[考研类试卷]研究生入学考试生物化学（蛋白质）历年真题试卷汇编8及答案与解析.doc

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1、研究生入学考试生物化学（蛋白质）历年真题试卷汇编 8 及答案与解析一、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。1 蛋白质亚基之间存在界面。界面的大部分是由_组成。亚基之间主要的化学作用力是_。2 脂肪酸的活化形式是_，而葡萄糖的活化形式是_。3 在竞争性抑制的酶反应中，相对于无抑制剂的正常反应，V max_，而Km_。4 tRNA 分子 3末端的最后三个核苷酸为 5_3。5 DNA 的变性温度(T m)的大小与_、_、_等因素有关。6 在真核生物中，脂肪酸从头合成途径发生于_，在_、_两种细胞器中进行脂肪酸的延伸。脂肪酸去饱和的酶主要存在于_。7 机体内物质的脱羧形成 CO2 的反应

2、一般有_ 种方式，一种是_，另一种是_。丙酮酸脱氢酶系催化丙酮酸形成乙酰辅酶 A 与 CO2 的过程属于_睨羧。8 氨基酸通过嘌呤核苷酸循环脱氨时，腺嘌呤核苷酸脱氨基的产物是_，其氨基的直接供体是_(填入具体氨基酸名称)。9 (复旦大学 2008 年、郑州大学 2007 年考研试题)Isoelectricpoint10 (复旦大学 2008 年考研试题)两性电解质11 (复旦大学 2008 年、山东大学 2005 年考研试题)必需氨基酸12 (复旦大学 2008 年考研试题)离子交换层析13 (复旦大学 2008 年考研试题)disulfidebond14 (北京师范大学 2006 年考研试题

3、)兼性离子和两性电解质15 (北京师范大学 2006 年考研试题)超二级结构和结构域16 (北京师范大学 2006 年考研试题)琼脂糖凝胶电泳17 (北京师范大学 2005 年考研试题)等电点和等离子点18 (北京师范大学 2005 年考研试题)氢键的方向性和饱和性19 (上海交通大学 2007 年考研试题)hemophilia20 (上海交通大学 2006 年考研试题)hvdroxyproline21 (上海交通大学 2006 年考研试题)diagonalelectrophoresis22 (上海交通大学 2006 年考研试题)apoprotein23 (四川大学 2007 年考研试题)变构

4、效应24 (四川大学 2006 年考研试题)双向电泳25 (四川大学 2006 年考研试题)伴娘蛋白26 (吉林大学 2009 年考研试题)蛋白质构象27 (东北师范大学 2008 年考研试题)蛋白质的一级结构。28 (四川大学 2006 年、湖南大学 2007 年考研试题)结构域29 (哈尔滨工业大学 2008 年考研试题)分子病30 (哈尔滨工业大学 2007 年考研试题)氨基酸残基。31 (哈尔滨工业大学 2007 年考研试题)蛋白质变性32 (山东大学 2006 年考研试题)异促效应33 (山东大学 2006 年考研试题)凝胶过滤层析34 (山东大学 2005 年考研试题)Wester

5、nblot35 (山东大学 2005 年考研试题)兼性离子36 (华中师范大学 2010 年、山东大学 2005 年考研试题)超二级结构37 (湖南大学 2007 年考研试题)糖蛋白38 (中科大 2009 年考研试题)肽键(peptidebond)39 酶的别构调节40 核苷酸41 氧化磷酸化42 DNA 拓扑异构酶43 聚合酶链式反应44 细胞色素45 透析与超过滤46 蛋白质结构域47 增色效应48 等电点与兼性离子49 生物氧化是指什么? 其与体外的一般氧化反应如燃烧有什么异同?50 什么叫限制性内切核酸酶?任举一例说明其应用。51 酶及其辅助因子是指什么?简述它们之间的关系。52 下

6、面有两个 DNA 分子，先变性然后再复性，复性是在同一温度下发生的，问哪一个，DNA 分子复性到原来的 DNA 结构可能性更大些?为什么?(1)ATATATATATTATATATATA(2)TAGCCGATGCATCGGCTACG53 怎样通过紫外吸收法判断核酸的纯度以及对纯核酸进行定量?54 试述蛋白质分子构象变化与其活力之间的关系。55 为什么 tRNA 上会存在大量的修饰型的核苷酸 ?其生物学意义又是什么?研究生入学考试生物化学（蛋白质）历年真题试卷汇编 8 答案与解析一、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。1 【正确答案】 非极性氨基酸残基 次级键2 【正确答案】 脂酰

