DB11 T 1498-2017 卫生应急样本采集技术规范.pdf
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1、ICS 11.020 C 50 备案号: 57501-2017 DB11 北京市地方 标准 DB11/T 1498 2017 卫生应急样本采集技术规范 Technical specifications for public health emergency sampling 2017 - 12 - 15发布 2018 - 04 - 01实施 北京市质量技术监督局 发布DB11/T 1498 2017 I 目 次 前 言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语与定义 1 4 基本要求 1 5 技术要求 2 6 采集方法 5 7 样本运送 7 附录 A (规范性附录) 人间传染的病原
2、微生物包装名录 9 附录 B (资料性附录) 标本记录 . 22 附录 C (规范性附录) 水样的保存 . 23 DB11/T 1498 2017 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。 本标准由北京市卫生和计划生育委员会提出并归口。 本标准由北京市卫生和计划生育委员会组织实施。 本标准起草单位:北京市疾病预防控制中心。 本标准主要起草人:宁芳、 王东、 钱城、 马宁、 胡丽 、 况海涛、 曹昱、 杨扬 、 黄高平 、 林长缨、 李 锡太、 贺雄 、曹若湘 、沈壮 、 赵丽杰 。 DB11/T 1498 2017 1 卫生应急样本采集技术规范 1 范围 本标准规定
3、 了突发公共 卫生 事 件现场 样本采集的基本要求、技术要求、采集方法及 样本的保存。 本标准 适用 于突发公共 卫生 事 件现场 样本的采集 ,职业病 危害事故现场 样本采集可参 照执行 。 2 规范性引用文件 下列文件 对于 本文件的 应用 是必不可少 的。 凡是注日期 的引用文件 ,仅注日期 的 版本适 用于 本文件。 凡是不注日期 的引用文件 ,其最新版 本(包 括所有 的修改 单) 适用 于本文件。 GB/T 5750.2 生 活饮 用水标准检验 方法 水样的采集与保存 GB/T 18204(所有部分 ) 公共场所 卫生 检验 方法 HJ/T 166 土壤环境监测 技术规范 WS/T
4、 225 临床化学检验血液 样本的 收集与 处理 DB11/T 1291 卫生 应急一次 性防 护用 品使 用规范 DB11/T 1293.2 卫生 应急 最小工作 单元 装备 技术要求 第 2部分 :传染病 暴发处 置类 DB11/T 1293.3 卫生 应急最 小工作 单元 装备 技术要求 第3 部分 :化学 中毒 处 置类 3 术语与定义 下列术语与定义 适用 于本文件。 3.1 病原微生物 pathogenic microorganism 可 以侵犯 人体 ,引起 感染 甚至传染病的微生物 ,或称 病原 体。 3.2 生物样本 biological specimen 采集的生物 个体
