DB23 T 2605-2020 化学诱导玉米单倍体技术规程.pdf

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1、ICS 65.020.20B 05黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23DB23/T 2605 2020化 学 诱 导 玉 米 单 倍 体 技 术 规 程 2020-01-23发 布黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布2020-02-22实 施 DB23/T 2605-2020 I 前 言本 标 准 依 据 GB/T 1.1-2009编 写 规 则 起 草 。本 标 准 由 黑 龙 江 省 农 业 农 村 厅 提 出 。本 标 准 由 黑 龙 江 省 农 业 标 准 化 技 术 委 员 会 归 口 。本 标 准 起 草 单 位 ： 黑 龙 江 省 农 业 科 学 院 耕 作 栽

2、培 研 究 所 、 黑 龙 江 荣 玉 农 业 科 技 有 限 公 司 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 宫 秀 杰 、 来 永 才 、 钱 春 荣 、 于 洋 、 马 宝 新 、 马 延 华 、 李 梁 、 郝 玉 波 、 李 昕 、 王 俊 强 、王 秋 菊 、 姜 辉 、 何 长 安 、 姜 宇 博 、 吕 国 依 、 葛 选 良 、 杨 忠 良 、 马 军 韬 、 赵 杨 、 王 阳 、 童 淑 媛 、 杜 振 宇 、孙 丹 、 侯 国 强 、 孟 凡 迪 。 DB23/T 2605-2020 1 化 学 诱 导 玉 米 单 倍 体 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了

3、化 学 诱 导 玉 米 单 倍 体 技 术 的 术 语 和 定 义 、 材 料 和 备 品 、 诱 导 处 理 、 诱 导 后 代 种 植 和 田间 调 查 、 诱 导 率 统 计 及 注 意 事 项 。本 标 准 适 用 于 化 学 诱 导 玉 米 单 倍 体 技 术 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本

4、 文 件 。 DB23/T 017 玉 米 生 产 技 术 规 程DB62/T 1060 农 作 物 种 子 生 产 技 术 规 程 玉 米 自 交 系3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。3.1 Pa1 代化 学 诱 导 孤 雌 生 殖 获 得 的 籽 粒 及 其 生 长 植 株 （ 不 包 括 后 代 籽 粒 ） 。3.2 Pa2 代 Pa1经 自 交 结 实 后 的 籽 粒 及 生 长 植 株 （ 不 包 含 后 代 籽 粒 ） 。4 材 料 和 备 品4.1 实 验 材 料 和 备 品 准 备500ml烧 杯 、 玻 璃 棒 、 100ml容 量

5、瓶 、 25ml量 筒 、 封 口 瓶 、 废 液 缸 、 试 剂 匙 、 移 液 管 、 0.001g天 平 、猴 头 喷 雾 器 、 蒸 馏 水 、 无 水 乙 醇 （ EA） 。剪 刀 、 胶 皮 手 套 、 一 次 性 口 罩 、 眼 罩 、 白 大 褂 、 硫 酸 纸 、 小 硫 酸 纸 袋 、 大 硫 酸 纸 袋 大 头 针 、 标 签 、记 号 笔 、 棉 花 、 镊 子 、 网 袋 。4.2 诱 导 材 料 准 备4.2.1 诱 导 材 料 选 择 符 合 育 种 目 标 的 玉 米 优 良 杂 合 种 质 或 遗 传 背 景 广 泛 的 群 体 材 料 。4.2.2 化 学

6、试 剂诱 导 试 剂 包 括 ： 二 甲 基 亚 砜 (DMSO) 、 马 来 酰 肼 (MH) 、 秋 水 仙 碱 (Col) 、 甲 醇 （ MT） 。 DB23/T 2605-2020 2 配 制 方 法 ： 取 70mgMH加 入 烧 杯 ， 再 加 入 70mlMT， 充 分 搅 拌 。 待 MH完 全 溶 解 后 ， 加 入 0.1mlDMSO、1.0gCol和 500ml蒸 馏 水 ， 搅 拌 ， 转 移 入 1000ml容 量 瓶 中 ， 定 容 至 1000ml。 放 置 安 全 处 待 用 。4.2.3 诱 导 材 料 种 植 及 田 间 管 理选 择 地 势 平 坦 、

7、肥 水 一 致 、 排 灌 方 便 地 块 ， 每 份 被 诱 导 材 料 种 植 不 少 于 100株 。 田 间 管 理 参 照 DB23/T017执 行 。5 诱 导 处 理5.1 诱 导 时 期 和 诱 导 方 法5.1.1 诱 导 时 期诱 导 材 料 雌 穗 吐 丝 3cm 5cm时 。 5.1.2 诱 导 方 法诱 导 材 料 雌 穗 吐 丝 前 ， 用 硫 酸 纸 袋 将 雌 穗 罩 上 ， 去 除 雌 穗 。 诱 导 处 理 时 间 选 择 在 清 晨 4:00-7:30， 操作 人 员 须 用 75%乙 醇 将 手 和 剪 刀 消 毒 ， 用 剪 刀 将 被 诱 导 材 料