7、CoA UDPG 和 ATPG3 【正确答案】 不变 增加4 【正确答案】 CCA5 【正确答案】 DNA 的均一性 DNA 分子中(G+C)的含量 溶剂的性质6 【正确答案】 乙酰 CoA 的转运 内质网 线粒体 滑面内质网7 【正确答案】 2 单纯脱羧 氧化脱羧 氧化脱羧8 【正确答案】 次黄嘌呤 谷氨酸9 【正确答案】 等电点(pI)，在某一 pH 的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，所带净电荷为零，呈电中性，此时溶液的 pH 称为该氨基酸的等电点。两性离子所带电荷因溶液的 pH 值不同而改变，当两性离子正负电荷数值相等时，溶液的 pH 值即其等电点；当外界溶液的 pH

8、 大于两性离子的 pI 值，两性离子释放质子带负电；当外界溶液的 pH 小于两性离子的 pI 值，两性离子质子化带正电。【知识模块】 蛋白质10 【正确答案】 两性电解质就是既能当酸又能当碱用的电解质。两性电解质通常为两性元素的氧化物的水合物、氨基酸等。它们在溶液中存在着两性离解平衡，既能离解出 H+离子又能离解出 OH-离子或者和 H+离子结合，既能与酸，也能与碱起反应而被中和。【知识模块】 蛋白质11 【正确答案】 必需氨基酸(essential amino acid)是人体(或其他脊椎动物)必不可少，而机体内又不能合成的，必须从食物中补充的氨基酸，称必需氨基酸。对成人来讲必需氨基酸共有八

9、种：赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。如果饮食中经常缺少上述氨基酸，可影响健康。它对婴儿的成长起着重要的作用。对婴儿来说，组氨酸也是必需氨基酸。【知识模块】 蛋白质12 【正确答案】 离子交换层析(Ion Exchange Chromatography，IEC)是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。【知识模块】 蛋白质13 【正确答案】 二硫键，一般指多肽链中的两个半胱氨酸残基侧链的硫原子之间形成的共价键。对于维持许多蛋白质分子的天然构象和稳定性十分重要。【知识模块】 蛋白质

10、14 【正确答案】 氨基酸在中性 pH 时，羧基以一 COO-、氨基以 NH3+形式存在，这样的氨基酸分子含有一个正电荷和一个负电荷，称为兼性离子，亦称偶极离子。氨基酸在水中的偶极离子既起酸(质子供体)作用，又起碱(质子受体)作用，称为两性电解质。【知识模块】 蛋白质15 【正确答案】 在球形蛋白质分子的一级结构顺序上，若干个相邻的二级结构元件(主要是 螺旋和 折叠片)结合在一起，彼此相互作用，形成种类不多的、有规则的二级结构组合或二级结构串，充当该蛋白质三级结构的构建，称为超二级结构。超二级结构有三种组合形式：、。多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧

11、密球形实体，称为结构域。结构域是球形蛋白质的独立折叠单位。【知识模块】 蛋白质16 【正确答案】 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶约可区分相差 100bp 的 DNA 片段，其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低，但它制备容易，分离范围广，尤其适于分离大片段 DNA。普通琼脂糖凝胶分离 DNA 的范围为 0220kb，利用脉冲电泳，可分离高达 107rbp的 DNA 片段。【知识模块】 蛋白质17 【正确答案】 对于某一种蛋白质(或氨基酸)来说，在某一 pH，它所带的正电荷与负电荷恰

12、好相等而净电为零，这一 pH 称为蛋白质 (或氨基酸)的等电点。各种蛋白质(或氨基酸) 都有自己特有的等电点。在没有其他盐类干扰时，蛋白质质子供体基团解离出来的质子数与质子受体基因结合的质子数相等时的 pH 称为等离子点，是蛋白质真正的等电点，是该蛋白质的特征常数。【知识模块】 蛋白质18 【正确答案】 氢键是一种特殊的分子间作用力，它是由已经与电负性很强的原子形成共价键的氢原子与另一分子中电负性很强的原子之问的作用力。氢键不属于化学键，是介于范德华力和化学键之间的一种较弱的作用力。一般表示为 XHY。氢键的方向性是指 Y 原子与 XH 形成氢键时，将尽可能使氢键与 X-H 键轴在同一方向，即

