(浙江选考)2020版高考生物一轮复习第30讲酶的利用学案.doc
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1、1第 30 讲 酶的利用知识内容展示 核心素养对接社会责任 果胶和果胶酶在果汁生产中的作用1.果汁中的果胶和果胶酶2.淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测科学探究 探究 淀粉酶的活性考点 酶的利用1.(2018浙江 4 月选考节选)某植物富含有果胶、淀粉、蛋白质和纤维素成分。某小组开展了该植物综合利用的研究。(1)果胶提取工艺研究结果表明,原料先经过一段时间沸水漂洗的果胶得率(提取得到的果胶占原料质量的百分率)显著高于常温水漂洗的果胶得率,最主要原因是沸水漂洗_(A.有助于清洗杂质和去除可溶性糖 B.使植物组织变得松散 C.使有关酶失活 D.有利于细胞破裂和原料粉碎制浆)。(2)在用以上提取过果
2、胶和淀粉后的剩渣加工饮料工艺研究中,将剩渣制成的汁液经蛋白酶和纤维素酶彻底酶解处理后,发现仍存在浑浊和沉淀问题。可添加_使果胶彻底分解成半乳糖醛酸,再添加_,以解决汁液浑浊和沉淀问题。(3)在建立和优化固定化酶反应器连续生产工艺研究中,通常要分析汁液中各种成分的浓度和所用酶的活性,然后主要优化各固定化酶反应器中的_(答出 2点即可)、反应 pH 和酶反应时间等因素。其中,酶反应时间可通过_来调节。解析 本题考查选修一酶的应用,试题侧重与社会生产中利用酶的相关内容结合。果胶酶活性受温度、pH 或酶抑制剂的影响。固定化酶就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质(如石英砂)上,使之成为不溶于
3、水而又有酶活性的制剂。常用方法有吸附法、共价偶联法等。答案 (1)C(2)果胶酶和果胶甲酯酶 淀粉酶使淀粉分解(3)固定化的量、反应液温度 控制反应器液体流量(或体积)22.(2016浙江 10 月选考节选)请回答脲酶固定化实验的有关问题:制备固定化酶时,用石英砂吸附脲酶,装柱。再用蒸馏水洗涤固定化酶柱,其作用是_。解析 用石英砂吸附法固定化酶,装柱完成后,再用蒸馏水洗涤固定化酶柱,其作用是洗去未被吸附的酶,以免影响产物的纯度。答案 除去游离的脲酶3.(2016浙江 4 月选考节选)请回答与“果汁中的果胶和果胶酶”实验有关的问题:(1)果胶是细胞壁的重要组成成分,其化学本质是_(A.蛋白质 B
4、.脂质 C.核酸 D.多糖)。它在细胞壁形成过程中的主要作用是将相邻的细胞_在一起。(2)制取果汁时,先用果胶酶将果胶分解成_和半乳糖醛酸甲酯等物质,再用_酶处理,可得到比较澄清的果汁。用适量且浓度适宜的上述两种酶处理时,果汁的出汁率、澄清度与酶的_高低呈正相关。(3)由于果胶不溶于乙醇,故可用乙醇对果胶粗提取物(经酶处理后的混合物)进行_处理,从而得到干制品。解析 (1)果胶主要是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯缩聚而成的,属于多糖。果胶主要在相邻的植物细胞之间起粘合的作用。(2)果胶酶和果胶甲酯酶可以将果胶分解成半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯,用适量且浓度适宜的上述两种酶处理果汁可以使果汁澄清,果
5、汁的出汁率、澄清度与酶的活性高低呈正相关。(3)由于果胶不溶于乙醇,经酶处理后的混合物用乙醇进行沉淀脱水处理,可获得干制品。答案 (1)D 粘合 (2)半乳糖醛酸 果胶甲酯 活性 (3)脱水(沉淀)本题组对应选修一 P33P35,果汁中的果胶和果胶酶;选修一 P38P40,淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测一、果汁中的果胶和果胶酶1.果胶及其特性果胶是植物细胞壁的主要成分,由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成。果胶起着粘合细胞的作用,去掉果胶植物组织将变得松散。果胶不溶于乙醇中,这是鉴别果胶的一种简易方法。2.果胶酶的组成及作用果胶酶包括果胶酶和果胶甲酯酶,能使果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸和半乳糖