5、、组织、 排泄物、 呕吐 物、 分泌 物、 涂抹 物。 3.3 环境样本 environmental specimen 在 突发公共 卫生 事件 现场 采集的水、 空气 、土壤 、食品、 表面涂抹 物。 4 基本要求 4.1 采样原则 DB11/T 1498 2017 2 样本采集 应遵循 及时 性、规范性、 科学 性、 专业 性原则。 4.2 采样种类 4.2.1 出 现 消化 道症状时 ,应 采集的生物样本包 括粪便或肛拭子 、呕吐 物、 血液及 以下样本: 肾脏受累时 应采集 尿样本 ; 涉及饮 水、 食品为感 染媒介时 , 还 应采集水、 食品 及食品加工过程 中的原料、 半成品 、
6、食品加 工工具表面涂抹 物、 食品从 业 人员的 肛拭子; 涉及啮齿类动 物、 节肢动 物为传 播媒介还宜 采集染 疫动物。 4.2.2 出 现 呼吸道症状时 ,应 采集的生物样本包 括血液 、咽拭子 和痰 液、 尿液 ;环境 样本包 括集中 空 调系统 的冷却 水和 冷凝 水。 4.2.3 出 现 皮肤感 染症状时 ,应 采集血液 和皮肤破损 处分 泌物样本。 4.2.4 出 现 眼部 感染 症状时 ,应 采集眼拭子 和血液 样本。 4.2.5 出 现 中毒症状时 ,应 采集的生物样本包 括血液 、 尿 液、 呕吐 物 ; 环境 样本包括 气体 、水、 食品 、 土壤。 4.3 采集人员防护
7、要求 4.3.1 病原微生物 所致 突发公共 卫生事 件现场 样本采集 时,应 按 DB11/T 1291的规定 选择 并使 用相 应 的防护 用品 。 化学中 毒现场 样本采集 时,应 按 DB11/T 1293.3的要求选择 并使 用防 护装 备。 4.3.2 原 因 不明 的现场 样本采集 时,宜 按 DB11/T 1291规定的最高 等级进 行防 护。 4.4 物品准备 4.4.1 病原微生物 所致 突发公共 卫生现场 样本采集 时, 除按照 DB11/T 1293.2中现场处置 装备 的规定 准 备 外, 还应 携带 装有 病毒 运 输液 的采样 管、装有 Cary-Blair运送
8、培养 基的采样管 、装 有营养肉汤 的 采样管 、血 琼脂 平板培养 基、无菌棉 拭子 、一次 性注 射器 、无菌 采样 袋。 4.4.2 化学中 毒样本采集 设备宜 按 DB11/T 1293.3中 现场处 置 设备 的规定准 备。 4.4.3 水样容器 的选择 应符合 GB/T 5750.2的规定。 4.4.4 试剂、 培养 基等 应按 说明书 要求保存 ,其 他用 品用 具宜每月 检查 并更 新。 4.4.5 运送样本 时应 按照附录 A的要求 进行 包装。 4.5 样本标识与记录 4.5.1 按照年度 ,每 次事 件独立编号,不 同事 件顺序编号 。 4.5.2 同 一 事件 所采集的
9、 不同 样本 应 顺序编号 ,且每份 样本 编号 应唯 一。 4.5.3 采集和运送样本的 容器 必须 有 醒目牢固 的防水标 签, 且 标明 样本 编号 。 4.5.4 样本采集记录 宜包 括附录 B内容 ,格式 可参 照附录 B样式 。 4.5.5 样本采集记录 表应 置于 样本包装 内, 随样本 一起送 入实验 室。 5 技术要求 5.1 生物样本采集 应符合 表 1的规定。 表 1 生物样本采集种类与要求 DB11/T 1498 2017 3 序号 采集种类 采集要求 采样量 1 咽拭子 应采集发病3d以 内 的病例样本 ,优先采集新发 病例的样本。重症病例尽量全部采集。 采集时需适当
