DB37 T 4298-2020 绿潮次生毒性的快速检测方法 发光细菌法.pdf
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1、 ICS 07.060 CCS A 45 山东省 地方 标准 DB37/T 4298 2020 37 绿潮次生毒性的快速检测方法 发光细菌 法 Rapid determination for secondary toxicity of green tide Luminescent bacteria method 2020 - 12 - 30 发布 2021 - 01 - 30 实施 山东省 市场监督管理局 发 布 DB37/T 4298 2020 I 前 言 本文件按照 GB/T 1.1 2020标准化工作导则 第 1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉
2、及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由 山东省海洋局 提出 并 组织实施 。 本文件由 山东省海洋标准化技术委员会 归口。 本文件起草单位: 山东省海洋资源与环境研究院 、山东省标准化研究院 。 本文件主要起草人: 宋秀凯、付萍、张秀珍、刘晓波、刘爱英、姜会超、何健龙、程玲、于广磊 、 杨沣江 。 DB37/T 4298 2020 1 绿潮次生毒性的快速检测方法 发光细菌法 1 范围 本 文件 规定了以一种发光细菌 -费氏弧菌( Vibrio fischeri)为受试生物的绿潮次生毒性快速检测 与毒性水平评价 方法 。 本 文件 适用于绿潮发生海域绿潮藻腐烂液次生毒性的检测。
3、 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 绿潮次生毒性 secondary toxicity of green tide 绿潮藻腐烂分解产生的物质对生态环境产 生的影响及损害的能力。 3.2 光抑制率 light inhibition rate 水样在一定的时间和条件下与发光细菌接触后,发光细菌的发光量降低的百分比。 3.3 光增益率 light gain rate 水样在一定的时间和条件下与发光细菌接触后,发光细菌的发光量增加的百分比。 3.4 半数效应浓度 median effect concentration 样品在一定的时间
4、和条件下与发光细菌接触后,发光细菌的发光量减少 50 %时的样品浓度。 3.5 水合 reconstitution 处于冷藏环境的发光细菌冻干粉加入一定量的稀释剂恢复至活性。 3.6 水合时间 reconstitution time 添加稀释剂的发光细菌恢复至活性所需要的时间。 3.7 反应时间 reaction time 恢复至活性的发光细菌与对照样本或者待测样本接触的时间。 4 方法原理 DB37/T 4298 2020 2 发光细菌在一定实验条件下的发光强度是稳定的。在一定绿潮次生污染物范围内,发光细 菌接触样 品后的发光强度与样品的急性毒性水平呈显著负相关( P 0.05),通过分析仪
5、测定细菌发光强度的变 化以表示样品的急性毒性水平。 5 试剂与材料 5.1 发光细菌冻干粉 本 文件使用的发光细菌菌株为费氏弧菌( Vibrio fischeri NRRL B-11177)。冻干粉应在 -20 -25 储存, 4 时,保存时间不超过 4周; 22 时,不超过 24 h。 5.2 稀释剂 稀释剂为 2 %氯化钠溶液,用作水合发光细菌冻干粉、稀释样品以及无毒对照样本。 2 8 保存。 宜选用与冻干粉相应的稀释剂。 5.3 参比毒物母液 称取 0.05 g七水合硫酸锌( ZnSO47H2O、分析纯)溶解于稀释剂中,定容至 500 mL,即为参比毒物母 液( 100 mg/L)。母液
6、密封 4 保存,保存期不超过 6个月。 5.4 参比毒物标准液 按照等差、等比倍数相结合的方式,采用梯度稀释法将参比毒物母液依次稀释至 6 mg/L、 4 mg/L、 2 mg/L、 1 mg/L、 0.5 mg/L和 0.25 mg/L,用于测定发光强度并制作标准曲线。标准液应现用现配。 6 仪器设备 仪器和设备如下: 生物毒 性分析仪; 温度计 : 5 +40 ; 离心机 : 5 000 r/min; 电子天平 :感量 0.00 1 g。 7 样品的采 集、保存和预处理 7.1 样品的采集 参照 GB 17378.3的规定, 溶解氧、生化需氧量样品采集时应防止搅动水体,水样不应 曝 气。避
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