6、醛酸甲酯,瓦解植物细胞壁和胞间层,果汁制作时,使用果胶酶有利于提高出汁率和澄清度。33.果胶酶的来源黑曲霉、苹果青霉等都可以用于生产果胶酶。二、淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测1.固定化酶(1)固定化酶的含义:是指将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。(2)固定化的方法:吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。(3)固定化酶的优点:稳定性提高;易分离;可反复利用。2.淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测(1)淀粉的水解过程:(2)淀粉酶的固定化(如右图)。5 mg 淀粉酶溶于 4 mL 蒸馏水,加入 5 g 石英砂,搅拌 30 min。(3)将石英砂
7、装入含气门心并用夹子封住的注射器中。用 40 mL 蒸馏水用流速 1 mL/min 来洗涤除去未吸附的游离淀粉酶。(4)使淀粉溶液以 0.3 mL/min 的流速过柱,在流出 5 mL 后接收 0.5 mL 流出液。加入 12 滴 KII 2溶液,观察颜色变化。(5)实验预期结果:水解产物糊精遇碘呈红色。探究利用苹果或山楂匀浆制作果汁的最佳条件的实验(1)实验原理果胶 半乳糖醛酸半乳糖醛酸甲酯。 果 胶 酶 、 果 胶 甲 酯 酶果胶酶的活性受温度(或 pH)的影响,处于最适温度(或 pH)时活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小呈正相关。果胶不溶于乙醇。(2)实验流程4(3)
8、实验结论:果胶酶能分解果胶,提高果汁的出汁率和澄清度。角度 酶的利用1.(2018绍兴模拟)回答与 淀粉酶的制备和固定化过程有关的问题:(1)为了获得优良的枯草杆菌菌株,研究者取 5 克土样加到有 95 mL_的三角瓶中,振荡 10 分钟,即成 101 土壤液。为了进一步稀释土壤液,应用_吸取悬液,制成102 、10 3 、10 4 、10 5 的土壤稀释液。(2)筛选产 淀粉酶的枯草杆菌时,用较低浓度的_作为培养基中的唯一碳源,接种时宜采用_接种法。(3)淀粉酶宜采用吸附法进行固定化,下列关于反应柱的理解,正确的是( )A.反应物和酶均可自由通过反应柱B.反应物和酶均不能通过反应柱C.反应物
9、能通过反应柱,酶不能通过反应柱D.反应物不能通过,酶能通过(4)为了确定筛选出的淀粉酶的应用价值,还需要进一步检测固相 淀粉酶的活性,在该实验中,亲和层析洗脱液中加入 KII 2指示剂后,试管中呈现_色。相对于唾液淀粉酶,枯草杆菌产生的 淀粉酶具有_特性,从而有利于工业生产。解析 在无菌条件下,用无菌水制备土壤稀释液,产生 淀粉酶的枯草杆菌能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长,用淀粉作为培养基中的唯一碳源,可筛选产 淀粉酶的枯草杆菌。淀粉酶经固定后,装入反应柱,反应物能通过反应柱,酶不能通过反应柱,使酶与产物分离。亲和层析洗脱液是经反应柱后的流出液,含有淀粉水解后的产物糊精,5加入 KII 2指
10、示剂后呈红色。淀粉酶的最适温度是 5075 ,与唾液淀粉酶相比,具有耐高温的特点。答案 (1)无菌水 移液器 (2)淀粉 涂布 (3)C (4)红 耐高温2.某校生物兴趣小组为探究不同浓度果胶酶对澄清苹果汁出汁率的影响,进行了如下实验。实验步骤:制备苹果汁:将苹果洗净,切成小块,用榨汁机打碎成苹果汁匀浆。加热苹果汁到 100 ,再冷却至 50 左右。配制不同浓度的酶液:取 5 支 10 mL 的试管,依次编号为 26 号。分别加入不同量的质量浓度为 10 g/mL 的果胶酶溶液,再分别加入苹果酸定容至 10 mL,获得质量浓度分别为 2 g/mL、4 g/mL、6 g/mL、8 g/mL、10
11、 g/mL 的果胶酶溶液备用。降解苹果汁(如下图)沉淀:向上述 6 只烧杯中添加明胶、活性炭等物质搅拌处理,充分混匀后静置,分别过滤。记录并处理结果:用量筒测量澄清滤液(即苹果汁)的体积,记入表格,并计算出汁率。请回答下列问题:(1)果胶酶能提高苹果的出汁率并使果汁澄清的原因是_。(2)步骤中,苹果汁先加热到 100 的目的是_。(3)步骤中,在 26 号试管中加入 10 g/mL 果胶酶溶液的量分别是_;步骤中,在 1 号烧杯中加入 1 mL_。(4)根据预期结果,请绘制出澄清苹果汁出汁率与果胶酶浓度之间大致的关系曲线,并在坐标轴上标出澄清苹果汁最高出汁率所需的果胶酶最佳浓度。解析 (1)由