10、用力,棉拭子头须触及咽后壁和 颚弓两侧。必要时可使用两支拭子同时采样。 病例数不足10例 , 采集全部病 例 样本; 病例数超过10例 , 至 少 采 集 10例 。 重 症 病 例尽量全部采 集; 有流行病学关联的患者的样 本全部采集。 2 肛拭子 应采集发病3d以 内 的病例样本 ,优先采集新发 病例的样本。 无法采集粪便时, 如无粪便排出 时采用肛拭子。 采集时应防止刺伤患者肠道和肛门。 有肛裂及痔疮情况,不应进行肛拭子采集。 病例数不足10例 , 采集全部病 例 样本; 病例数超过10例 , 至 少 采 集 10例 。 重 症 病 例尽量全部采 集; 有流行病学关联的患者的样 本全部采
11、集。 3 眼拭子 应靠近病灶处尽量多留取眼分泌物,尤其是脓 性分泌物,取样困难时可用刮勺从溃疡下部和 边缘刮取。 采样后立即接种在平板上。 病例数不足10例 , 采集全部病 例 样本; 病例数超过10例 , 至 少 采 集 10例 。 重 症 病 例尽量全部采 集; 有流行病学关联的患者的样 本全部采集。 4 血液 应采集发病7d内 的 急 性 期血清 样本,同时采集 EDTA抗 凝 血 样本;可采集发病28d后 的 血 清 样 本。宜采用分离胶采血管,血清采血管采用带 促凝剂的产品。采集后血清采血管应垂直方向 放置30min, 4000rpm/min, 离 心 20min, 保 证 血 清充
12、分分离,避免出现溶血。 病例数不足10例 , 采集全部病 例 样本; 病例数超过10例 , 至 少 采 集 10例 ; 有 流 行 病 学 关联的患者 的样本全部采集。 每例患者应采 集1 管血清样本、 1管EDTA 抗 凝 血 样本和1 管恢复期血清样本,每 管5mL。 5 呕吐物 应采集新鲜呕吐物,置于玻璃、聚乙烯或聚四 氟乙烯容器盛装,避免使用金属容器。 每份样本应采集50g以 上 ,不足 50g全 部 采集。 6 洗胃液 应采集最初抽出的液体。 每份样本应采集100mL 200mL。 7 粪便 应在用药前采集新鲜粪便,宜挑选有脓血、黏 液部分。不易获得粪便的患者及幼儿,可采集 肛拭子样
13、本。 成型便应采集10g 20g, 水样 便 应采集10mL 20mL。 8 尿 采集时应尽量采集中段尿,并防止其它体液和 粪便等污染,用于微生物分析时防止掺入抑菌 物质;用于其它分析的尿样本直接置于洁净聚 乙烯塑料瓶,可加适量酸性保存剂。 每例患者应采集2 份尿样本,一 份用于微生物检测, 一份用于其 它检测, 每份应至少采集30mL 50mL。 9 皮肤破损处分泌物 应无菌操作,皮损边缘、出血点、皮痂处用棉 拭子蘸取渗出液;采集疱疹液时用消毒针挑破 疱疹,用棉签蘸取疱疹液,可多个疱疹合并为 一份样本。采集的样本放入有运输液的采样管 中密封;口鼻处流血可用棉签蘸取样本,血液 污染的土壤、物品
14、也应采样。 每例患者应至少采集2 支棉拭子 的样本。 DB11/T 1498 2017 4 表 1生物样本采集种类与要求( 续) 序号 采集种类 采集要求 采样量 10 痰 液 肺 部 感 染 时 采集,宜采集患者急性期痰液。无 痰液时可选择采集深部痰液,如支气管肺泡灌 洗液。 根据患者痰量采集。 11 支 气 管 肺 泡灌洗液 肺部感染时 采集,应 严格遵 守 无菌操作; 合格 的支气管肺泡灌洗液应同时满足以下要求: 达到规定的 回 收比 例 ,至 少应 回收 30% 40%以 上 ; 不混有血液,红细胞数小于 10%; 不应混有多量的上皮细胞,一般小于 3%。 每份样本应收集30mL 10
