DB50 T 1043-2020 无菌（Germ-freeGF）猪生产技术规范.pdf

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1、ICS 65.020.30B40/49 DB50重 庆 市 地 方 标 准DB 50/T 10432020无 菌 （ Germ-free,GF） 猪 生 产 技 术 规 范 Production Technical Practice of Germ-free Pig 2020-10-10 发 布 2020-12-30 实 施重 庆 市 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB50/T 10432020 1 目 次1.范 围 .32.规 范 性 引 用 文 件 .33.术 语 和 定 义 .34.设 施 设 计 .45.隔 离 器 .66.日 粮 .87.无 菌 猪 的 制 备 .98.无 菌

2、猪 的 饲 养 管 理 .10 DB50/T 10432020 2 前 言本 标 准 按 照 GB/T 1.1-2009给 出 的 规 则 编 写 。本 标 准 由 重 庆 市 畜 牧 科 学 院 提 出 。本 标 准 由 重 庆 市 农 业 农 村 委 员 会 归 口 。本 标 准 主 要 起 草 单 位 ： 重 庆 市 畜 牧 科 学 院 、 重 庆 百 斯 达 生 物 科 技 有 限 公 司 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 孙 静 、 葛 良 鹏 、 刘 作 华 、 梁 浩 、 丁 玉 春 、 吴 梦 、 林 保 忠 、 黄 勇 、 杨 松 全 。 DB50/T 10432020

3、3 无 菌 （ Germ-free, GF） 猪 生 产 技 术 规 范1 范 围本 标 准 规 定 了 无 菌 猪 的 术 语 和 定 义 、 设 施 设 计 、 隔 离 器 、 日 粮 ， 无 菌 猪 获 取 与 人 工 饲 养 等 内 容 。本 标 准 适 用 于 无 菌 猪 的 制 备 、 培 育 和 相 关 实 验 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版

4、 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。GBZ 133 医 用 放 射 性 废 物 的 卫 生 防 护 管 理GB/T 191 包 装 储 运 图 示 标 志 GB/T 4789.18 食 品 卫 生 微 生 物 学 检 验 乳 与 乳 制 品 检 验GB 5749 生 活 饮 用 水 卫 生 标 准GB 8978 污 水 综 合 排 放 标 准GB/T 18641 伪 狂 犬 病 诊 断 技 术GB 14925 实 验 动 物 环 境 及 设 施GB/T 14926.41 实 验 动 物 无 菌 动 物 生 活 环 境 及 粪 便 标 本 的 检 测 方 法G

5、B 16551 猪 瘟 检 疫 技 术 规 范GB 50052 供 配 电 系 统 设 计 规 范GB 50068 建 筑 结 构 可 靠 性 设 计 统 一 标 准GB 50447 实 验 动 物 设 施 建 筑 技 术 规 范SN/T 1919-2016 猪 细 小 病 毒 病 检 疫 技 术 规 范NY/T 679 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 症 免 疫 酶 试 验 方 法 3 术 语 和 定 义下 列 术 语 与 定 义 适 用 于 本 文 件 。3.1 无 菌 猪 Germ-free (GF) pig利 用 现 有 检 测 手 段 ， 无 可 检 出 一 切 活 的 微 生 物

6、（ 包 括 细 菌 、 病 毒 ） 和 寄 生 虫 ， 能 保 证 猪 源 性 细 胞 、组 织 、 器 官 的 生 物 安 全 性 和 清 晰 的 微 生 物 背 景 的 实 验 用 猪 ， 简 称 无 菌 猪 。3.2 悉 生 猪 Gnotobitoic (GN) pig 以 无 菌 猪 为 对 象 ， 通 过 微 生 物 移 植 技 术 构 建 出 只 含 有 特 定 菌 群 ， 并 始 终 在 可 屏 蔽 外 界 微 生 物 条 件 下生 活 的 实 验 用 猪 ， 可 分 为 单 一 菌 株 移 植 悉 生 猪 和 组 合 菌 群 移 植 悉 生 猪 。 DB50/T 1043202

7、0 4 3.3 隔 离 环 境 Isolation environment与 外 界 完 全 隔 离 ， 可 阻 断 任 何 外 源 微 生 物 侵 入 的 封 闭 空 间 。3.4 屏 障 环 境 Barrier environment隔 离 环 境 的 第 一 层 保 障 ， 用 于 放 置 和 使 用 无 菌 隔 离 器 。4 设 施 设 计 4.1 选 址4.1.1 场 址 远 离 有 严 重 空 气 污 染 、 噪 声 干 扰 和 生 物 安 全 风 险 等 区 域 。4.1.2 设 施 供 电 符 合 GB 50052 的 要 求 。 屏 障 设 施 和 隔 离 环 境 设 施 应