8、 雌 穗 顶 端 剪 平 ， 然 后 用 手 再 修 出 一 个 凹 槽 ，用 猴 头 喷 雾 器 喷 施 化 学 药 剂 ， 每 穗 喷 施 化 学 药 剂 2ml， 喷 施 后 迅 速 罩 上 硫 酸 纸 袋 ， 然 后 再 罩 上 一 个 大 硫酸 纸 袋 ， 用 大 头 针 固 定 ， 挂 标 签 ， 标 记 喷 施 药 剂 日 期 。 间 隔 3天 后 再 喷 施 一 次 ， 喷 施 方 法 同 上 。 记 录 化学 药 剂 处 理 的 果 穗 数 量 。5.2 诱 导 材 料 的 收 获籽 粒 成 熟 及 时 收 获 ， 单 穗 分 装 编 号 ， 待 干 燥 后 ， 脱 粒 。

9、记 录 每 个 果 穗 雌 穗 小 花 数 和 结 实 数 。6 诱 导 后 代 种 植 和 田 间 调 查 6.1 Pa1 种 植 和 田 间 调 查6.1.1 Pa1 种 植选 择 地 势 平 坦 、 肥 水 均 一 、 病 虫 害 发 生 低 、 排 灌 方 便 地 块 种 植 。 收 获 的 Pa1种 子 全 部 播 种 ， 人 工 单粒 播 种 ， 播 深 3cm 5cm， 播 后 镇 压 ， 单 株 插 牌 标 记 。6.1.2 Pa1 田 间 管 理采 用 人 工 除 草 ， 禁 止 使 用 化 学 药 剂 除 草 。 其 它 田 间 管 理 方 法 参 照 DB23/T 017

10、执 行 。6.1.3 Pa1 田 间 调 查6.1.3.1 Pa1 苗 期 调 查调 查 未 出 苗 、 白 化 苗 和 早 夭 幼 苗 数 量 。 6.1.3.2 Pa1 花 期 调 查调 查 雄 穗 育 性 、 雌 穗 育 性 和 雌 雄 开 花 间 隔 时 间 。6.1.4 Pa1 自 交 授 粉 DB23/T 2605-2020 3 雌 穗 吐 丝 前 用 硫 酸 纸 袋 将 雌 穗 罩 上 ， 对 雌 雄 穗 外 观 正 常 、 花 期 相 遇 的 植 株 进 行 自 交 授 粉 。 授 粉 方 法参 照 DB62/T 1060执 行 。6.1.5 Pa1 收 获单 穗 收 获 并

11、编 号 。6.2 Pa2 种 植 及 田 间 调 查6.2.1 Pa2 种 植按 穗 行 种 植 。 穗 行 插 牌 标 记 ， 种 植 方 式 同 6.1.1。6.2.2 Pa2 田 间 管 理田 间 管 理 方 法 参 照 DB23/T 017执 行 。 6.2.3 Pa2 田 间 调 查6.2.3.1 Pa2 苗 期 调 查调 查 幼 苗 色 、 茎 色 泽 及 叶 色 ， 进 行 一 致 性 调 查 。6.2.3.2 Pa2 花 期 调 查调 查 株 型 、 雄 穗 分 枝 、 雌 穗 花 丝 颜 色 、 株 高 、 穗 位 、 抽 穗 期 、 吐 丝 期 。6.2.4 Pa2 自 交

12、 授 粉田 间 所 有 植 株 均 进 行 自 交 授 粉 ， 授 粉 方 法 参 照 DB62/T 1060执 行 。6.2.5 Pa2 收 获记 录 成 熟 期 ， 同 一 穗 行 植 株 表 现 整 齐 一 致 ， 所 有 性 状 无 分 离 ， 即 认 为 是 纯 合 二 倍 体 。 同 一 穗 行 性 状 有 分 离 的 ， 则 淘 汰 。 按 穗 行 收 获 ， 并 编 号 。7 诱 导 率 统 计 拘拘 式 中 ：M1为 诱 导 材 料 结 实 率 ；G i为 Pa1结 实 粒 数 ；Ei为 处 理 雌 穗 小 花 数 ； 拘拘 式 中 ：M2为 诱 导 材 料 诱 导 率 ；Ri为 Pa2纯 合 穗 行 数 ；Ei为 处 理 雌 穗 小 花 数 ；8 注 意 事 项 DB23/T 2605-2020 4 本 技 术 规 程 中 化 学 试 剂 DMSO和 Col具 有 一 定 的 毒 性 作 用 ， 在 配 制 溶 液 和 使 用 化 学 试 剂 的 过 程 中 ，必 须 带 胶 皮 手 套 ， 带 一 次 性 口 罩 ， 穿 白 大 褂 ， 并 将 药 品 放 置 安 全 地 方 。 如 不 慎 将 DMSO沾 到 皮 肤 上 后 ，迅 速 用 大 量 的 水 以 及 稀 氨 水 清 洗 。