15、0mL。 12 啮齿类、节肢类动 物个体 在事件发生的环境中尽可能多的采集动物个 体,按不同采集地点分别保存。 在划定的范围内尽可能多采集 样本。 5.2 环境样本采集 应符合 表 2的规定。 表 2 环境样本采集种类与要求 序号 采集种类 采集要求 采集量 1 固 体食品 应无菌采样,且采可能受到污染的与事件相关 的食品剩余部分、半成品和原料。体积较大的 固体食品,宜在不同部位分别取样且分别放入 无菌密封袋或广口瓶中。 每件200g 以 上 ,不 足 200g的 ,应 全 部 采集。 2 液 体食品 应无菌采样,且采集前应搅动或振动混匀。 每件200mL以 上 ,不足 200mL的 , 应
16、全 部 采集。 3 表面涂抹物 可选取地漏、养殖池、食品加工工具、人体接 触物品,进行表面涂抹采样。 食品加工工具宜选择盆、桶、碗、刀、筷子、 砧板等工具。清洗过的砧板可用刀刮取表面木 屑放入生理盐水或者磷酸盐缓冲溶液中。 人 体 接 触 物 品 包 括 抹 布 、 杯 具 、 棉 织 品 、 洁 具 、 购 物 车 ( 框 )、美容美发用具等用品,选取与 人体接触部位涂抹。 每25cm 2 采样面积为一份样本, 每 件用品用具采集2 份样本。 4 水 生 活饮用水、水源水的采集,应符合 GB/T 5750.2 的要求。 用于检测一般理化指标、金属、汞指标的水样 容器材质为聚乙烯;挥发性酚与氰
17、化物、耗氧 量、有机物指标的水样容器材质为玻璃;微生 物指标的水样容器为灭菌玻璃瓶, 并按每125mL 水样加入0.1mg硫代硫酸钠除去残 留 余氯; 有机 物检测水样应充满容器至溢流并密封保存。 用于检测细菌和病毒的水样至 少采集1000mL/件 ;空调冷却水、 冷凝水、游泳池水至少采集 500mL/件 ; 检测一般理化指标的 水样采集3 L 5L/件 ; 检测挥 发 性酚与氰化物、 金属含量的水样 采集0.5L 1L/件 ; 检测耗氧量 、 有机物含量的水样采集0.2L/ 件。 DB11/T 1498 2017 5 表 2 环境样本采集种类与要求( 续) 序号 采集种类 采集要求 采集量
18、5 气体 急性化学中毒时,选择中毒人员活动的作业地 点采样,采样点应设在浓度最高,接触时间最 长作业点处,采样器距地面呼吸带高度,采样 时间不超过15min。 硫 化 物、 二氧 化 氮 、 氧 化 物 需 避 光 采集。 无机含氮化合物、 氧化物采集量 至吸收液变色即止。 6 土壤 采样点应以 发生事故 的核心 区 为中心,采集 污 染 区域土壤35个 采样点, 深度 0cm 20cm, 并 在 距 污 染中心 相对远处 采集2 3 个对照点。 土壤 样本放入样 品袋,有 腐蚀性 或 要测定有挥 发性 化合物的样本,用广口瓶封装。 1kg 2kg 6 采集方法 6.1 生物样本 6.1.1
19、咽拭子 6.1.1.1 告知采样 目的 ,采样前 让被 采样 者 用 1%淡盐 水漱 口。 6.1.1.2 要求被 采样 者仰 头张 口,发 出 “啊” 音, 暴露 咽喉 。 6.1.1.3 取压舌 板压舌 ,用 无菌 咽拭子伸 入口 腔, 轻柔擦 拭两侧腭 弓和 双侧 咽扁桃 体及 咽 后壁 上的 分 泌 物 ,反 复擦拭 35 次,收 集 粘膜 细胞 ,应 避免 触及 舌 、口 腔粘膜 和唾 液。 6.1.1.4 取出咽拭子 ,将 接触 手的 部分折断 去掉 ,放 入含 有病 毒 运输 液的 无菌试管 ,旋紧管 盖。 6.1.2 肛拭子 6.1.2.1 采样前 应告知被 采样 者采样 目