13、 X-HY 三个原子在同一直线上。这样， x 与 Y 之间距离最远，两原子电子云之间排斥力最小，所形成的氢键最强，体系更稳定。氢键的饱和性是指每一个 X-H 只能与一个 Y 原子形成氢键。【知识模块】 蛋白质19 【正确答案】 血友病，一种凝血功能缺陷的遗传症，由于凝血因子(抗血友病因子)失活或活性显著降低所致。【知识模块】 蛋白质20 【正确答案】 羟脯氨酸，指存在于蛋白(特别是胶原)肽链中的非编码氨基酸，由脯氨酸残基羟化形成，它的存在可形成链间氢键而有利于胶原三股螺旋的稳定。【知识模块】 蛋白质21 【正确答案】 对角线电泳，是双向电泳的一种特例。双向电泳将蛋白质样品点在凝胶的一个端点，走

14、过电泳以后进行某种特殊处理，转过 90再进行第二次电泳。若两次电泳的缓冲液、电压等条件都一致，则此双向电泳即为对角线电泳。若经两次电泳后，电泳图谱的斑点都在对角线上，则特殊处理对蛋白质无影响；反之，若电泳图谱中有的斑点偏离对角线，则该斑点对特殊处理有反应。【知识模块】 蛋白质22 【正确答案】 脱辅基蛋白，指失去了非蛋白类小分子辅基的掇合蛋白质，常失去蛋白质活性。【知识模块】 蛋白质23 【正确答案】 变构效应又称为别构效应，某种不直接涉及蛋白质活性的物质，结合于蛋白质活性部位以外的其他部位(别构部位)，引起蛋白质分子的构象变化，而导致蛋白质活性改变的现象。【知识模块】 蛋白质24 【正确答案

15、】 双向电泳是结合了等电聚焦(IEF)和 SDS 一聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)两种电泳技术。第一向进行等电聚焦，由于蛋白质是两性分子，在不同 pH缓冲液中表现出不同的带电性，因此在电流的作用下，以两性电解质为介质的电泳体系中，不同等电点的蛋白质会聚集在介质上不同的等电点区域而被分离；第二向进行 SDS-聚丙烯酰胺凝胶，蛋白质在 SDS 凝胶中，相对分子质量不同的将位于SDS 凝胶的不同区段而被分离。经染色后得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。【知识模块】 蛋白质25 【正确答案】 伴娘蛋白是与新生肽链形成复合物并辅助新生肽链正确折叠成具有生物功能构象的蛋白质。它是一类序列上没有相关性但

16、有共同功能的保守性蛋白质，可以防止不正确折叠中间体的形成和没有组装的蛋白亚基的不正确聚集，协助多肽链跨膜运转以及大的多亚基蛋白质的组装和解体。【知识模块】 蛋白质26 【正确答案】 每一种天然蛋白质都有自己特有的空间结构，这种空间结构通常称为蛋白质的构象。【知识模块】 蛋白质27 【正确答案】 蛋白质分子多肽链中氨基酸的排列顺序称为蛋白质的一级结构。各种蛋白质中氨基酸排列顺序是由该生物遗传信息决定的，一级结构是蛋白质分子的基本结构，它是决定蛋白质空间构象的基础，而蛋白质的空间构象则是实现其生物学功能的基础。【知识模块】 蛋白质28 【正确答案】 多肽链首先在某些区域相邻氨基酸残基间形成有规则的

17、二级结构(-螺旋、 一折叠、-转角、无规卷曲等结构单元)，然后以相邻的二级结构片段集装成超二级结构，再进行折叠绕曲形成的结构称为结构域。【知识模块】 蛋白质29 【正确答案】 分子病是指某种蛋白质分子一级结构的氨基酸排列顺序与正常有所不同的遗传病。【知识模块】 蛋白质30 【正确答案】 在多肽链中的氨基酸，由于其部分基团参与了肽键的形成，剩余的结构部分则称氨基酸残基。【知识模块】 蛋白质31 【正确答案】 天然蛋白质因受物理的或化学因素的影响，其分子内部原有的高度规律性结构发生变化，致使蛋白质的理化性质和生物学性质都有所改变，但并不导致蛋白质一级结构的破坏，这种现象称蛋白质变性。【知识模块】