8、 采 用 不 低 于 二 级 电 力 负 荷 供 电 。 宜具 备 双 路 供 电 或 具 备 应 急 电 源 ， 保 持 屏 障 设 施 和 隔 离 环 境 设 施 的 不 间 断 运 转 。4.1.3 水 源 充 足 ， 取 用 方 便 ， 有 存 储 、 净 化 设 施 ， 能 够 保 证 生 产 、 生 活 用 水 ， 水 质 应 符 合 GB 5749 的规 定 。4.2 规 划 布 局4.2.1 生 产 区 布 局4.2.1.1 无 菌 猪 生 产 区 按 照 非 净 化 区 、 净 化 区 、 粪 污 处 理 区 等 功 能 分 区 。 各 功 能 区 之 间 应 设 置 防 疫

9、 隔 离带 或 墙 。 4.2.1.2 非 净 化 区 的 设 置 包 括 办 公 室 、 监 控 室 、 库 房 、 机 械 设 备 室 （ 维 修 室 ） 、 淋 浴 室 、 工 作 人 员 休 息室 、 更 衣 室 、 母 猪 准 备 室 、 走 廊 、 废 弃 物 品 存 放 处 理 间 、 清 洗 消 毒 室 、 污 物 走 廊 、 以 及 人 员 用 卫 生 间 等 。4.2.1.3 净 化 区 的 设 置 一 般 按 照 无 菌 猪 接 生 区 、 无 菌 猪 生 产 区 、 实 验 区 和 辅 助 区 分 区 。 净 化 生 产 区 包 括更 衣 间 、 缓 冲 间 、 风 淋

10、 室 、 洁 净 手 术 室 、 无 菌 猪 生 产 饲 养 室 等 。 净 化 实 验 区 包 括 更 衣 间 、 缓 冲 间 、 风 淋室 、 洁 净 手 术 室 、 隔 离 饲 养 室 等 。 净 化 生 产 区 和 净 化 实 验 区 可 共 用 更 衣 间 、 缓 冲 间 、 风 淋 室 和 洁 净 手 术室 等 功 能 区 。 辅 助 区 包 括 熏 蒸 房 、 洁 净 物 品 存 放 室 、 洁 净 走 廊 。4.2.1.4 粪 污 处 理 区 主 要 包 括 兽 医 室 、 隔 离 猪 舍 、 病 死 猪 处 理 区 、 贮 粪 池 、 污 水 池 。 应 设 在 场 区 下

11、风 向或 侧 风 向 及 地 势 较 低 处 ， 与 生 产 区 保 持 100m 以 上 的 间 距 。 粪 污 处 理 应 有 单 独 通 道 ， 便 于 病 死 猪 消 毒 和污 物 处 理 。4.3 设 施 要 求4.3.1 设 施 一 般 要 求 4.3.1.1 无 菌 猪 生 产 区 应 合 理 组 织 气 流 和 布 置 送 、 排 风 口 的 位 置 ， 避 免 死 角 、 断 流 、 短 路 。 无 菌 猪 生 产场 区 建 筑 物 门 、 窗 应 有 良 好 的 密 封 性 。 净 化 生 产 区 和 净 化 实 验 区 的 洁 净 走 廊 净 宽 度 不 应 小 于 1.

12、5m ， 门净 宽 度 应 不 小 于 0.8m 。 DB50/T 10432020 5 4.3.1.2 屏 障 环 境 设 施 由 非 洁 净 区 进 入 洁 净 区 及 洁 净 区 的 各 类 管 线 管 口 ， 应 采 取 可 靠 的 密 封 措 施 。 排 水管 道 管 径 不 宜 小 于 DN150。 屏 障 环 境 设 施 应 设 环 境 监 控 系 统 ， 其 他 级 别 设 施 根 据 需 要 设 置 环 境 监 控 系 统 。各 类 环 境 控 制 设 备 应 定 期 保 养 维 修 。4.3.1.3 外 环 境 应 整 洁 ， 便 于 清 扫 和 消 毒 。 应 排 水 畅

13、 通 ， 无 废 物 堆 积 和 无 水 积 存 。4.3.1.4 应 设 置 人 、 动 物 、 物 品 专 用 出 入 口 ， 道 路 通 畅 ， 配 置 专 用 的 消 毒 设 施 与 设 备 。4.3.1.5 应 有 防 治 外 来 动 物 进 入 的 措 施 。4.3.2 设 施 建 筑 构 造 要 求4.3.2.1 屏 障 环 境 设 施 的 结 构 安 全 等 级 应 不 低 于 GB50068中 建 筑 结 构 安 全 等 级 二 级 的 要 求 。4.3.2.2 屏 障 环 境 设 施 应 能 承 载 吊 顶 内 设 备 管 线 的 荷 载 ， 以 及 高 压 灭 菌 器 、