12、于果胶酶能分解果胶,瓦解细胞壁,所以在苹果泥中加入果胶酶,可以提高果汁的量和澄清度。(2)苹果汁先加热到 100 ,可使苹果中的酶失活,防止对实验结果产6生干扰。(3)根据图中果胶酶溶液的浓度(10 g/mL)和各试管中配制成的果胶酶溶液的浓度(2 g/mL、4 g/mL、6 g/mL、8 g/mL、10 g/mL)可知,加入果胶酶溶液的体积分别是 2 mL、4 mL、6 mL、8 mL、10 mL。步骤中,在 1 号烧杯中加入 1 mL 苹果酸,作为对照。(4)出汁率曲线起点于纵轴某点,表明没有果胶酶时也有一定出汁率,在一定范围内随果胶酶浓度升高,出汁率上升达饱和点后可稳定。答案 (1)果胶
13、酶能分解果胶,瓦解细胞壁 (2)使苹果中的酶失活,防止对实验结果产生干扰 (3)2 mL、4 mL、6 mL、8 mL、10 mL 苹果酸 (4)如图 关注坐标含义、曲线变化趋势、起点、最佳浓度。归纳小结1.直接使用酶和固定化酶的优缺点比较直接使用酶 固定化酶酶的种数 一种或几种 一种常用载体 高岭土、皂土、硅胶、凝胶制作方法 化学结合固定化、物理吸附固定化是否需要营养物质否 否催化反应 单一或多种 单一反应底物 各种物质(大分子、小分子) 各种物质(大分子、小分子)缺点对环境条件非常敏感,易失活;难回收,成本高,影响产品质量不利于催化一系列的酶促反应优点 催化效率高、耗能低、低污染既能与反应
14、物接触,又能与产物分离;可以反复利用2.酶的固定化方法及适用对象名称 原理 图示包埋法将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中7化学结合法利用共价键、离子键将酶分子或细胞相互结合,或将其结合到载体上物理吸附法通过物理吸附作用,把酶固定在纤维素、琼脂糖、多孔玻璃或离子交换树脂等载体上3.探究影响果胶酶活性因素实验的分析(1)实验原则:单一变量原则、对照性原则。严格控制变量,尽量减少无关变量的影响。(2)实验原理:果胶酶活性受温度、pH 或酶抑制剂的影响,在最适温度或 pH 时,活性最高,果肉的出汁率、果汁的澄清度都与果胶酶的活性大小成正比。(3)设计实验:探究最适温度时,pH 为无关变量,
15、最好是最适 pH;探究最适 pH 时,温度为无关变量,最好是最适温度。探究果胶酶的最适用量时,最适用量是在温度、pH 等适宜条件下测出来的,如果无关变量改变,最适用量也会发生变化。8课后限时训练(时间:30 分钟 分数:100 分)1.(2018浙江超级全能生联考 A 卷)耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。如图表示从热泉的嗜热菌样品中进行筛选分离菌种,经过耐高温淀粉酶的提纯和固定化后,用于工业化生产的过程。请回答:(1)过程进行的操作为_,过程实施的是_分离法;可根据 I 号培养基上_的大小,来确定需扩大培养的目标菌种。(2)I 号培养基中除了加入淀粉外,还需加入另一种重要的营养成
16、分是_(A.琼脂 B.葡萄糖 C.硝酸铵 D.碳酸氢钠),并放在高温条件下培养。(3)将适量经提纯的耐高温淀粉酶通过_法固定在石英砂上,形成固定化酶柱,此后用一定浓度的淀粉溶液进行过柱试验,可往流出液中滴加_溶液检测催化效果,但结果发现流出液显蓝色,请分析在上述操作中存在的可能原因是_(至少写出两点)解析 (1)图示代表菌种的稀释、分离和扩大培养等过程;号培养基上的菌种分离是涂布分离的结果,号培养基上的菌种分离是划线分离的结果,目标菌种应选择菌落周围透明圈较大的。(2)号培养基的目的是筛选到目标菌种,故为选择培养基;除淀粉作为碳源外,还应满足氮源的需要,选项 C 为无机氮源,能满足需要。(3)
17、石英砂具有较强的吸附性,用其进行的固定化方法为吸附法;过柱后流出液中的淀粉是否完全分解为糊精,可用 KII 2溶液进行检测;分析流出液中仍存在淀粉的可能原因,要求熟悉教材实验的操作流程,分别从洗柱、过柱、调速、检测等环节寻找可能的原因。答案 (1)稀释 涂布 菌落周围透明圈 (2)C (3)吸附 KII 2 马上取流出液进行显色反应;液体过柱的流速过快等2.(2018宁波十校联考)请回答利用枯草杆菌生产 淀粉酶及酶固定化实验的有关问题:(1)筛选高表达菌株的最简便方法之一是_。一般通过_和_两种手段实现。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用 _培养基进行扩大培养。 9(2)利用物理或化学的方法将
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