18、蛋白质32 【正确答案】 结合在蛋白质分子的特定部位上的配体对该分子的其他部位所产生的影响称为别构效应。别构效应可分为同促效应和异促效应两类，不同配体(不同的结合部位)引起的反应称为异促效应。【知识模块】 蛋白质33 【正确答案】 凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析，是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，根据被分离物质的分子大小不同来进行分离的技术。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质，多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质，小分子物质能进入其内部，流下时路程较长，而大分子物质却被排除在外部，下来的路程短，当混合溶液通过凝胶过滤层析柱时，溶液中的物质就按不同分子量筛分开。【知识模块】

19、 蛋白质34 【正确答案】 蛋白质印迹，它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。蛋白质样品凝胶电泳后，转移到硝酸纤维薄膜上，然后相继用第一抗体、酶标第二抗体和底物处理，用于检测样品中微量成分和近似相对分子量。【知识模块】 蛋白质35 【正确答案】 含有一个正电荷和一个负电荷的离子即兼性离子。氨基酸在中性pH 时，羧基以-COO -，氨基以-NH 3+形式存在。这样的氨基酸分子含有一个正电荷和一个负电荷，称为兼性离子。【知识模

20、块】 蛋白质36 【正确答案】 超二级结构是指在多肽链内顺序上相互邻近的二级结构常常在空间折叠中靠近，彼此相互作用，形成规则的二级结构聚集体。目前发现的超二级结构有三种基本形式： 螺旋组合()； 折叠组合()和 螺旋 折叠组合()，其中以 组合最为常见。它们可直接作为三级结构的“ 建筑块”或结构域的组成单位，是蛋白质构象中二级结构与三级结构之间的一个层次，故称超二级结构。【知识模块】 蛋白质37 【正确答案】 糖蛋白是分支的寡糖链与多肽链共价相连所构成的复合糖，主链较短，在大多数情况下，糖的含量小于蛋白质。同时，糖蛋白还是一种结合蛋白质，糖蛋白是由短的寡糖链与蛋白质共价相连构成的分子。【知识模

21、块】 蛋白质38 【正确答案】 肽键是一个氨基酸分子的 -羧基和另一个氨基酸分子的 -氨基发生酰化反应，脱去一分子水形成的酰胺键。【知识模块】 蛋白质39 【正确答案】 某些代谢物能与变构酶分子上的变构部位特异性结合，使酶的分子构象发生改变，从而改变酶的催化活性以及代谢反应的速度，这种调节作用就称为酶的别构调节，也称为变构调节。40 【正确答案】 核苷酸是核酸的基本结构单位，一类由嘌呤碱或嘧啶碱、核糖或脱氧核糖以及磷酸三种物质组成的化合物。它具有多种生物学功能：是 DNA和 RNA 合成的前体；其衍生物是许多生物合成的活化的中间物； ATP 是生物系统最通用的能量、GTP 赋予大分子例如新生肽

22、链在核糖体上的移位运动的动力及信号偶联蛋白的活化；腺苷酸是三种主要辅酶 NAD+、FAD +和 CoA 的组分；核苷酸也是代谢调节物，例如 cAMP、cGMP 是许多激素行使调节作用的细胞内信使。41 【正确答案】 电子传递过程的氢以质子形式脱下，电子沿呼吸链转移到分子氧，形成粒子型氧，再与质子结合生成水。放出的能量则使 ADP 和磷酸生成 ATP。电子传递和 ATP 形成的偶联机制称为氧化磷酸化。42 【正确答案】 DNA 拓扑异构酶是存在于细胞核内，能够催化 DNA 链的断裂和结合，从而控制 DNA 拓扑状态的一类酶。DNA 拓扑异构酶可以分两类：拓扑异构酶 I，主要催化 DNA 链的断裂

