DB23 T 2683-2020 水稻回交转育技术操作规程.pdf

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1、ICS 65.020.20B 05黑 龙 江 省 地 方 标 准DB23DB23/T 2683 2020水 稻 回 交 转 育 技 术 操 作 规 程 2020-09-11发 布黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布2020-10-10实 施 DB23/T 2683-2020 I 前 言本 标 准 依 据 GB/T 1.1-2009编 写 规 则 起 草 。本 标 准 由 黑 龙 江 省 农 业 农 村 厅 提 出 。本 标 准 由 黑 龙 江 省 农 业 标 准 化 技 术 委 员 会 归 口 。本 标 准 起 草 单 位 ： 黑 龙 江 省 农 业 科 学 院 耕 作 栽 培

2、研 究 所 、 中 国 科 学 院 遗 传 与 发 育 生 物 学 研 究 所 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 来 永 才 、 朱 祯 、 孟 英 、 王 锋 、 唐 傲 、 张 磊 、 张 喜 娟 、 李 平 、 陈 在 杰 、 董 文 军 、刘 猷 红 、 陈 丽 华 、 王 立 志 、 姜 树 坤 、 刘 凯 、 刘 琦 、 姜 辉 、 任 洋 、 董 德 建 。 DB23/T 2683-2020 1 水 稻 回 交 转 育 技 术 操 作 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 水 稻 回 交 转 育 技 术 的 术 语 和 定 义 、 亲 本 选 择 、 杂 交 方 法 、 回

3、 交 转 育 及 生 产 档 案 。本 标 准 适 用 于 水 稻 回 交 转 育 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。GB/T 8321（ 所 有 部 分 ） 农 药 合 理 使 用 准 则 GB/T 17316 水 稻 原 种 生 产 技 术 操 作 规 程NY/T 496 肥 料 合 理

4、使 用 准 则 通 则NY/T 1276 农 药 安 全 使 用 规 范 总 则NY/T 1433 水 稻 品 种 鉴 定 技 术 规 程 SSR标 记 法DB23/T 1671.3 亿 亩 生 态 高 产 标 准 农 田 水 稻 生 产 技 术 规 程DB23/T 1929 常 规 水 稻 品 种 纯 度 检 测 SSR方 法3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 文 件 。3.1 轮 回 亲 本用 于 多 次 回 交 的 亲 本 ， 是 目 标 性 状 的 接 受 者 ， 又 称 受 体 亲 本 。 3.2 非 轮 回 亲 本只 在 第 一 次 杂 交 时 应 用

5、 的 亲 本 ， 是 目 标 性 状 的 提 供 者 ， 又 称 供 体 亲 本 。3.3 回 交 转 育两 亲 本 杂 交 后 ， 其 杂 交 后 代 再 与 亲 本 之 一 进 行 连 续 多 次 的 回 交 ， 通 过 对 回 交 后 代 的 选 择 把 亲 本 的 目标 性 状 导 入 另 一 亲 本 的 育 种 方 法 。3.4 分 子 标 记 选 择利 用 与 目 标 性 状 基 因 紧 密 连 锁 或 表 现 共 分 离 关 系 的 分 子 标 记 ， 在 分 离 群 体 中 对 个 体 基 因 型 进 行 选 择 。4 亲 本 选 择 4.1 轮 回 亲 本 选 择选 择 产

6、量 高 、 综 合 性 状 较 好 ， 经 改 良 后 仍 有 前 途 的 品 种 。4.2 非 轮 回 亲 本 选 择 DB23/T 2683-2020 2 应 具 备 轮 回 亲 本 所 不 具 备 的 目 标 性 状 ， 该 性 状 遗 传 力 强 ， 单 基 因 控 制 或 少 数 主 效 基 因 控 制 的 为 佳 ，其 他 性 状 无 严 重 缺 陷 。5 杂 交 方 法5.1 亲 本 开 花 期 的 调 节根 据 不 同 亲 本 的 生 育 期 ， 通 过 调 整 播 期 或 遮 光 等 方 式 ， 使 杂 交 亲 本 的 花 期 相 遇 。5.2 去 雄在 杂 交 母 本 里

7、选 择 稻 穗 并 剪 除 上 部 已 开 花 的 穗 粒 和 最 下 端 的 穗 粒 ， 留 中 间 部 位 的 10个 20个 穗 粒 ，每 个 穗 粒 剪 去 外 颖 上 端 的 三 分 之 一 ， 去 除 6个 花 药 ， 待 所 留 穗 粒 全 部 去 雄 完 毕 后 套 袋 。5.3 授 粉 去 雄 的 母 本 稻 穗 ， 应 在 当 日 或 次 日 进 行 人 工 授 粉 。 当 父 本 稻 穗 进 入 开 花 期 时 ， 取 下 正 开 花 的 父 本 稻穗 ， 将 花 粉 抖 撒 入 授 粉 袋 内 。 授 粉 完 毕 后 ， 挂 牌 写 明 亲 本 名 称 、 授 粉 日

8、期 。5.4 收 获杂 交 籽 粒 成 熟 后 ， 应 及 时 按 组 合 单 独 脱 粒 收 获 ， 统 计 数 量 后 填 写 记 录 并 保 存 。 即 得 到 杂 种 一 代 种 子 。6 回 交 转 育6.1 基 本 程 序6.1.1 技 术 流 程回 交 转 育 的 技 术 流 程 可 参 考 附 录 A。 6.1.2 连 续 回 交在 杂 种 一 代 和 每 次 回 交 后 代 中 根 据 分 子 标 记 选 择 具 有 目 标 性 状 基 因 且 背 景 恢 复 率 高 的 个 体 与 轮 回亲 本 回 交 。 回 交 的 同 时 记 录 每 一 世 代 目 标 性 状 的 遗