20、的, 询问 是否 有肛 裂及 痔疮情 况, 如有 则不应 进行肛拭子采集。 6.1.2.2 填写采样记录单 ,检 查运送培养基 ,检 查 完好 后将 其放 置在 采样 时方 便拿 取的位 置 , 同 时准备 好 黄 色垃圾 袋。 6.1.2.3 采样时 应站 在被 采样 者侧 面, 要求 被采样 者采 取侧 卧屈膝位 或双手 支撑桌椅站 立前屈 位, 并 松 开衣裤 ,暴 露肛 门。 6.1.2.4 执握肛拭子 ,有 凹槽 的一 侧朝前 ,蘸 一些 生理 盐水。 6.1.2.5 顺着肛 管方 向缓 慢旋转 或侧 压 向前 插入 ,插 入深度 3cm4cm, 凹槽 部分 全部 进入后 停止 。
21、6.1.2.6 轻柔旋转 肛拭子 360, 然 后缓慢退 出, 观察 被采集 者 肛门有 无粪便 和出 血情 况, 如无 异常 情 况,嘱咐 其穿好衣裤 。 6.1.2.7 肛拭子 迅速 放入 运送 培养 基试管内 ,盖好 试管 塞。 6.1.3 眼拭子 取 无菌棉 拭子 轻沾 取眼 分泌 物 ,放 入无菌试管 中。 6.1.4 粪便 DB11/T 1498 2017 6 用 小 木 棒 挑取 新鲜 粪便置 入便盒 ; 液 状粪便 取絮 状物 ; 水样 便以吸 管吸 取, 放入无菌 、 密封 、 不 吸 水的有 盖容器内立 即送 检。 6.1.5 呕吐物 将 呕吐 物直接 收集 放入 灭菌 密
22、封 袋。 6.1.6 洗胃液 直接抽取洗胃 液注 入灭 菌容器内 。 6.1.7 血液 从 肘静脉 或其 它部 位的 静脉 取 血, 采样方法 应满足 WS/T 225的要求。 6.1.8 尿液 直接留取 中段 尿置 于洁净聚乙烯塑 料瓶 ,加 适量 酸性保存 剂。 6.1.9 皮肤疱疹液样本 先 用 75%酒精 对疱疹 周围 皮肤进 行消毒, 用灭 菌 拭子 刮取 病灶 破损 部位的 脓血液或 渗出 液 ; 如 疱疹 无 破损 用灭 菌注 射器 或消毒 针 将疱疹挑 破, 用灭 菌拭子蘸取 液体 ,迅速将 棉签 放 入内装 3mL5mL 保存 液 的采样 管中 ,在 靠近 顶端 处 折断 棉
23、签 ,旋紧 管盖 。 6.1.10 痰液 6.1.10.1 自然咳 痰法:用 清水 或冷 开水反 复漱 口, 用力 深咳 ,直接 吐入无菌 采集 容器 中, 立 即 送 检 。 6.1.10.2 诱导咳 痰法: 对于 痰量 少、 无 痰或 咳痰 困难 者可 雾化 吸 入, 使痰 液易 于排 出。 于 超声雾化器 雾 化 杯中 加入 4 的氯 化钠 溶液 40mL,吸 入高 渗盐溶 液, 15min 25min后嘱患者漱 口, 用力 咳出 深部 痰,收 集入无菌 采集 容器 中送检 。 6.1.10.3 支气管 镜采集法:按 常 规 支 气 管 镜 检 的方法 进行, 在有痰 和病 变部 位用
24、导管 吸引直接取得样 本 , 置于 无菌 采集 容器 中。 6.1.10.4 小儿取 痰法:用 弯压舌 板向 后 压舌 , 将 拭子 伸入 咽部, 小 儿经压舌 刺激咳嗽 时, 喷 出 肺 部 或 气管分 泌物 , 将粘 在拭子上 的 分泌 物置 于无菌 采集 容器中。 幼儿 还可 用手 指 轻叩胸骨柄 上方 , 以诱 发 咳 痰。 6.1.11 支气管肺泡灌洗液 6.1.11.1 局部麻醉 后, 将纤维 支气 管镜插 入右 肺中 叶或 左肺 舌段的 支气 管, 将其 项端 契入支 气 管 分 支 开口。 6.1.11.2 经气管 活检 孔缓缓 注入 37 灭 菌生 理盐 水, 每次 30mL
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