23、和重新连接，每次只作用于一条链，即催化瞬时的单链的断裂和连接，它们不需要能量辅因子如 ATP 或 NAD；拓扑异构酶II，其能同时断裂并连接双股 DNA 链，它们通常需要能量辅因子 ATP。43 【正确答案】 聚合酶链式反应(PCR)是一种选择性体外扩增 DNA 或 RNA 的方法，其基本步骤是：变性。目的双链 DNA 片段在 94下解链；退火。两种寡核苷酸引物在适当温度(50左右) 下与模板上的目的序列通过氢键配对； 延伸。在 Taq DNA 聚合酶合成 DNA 的最适温度下，以目的 DNA 为模板进行合成。由这三个基本步骤组成一轮循环，理论上每一轮循环将使目的 DNA 扩增一倍，这些经合成

24、产生的 DNA 又可作为下一轮循环的模板，一般样品经过 30 次循环，最终使基因放大了数百万倍，扩增了特异区段的 DNA 带。44 【正确答案】 细胞色素是一种以铁卟啉复合体为辅基的血红素蛋白。在氧化还原过程中，血红素基团的铁原子可以传递单个的电子而不必成对传递，其中的铁通过 Fe3+和 Fe2+两种状态的变化传递电子。主要有细胞色素 a、细胞色素 b、细胞色素 c 和细胞色素 d 四类。45 【正确答案】 透析和超过滤是利用蛋白质分子不能通过半透膜的性质，使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开的两种蛋白质纯化方法，其中：(1)透析只需要使用专用的半透膜即可完成，通常是将半透膜制成袋

25、状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。(2)超过滤也称超滤，是一种加压膜分离技术，即在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，而使大分子溶质不能透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化。超滤根据所加的操作压力和所用膜的平均孔径的不同，可分为微孔过滤、超滤和反渗透三种。46 【正确答案】 蛋白质结构域是介于二级和三级结构之间的另一种结构层次，具体指蛋白质亚基结构中明显分开

26、的紧密球状结构区域，又称为辖区。多肽链首先是在某些区域相邻的氨基酸残基形成有规则的二级结构，然后，又由相邻的二级结构片段集装在一起形成超二级结构，在此基础上多肽链折叠成近似于球状的二级结构。对于较大的蛋白质分子或亚基，多肽链往往由两个或多个在空间上可明显区分的、相对独立的区域性结构缔合而成三级结构，这种相对独立的区域性结构就称为结构域。47 【正确答案】 增色效应是指由于 DNA 变性引起的光吸收增加现象，也就是变性后 DNA 溶液的紫外吸收作用增强的效应。DNA 分子具有吸收 250280nm 波长的紫外光的特性，其吸收峰值在 260nm。DNA 分子中碱基间电子的相互作用是紫外吸收的结构基

27、础，但双螺旋结构有序堆积的碱基又“束缚” 了这种作用。变性DNA 的双链解开，碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收，故而产生增色敬应。48 【正确答案】 当溶液在某一定 pH 值时，使某特定蛋白质分子上所带正负电荷相等，成为两性离子，在电场中即不向阳极移动也不向阴极移动，此时溶液的 pH值即为该蛋白质的等电点(pI)。在等电点时，蛋白质的溶解度最小，在电场中不移动。蛋白质在溶液中的游离状态受溶液 pH 值的影响，在酸性环境中蛋白质分子电离成阳离子，在碱性环境中则电离成阴离子，蛋白质在某一 pH 值的溶液中所带正、负电荷的量相等时，则称为兼性离子(两性离子)。49 【正确答案】 (1)生物细胞将

28、糖、脂、蛋白质等燃料分子氧化分解，最终生成CO2 和 H2O 并释放出能量的作用称为生物氧化。 (2) 有机物在生物体内的氧化与非生物氧化(燃烧) 在化学本质上并无差别，都是将有机物氧化，释放出 CO2 和 H2O以及能量的过程。根据热力学原理，有机物氧化时释放的能量只取决于反应的始态和终态，不受反应途径的影响。因此，同种有机物无论是生物氧化或燃烧，当终产物相同时，释放的能量相等。 然而，生物氧化与体外的一般氧化反应如燃烧又有明显差异： (a)生物氧化是在活细胞内，氧化条件温和(在生物体温、pH 接近中性、一个大气压和有水存在)的内环境中进行的；燃烧是在体外、高温干燥的条件下进行的。 (b)生