9、 传 分 离 情 况 ， 以 确 认 目 标 性 状 的 遗 传 效 应 。6.1.3 自 交 纯 化在 回 交 到 适 宜 世 代 后 ， 还 需 自 交 2代 3代 ， 使 回 交 后 代 的 目 标 性 状 从 杂 合 状 态 通 过 自 交 纯 化 ， 获 得性 状 稳 定 的 株 系 。 稳 定 株 系 与 轮 回 亲 本 遗 传 背 景 的 相 似 度 可 根 据 NY/T 1433 提 供 的 方 法 进 行 分 子 鉴 定 。6.2 回 交 次 数 和 群 体 规 模6.2.1 回 交 次 数 原 则回 交 次 数 以 轮 回 亲 本 的 特 征 特 性 基 本 得 到 恢 复

10、 为 准 。 亲 本 间 差 异 小 时 ， 回 交 次 数 可 少 些 ， 若 目 标 性状 基 因 与 不 良 基 因 连 锁 ， 应 增 加 回 交 次 数 。 回 交 群 体 中 轮 回 亲 本 的 基 因 恢 复 频 率 P1和 从 轮 回 亲 本 导 入 基 因 的 纯 合 体 比 率 P2， 可 根 据 式 （ 1） 和式 （ 2） 计 算 ： = t 00% 式 中 ：P1轮 回 亲 本 的 基 因 恢 复 频 率 ； DB23/T 2683-2020 3 n回 交 次 数 。 = 00%. 式 中 ：P2从 轮 回 亲 本 导 入 基 因 的 纯 合 体 比 率 ；n回 交

11、次 数 ；r为 杂 种 的 杂 合 基 因 对 数 。6.2.2 回 交 群 体 的 规 模为 保 证 回 交 的 植 株 带 有 需 要 转 移 的 目 标 性 状 基 因 ， 每 一 回 交 世 代 必 须 种 植 足 够 的 株 数 ， 可 根 据 式 3计 算 ： log log 3 式 中 ：m所 需 种 植 数 量 ；为 几 率 水 准 ；p在 杂 种 群 体 中 合 符 需 要 的 基 因 型 期 望 比 率 。6.3 回 交 后 代 的 鉴 定 与 选 择6.3.1 选 择 原 则在 回 交 后 代 中 ， 选 择 具 有 目 标 性 状 且 农 艺 性 状 与 轮 回 亲 本

12、 尽 可 能 相 似 的 单 株 进 行 回 交 。6.3.2 农 艺 性 状 特 征轮 回 亲 本 和 回 交 后 代 的 主 要 农 艺 性 状 特 征 田 间 记 载 项 目 参 考 GB/T17316执 行 ， 并 按 所 记 录 的 内 容 进行 对 比 鉴 定 。 6.3.3 回 交 后 代 的 分 子 标 记 选 择6.3.3.1 基 本 要 求需 已 知 控 制 目 标 性 状 的 基 因 或 与 之 紧 密 连 锁 的 标 记 ， 且 分 型 标 记 来 自 于 该 基 因 内 部 或 与 之 紧 密 连 锁的 侧 翼 标 记 。6.3.3.2 基 因 或 标 记 位 点 来

13、 源宜 选 择 公 开 文 献 中 报 道 的 ， 或 已 公 开 并 获 使 用 许 可 的 专 利 ； 也 可 是 前 期 研 究 获 得 的 目 标 性 状 的 基 因或 标 记 。6.3.3.3 DNA提 取 、 扩 增 和 产 物 检 测按 照 DB23/T 1929提 供 的 方 法 进 行 。 6.3.3.4 选 择 方 法根 据 回 交 后 代 群 体 目 标 性 状 的 基 因 分 型 结 果 ， 保 留 携 带 目 标 性 状 基 因 及 遗 传 背 景 恢 复 率 高 的 单 株 用于 下 一 世 代 的 回 交 或 自 交 。6.4 材 料 种 植 和 田 间 管 理

14、DB23/T 2683-2020 4 亲 本 和 回 交 后 代 材 料 采 取 单 株 种 植 ， 群 体 种 植 的 数 量 根 据 本 文 件 中 6.2.2所 列 公 式 和 田 间 实 际 条 件计 算 ， 育 苗 和 田 间 管 理 参 照 DB23/T 1671.3执 行 ， 肥 料 使 用 应 符 合 NY/T 496的 规 定 ， 农 药 使 用 应 符 合 GB/T8321、 NY/T 1276的 规 定 。7 生 产 档 案应 建 立 生 产 档 案 ， 内 容 包 括 ： 亲 本 信 息 、 回 交 世 代 材 料 信 息 、 鉴 定 选 择 结 果 、 种 植 时 间 、 种 植 数 量 、杂 交 时 间 、 杂 交 粒 数 量 、 田 间 管 理 详 情 和 收 获 期 等 。 DB23/T 2683-2020 5 附 录 A（ 资 料 性 附 录 ）回 交 转 育 的 技 术 流 程A.1 回 交 转 育 技 术 流 程 见 图 A.1。 图 A.1 回 交 转 育 的 技 术 流 程 图