DB15 T 2734—2022 向日葵总DNA快速提取及检测技术规程.pdf

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1、 ICS 65.020.01 CCS B 05 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 2734 2022 向日葵总DNA 快速 提取及检 测技术规 程 Technical code of practice for rapid extraction and detection of total sunflower DNA 2022-07-29 发布 2022-08-29 实施 内蒙古自 治区市 场 监督管理 局 发 布 DB15/T 2734 2022 I 前 言 GB/T 1.1 2020 1 SAM/TC 20 DB15/T 2734 2022 1 向日葵 总DNA 快速提取及 检测技

2、术 规程 1 范围 DNA DNA 2 规范性 引用 文件 3 术语和 定义 4 DNA 提 取量 及质 量目 标 DNA DNA A260/280 1.8 2.0 5 药品准 备 A 6 DNA 提取 样品准 备 4 8 80 mg 120 mg 样品研 磨 1.5 mL DNA 抽提 DNA a)A b)65 1 h 10 min c)/24 1 10 min 离心沉 淀 DB15/T 2734 2022 2 a)4 10000 rpm 6 min b)700 l c)4 30 min d)10000 rpm 1 min e)1 mL 70%DNA 2 10000 rpm 1 min 风干

3、纯 化 6.4 1 DNA37 1 h RNA DNA 浓 度和 质量 检测 DNA DL2000 marker 1%B 7 保存 DNA-20 8 注意事 项 DNA CTAB DB15/T 2734 2022 3 A A 附录A（资料 性）溶液配 制 A.1 2%CTAB CTAB 4 g Nacl 16.364 g 1 M Tris-HCI 20 ml(PH8.0)0.5 M EDTA 8 ml 70 ml ddH20 200 ml A.2 1 M Tris-HCI Tris6.06 g 40 ml ddH20 2.1 ml PH 8.0 50 ml A.3 0.5 M EDTA(pH8

4、.0)50 ml 9.306 g EDTA-Na2 2H20 35 ml 1 g NaOH pH 8.0 50 ml(EDTA NaOH pH 8.0)A.4 10 TE 5 ml 1 M Tris-HCI 1 ml 0.5 M EDTA 44 ml 1 ml 10 TE 9 ml 1 TE A.5 5 TBE 27.5 g Tris 54 g 20 mL 0.5 mol L-1 EDTA pH=7.9 ddH2O 1 L 1 9 ddH2O 0.5 TBE DB15/T 2734 2022 4 B B 附录B（资料 性）1%琼脂 糖凝 胶电 泳检 测 1%a)1%70 ml 50 ml)0.7 g 0.5 g 70 ml 50 ml 0.5 TBE 3 1%b)65 0.5 TBE c)DNA 1 X 10 l d)60 V 100 V 1 cm e)DNA