29、物氧化是分阶段，经系列反应才完成的，能量逐步缓慢释放；燃烧无阶段可分，是一次性的剧烈氧化，能量爆发式的释放。 (c)生物氧化的能量利用效率远比燃烧高，生物氧化释放的能量除以热能形式散失掉一部分外，尚有相当多的能量可重新以化学能的形式(主要以 ATP 形式)贮存利用；燃烧时化学能全部以热能形式释放。 (d)水是燃烧的猝灭剂，生物氧化中水是不可缺少的，由于水的参与，不仅为生物氧化提供了必要的条件，而且还直接参加反应，增加了代谢物脱氢的机会，从中可获得更多的能量。生物体普遍存在一种代谢物先加水后脱氢的氧化方式，可将这种反应称为“ 预制脱氢反应 ”。50 【正确答案】 (1)基因工程上把那些具有识别双

30、链 DNA 分子中的某种特定核苷酸序列，并由此切割 DNA 双链结构的核酸内切酶统称为限制性内切核酸酶。根据限制性内切核酸酶的作用特点，将它们分为三大类：I 类限制性内切核酸酶。I 类限制性内切核酸酶的分子量较大，一般在 30 万道尔顿以上，通常由三个不同的亚基所组成；II 类限制性内切核酸酶。这类酶的分子量较小，一般在 24万道尔顿，通常由 24 个相同的亚基所组成。它们的作用底物为双链 DNA，极少数 II 类酶也可作用于单链 DNA，或 DNARNA 杂种双链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也有要求，因此，II 类酶既具有切割位点的专一性，也具

31、有识别位点的专一性，一般在识别序列内切割；类限制性内切核酸酶。类限制性内切核酸酶是基因工程中不常用的酶，分子量和亚基组成类似于 I 类酶，作用方式基本同 II 类酶。(2)举例说明其应用： 可以识别。DNA 特定序列，切割 DNA 片段和载体，产生互补的黏性末端，用于定向克隆；通过单一或两种限制性内切核酸酶酶切插入了外源片段的载体，判断外源片段是正向插入还是反向插入；每种细菌和质粒都有特异的限制性内切核酸酶酶切图谱，可用于粗略判断细菌或质粒的种类；切割染色体 DNA，用于构建基因文库； 限制性片段长度多态性(RFLP)。检测DNA 在限制性内切酶酶切后形成的特定 DNA 片段的大小。因此凡是可

32、以引起酶切位点变异的突变如点突变(新产生和去除酶切位点)和一段 DNA 的重新组织(如插入和缺失造成酶切位点间的长度发生变化)等均可导致 RFLP 的产生。51 【正确答案】 (1)酶(enzyme)是生物体活细胞产生的具有特殊催化活性和特定空间构象的生物大分子，包括蛋白质及核酸，又称为生物催化剂。绝大多数酶是蛋白质，少数是核酸 RNA，后者称为核酶。酶按其分子组成分类如下：由上述介绍可知，结合酶由蛋白部分和非蛋白部分组成，其中的非蛋白部分即为辅助因子。按其与酶蛋白结合的紧密程度，辅助因子可分为如下两种：辅酶(coenzyme)与酶蛋白结合疏松的酶辅助因子，可以用透析或超滤的：方法除去；辅基(

33、prosthetic group)，与酶蛋白结合紧密的辅助因子，用透析或超滤的方法不易除去。 (2)全酶 =酶蛋白+辅助因子，只有全酶才具有催化作用。酶促反应的专一性及高效率取决于酶蛋白部分，而辅助因子决定酶促反应的性质。52 【正确答案】 DNA 分子(1)复性到原来的 DNA 结构可能性更大些。因为 DNA复性率与核苷酸对的复杂性成正比，DNA 分子(1)是单一重复序列 而 DNA 分子(2)分子结构较为复杂，所以 DNA 分子(1)复性到原来的 DNA 结构比 DNA 分子(2)更容易实现。53 【正确答案】 (1)原理。核苷、核苷酸、核酸的组成成分中都有嘌呤、嘧啶碱基，这些碱基都具有共

