应先调pH,后灭菌。(3)号培养基是为了获得更多的菌株,属于通用培养基,号培养基是为了选择出

10、SP1菌株,属于选择培养基,号培养基成分中含N物质为硝酸铵,则应由它为SP1菌株提供氮源。(4)在恶劣环境下,一些菌体会形成芽孢休眠体,以抵抗不良环境的影响。(5)SP1菌株以氯苯为碳源,当氯苯耗尽时,菌株因缺少碳源而不能继续生存,故氯苯含量越少,SP1菌株越早停止生长。 答案:(1)琼脂 (2)先调pH,后灭菌 (3)通用 选择 硝酸铵 (4)芽孢 (5)20 mg/L氯苯 碳源最早耗尽,1,2,3,4,5,1.下列叙述错误的是( ) A.微生物学实验一般都要求在无菌条件下进行 B.细菌生长只需要氮源 C.培养基的配制包括配制和灭菌两大步骤 D.不同培养基对微生物的选择作用是分离和纯化不同类

11、型微生物的基础 答案:B,1,2,3,4,5,2.在微生物培养过程中,需要对培养基等进行灭菌,其标准是( ) A.杀死所有的病原微生物 B.杀死所有的微生物 C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子 D.使病原菌不生长 答案:C,1,2,3,4,5,3.下列有关培养基配制的叙述,正确的是( ) A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水 B.碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素 C.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到温度、pH、氧、渗透压等的影响 D.营养物质的浓度越高越好 答案:C 解析:自养微生物的培养基不需要加碳源,自生固氮菌的培养基不需要加氮源。培养基中碳源

12、和氮源必须具有一定比例,但含量最多的元素是氧。营养物质的浓度并不是越多越好,浓度过高会导致培养物细胞失水。,1,2,3,4,5,4.无菌技术常围绕着如何避免杂菌的污染展开,下列常见的无菌技术中,属于灭菌处理的是( ) A.操作者的双手用酒精擦拭 B.实验室用紫外线照射 C.对接种环进行灼烧处理 D.水源用氯气处理 答案:C 解析:灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。,1,2,3,4,5,5.微生物培养过程中,肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是( ) A.细菌的大小、形状、颜色 B.菌落的大小、形状、颜色 C.有无鞭毛 D.培养基的不同 答案:B 解析:金黄色葡萄球菌的菌落呈黄色,菌落较小,圆形、光滑凸起,而枯草杆菌的菌落表面不光滑,菌落较大,呈白色或略带一些暗黄色,所以可依据菌落的大小、形状、颜色,肉眼鉴别两种细菌,B项正确。由于单个细菌很小,其形状、颜色以及有无鞭毛都无法用肉眼看到,A、C两项错误。培养基也不是鉴别两者的依据,D项错误。,