34、轭双键(-C-C=C-C=C-)，在紫外光区的 250 一 280nm 处有强烈的光吸收作用，最大吸收值在 260nm 左右。常利用核酸的紫外吸收性进行核酸的定量测定。核酸的摩尔消光系数(或称吸收系数)用来表示，为每升溶液中含有 1 克原子核酸磷的光吸收值(即 A)。从 A260A 280 的比值可判断样品的纯度。纯 RNA 的A260/A28020；DNA 的 A260A 2801.8。当样品中蛋白质含量较高时，则比值下降。RNA 和 DNA 的比值分别低于 20 和 18 时，表示此样品不纯。蛋白质也有紫外吸收，通常蛋白质的吸收高峰在 280nm 波长处，在 260nm 处的吸收值仅为核酸

35、的 110 或更低，因此对于含有微量蛋白质的核酸样品，测定误差较小。若待测的核酸制品中混有大量的具有紫外吸收的杂质，则测定误差较大，应设法除去。不纯的样品不能用紫外吸收值作定量测定。测得未知浓度核酸溶液的 A260nm 值，即可以计算出其中 RNA 或 DNA 的含量。 (2)试剂和器材。试剂包括： 钼酸铵过氯酸沉淀剂：取 36mL 70过氯酸和 025g 钼酸铵溶于 964mL 蒸馏水中，即成 025钼酸铵-25过氯酸溶液；56氨水：用 2530氨水稀释 5 倍。材料：酵母 RNA 干粉。 (3)步骤： 准确称取待测核酸样品05g，加：少量 00lmolL NaOH 调成糊状，再加适量水，用

36、 56氨水调至 pH 70，定容至 50mL；取两支离心管，甲管加入 2mL 样品溶液和 2mL 蒸馏水，乙管加入 2mL 样品溶液和 2mL 钼酸铵一过氯酸沉淀剂。混匀，在冰浴上放置 30min；在 3000 r min 下离心 10min。从甲、乙两管中分别吸取 05 mL 上清液，用蒸馏水定容至 50mL。选择厚度为 1cm 的石英比色杯，在 260nm 波长处测定 A 值；测定 A280 的值。求出 A260A 280，判断核酸的纯度：纯 RNA 的A260A 28020；DNA 的 A260A 28018。式中，A 260 为甲管稀释液在 260nm 波长处 A 值减去乙管稀释液在

37、260nm 波长处 A 值；L 为比色杯的厚度，cm；N 为稀释倍数； 0 024 表示每毫升溶液内含 1gRNA 的 A 值；0020 表示每毫升溶液内含 1gDNA 的 A 值。在本实验中，1mL 待测液中制品量为 50g。 (5) 注意事项：紫外分光光度计使用前要预热； 比色皿应成套使用，注意保护，不能拿在光面上；离心机使用前必须将离心管平衡，对称放置。调速必须从低到高，离心完等转子完全停下后，冉打开盖子，然后将转速打到最低。54 【正确答案】 蛋白质多种多样的功能与各种蛋白质特定的空间构象密切相关，蛋白质的空间构象是其功能活性的基础，构象发生变化，其功能活性也随之改变。蛋白质变性时，由

38、于其空间构象被破坏，故引起功能活性丧失，变性蛋白质在复性后，构象复原，活性即能恢复。在生物体内，当某种物质特异地与蛋白质分子的某个部位结合，触发该蛋白质的构象发生一定变化，从而导致其功能活性的变化，这种现象称为蛋白质的别构效应。蛋白质(或酶)的别构效应，在生物体内普遍存在，这对物质代谢的调节和某些生理功能的变化都十分重要。55 【正确答案】 tRNA 存在大量修饰型的核苷酸，即存在除合成所有 RNA 所用的 A、G、C 和 u 碱基以外的核苷酸，是因为多数分布在非配对区，特别是在反密码子 3端邻近部位出现的频率最高，且大多为嘌呤核苷酸。这对于维持反密码子环的稳定性及密码子、反密码子之间的配对是很重要的。这些修饰型的核苷酸的生物学意义：扩展或者限制碱基配对的能力；提高密码子和反密码子结合的稳定性；影响翻译的起始，维持阅读框；其他还有一些调控细胞内部代谢方面的作用。