14、 空 调 设 备 、 清 洗 池 等 设 备 的荷 载 。 4.3.2.3 屏 障 环 境 设 施 和 隔 离 器 放 置 的 净 化 区 内 不 宜 设 排 水 沟 或 者 地 漏 ； 若 已 存 在 排 污 管 口 ， 应 加 上 密封 盖 ， 防 止 异 味 或 其 他 污 物 窜 入 。 非 净 化 区 内 设 置 地 漏 的 房 间 ， 坡 度 不 应 小 于 1%， 地 面 应 做 防 水 处 理 。4.3.2.4 屏 障 环 境 设 施 的 清 洗 消 毒 间 与 洁 净 物 料 储 存 间 之 间 应 设 置 消 毒 灭 菌 设 施 设 备 。4.3.2.5 淋 浴 室 、 清

15、 洗 消 毒 区 的 地 面 和 墙 面 均 应 做 防 水 处 理 。4.3.3 主 要 分 区 设 置 要 求4.3.3.1 净 化 区 内 墙 表 面 应 光 滑 平 整 ， 阴 阳 角 均 为 圆 弧 形 ， 易 于 清 洗 、 消 毒 。 墙 面 应 采 用 不 易 脱 落 、 耐腐 蚀 、 无 反 光 、 耐 冲 击 的 材 料 。 地 面 应 防 滑 、 耐 磨 、 无 渗 漏 。 天 花 板 应 耐 水 、 耐 腐 蚀 。 上 、 下 水 系 统 应有 防 止 逆 流 以 及 防 止 外 来 动 物 进 入 的 措 施 。4.3.3.2 净 化 区 的 辅 助 区 应 实 行

16、环 境 控 制 ， 便 于 设 备 和 配 件 的 清 洗 处 理 ， 防 止 病 原 微 生 物 污 染 、 寄 生 虫污 染 和 外 来 动 物 进 入 ， 墙 壁 和 地 板 应 作 防 水 处 理 。 设 置 熏 蒸 房 ， 对 进 入 净 化 区 的 大 型 设 备 进 行 熏 蒸 消 毒 ， 其 墙 壁 和 地 板 应 作 防 水 、 防 腐 处 理 ， 设 排 风 口 。4.3.3.3 非 净 化 区 应 设 置 母 猪 准 备 室 和 配 套 设 备 ， 方 便 手 术 前 动 物 体 表 清 洁 和 消 毒 。4.3.4 给 排 水 要 求4.3.4.1 无 菌 猪 的 饮

17、用 水 定 额 应 满 足 无 菌 猪 饮 用 水 需 要 。4.3.4.2 净 化 区 的 用 水 应 达 到 无 菌 要 求 ， 按 GB/T14926.41规 定 的 饮 水 检 测 方 法 执 行 。 非 净 化 区 用 水 应符 合 GB 5749 的 要 求 。4.3.4.3 无 菌 猪 生 产 区 （ 实 验 区 ） 的 给 水 干 管 宜 布 设 在 专 用 夹 层 内 。 管 道 穿 越 净 化 区 的 壁 面 处 应 采 取 可靠 的 密 封 措 施 。4.3.4.4 屏 障 环 境 设 施 的 给 水 管 道 和 管 件 ， 应 选 用 环 保 、 耐 腐 蚀 、 连 接

18、 方 便 可 靠 、 不 生 锈 、 不 易 老 化 的管 材 和 管 件 。 管 道 外 表 面 可 能 凝 露 时 ， 应 采 取 有 效 的 防 凝 露 措 施 。 4.3.4.5 屏 障 环 境 设 施 生 产 区 （ 实 验 区 ） 内 无 排 水 管 或 者 地 漏 。4.3.4.6 屏 障 环 境 设 施 清 洗 消 毒 室 的 地 漏 应 采 用 密 闭 型 。 DB50/T 10432020 6 4.3.4.7 排 水 管 道 应 选 用 耐 腐 蚀 、 连 接 方 便 可 靠 、 不 生 锈 、 不 易 老 化 的 管 材 和 管 件 。4.3.4.8 屏 障 环 境 设

19、施 的 排 水 宜 与 其 他 生 活 排 水 分 开 设 置 。4.3.5 粪 污 、 废 弃 物 及 动 物 尸 体 处 理4.3.5.1 生 产 区 应 设 有 污 水 初 级 处 理 设 备 或 化 粪 池 ， 粪 污 、 废 液 经 处 理 后 应 达 到 GB8978二 类 一 级 标准 要 求 。4.3.5.2 一 次 性 工 作 服 、 口 罩 、 帽 子 、 手 套 及 实 验 废 弃 物 等 应 按 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部 令 （ 第 36号 ） 医 疗 卫 生 机 构 医 疗 废 物 管 理 办 法 进 行 无 害 化 处 理 。 注 射 针 头 、 刀

20、片 等 锐 利 物 品 应 收 集 到 利 器 盒 中统 一 处 理 。4.3.5.3 动 物 尸 体 及 组 织 应 装 入 专 用 尸 体 袋 中 ， 低 温 存 放 ， 并 按 照 病 死 动 物 无 害 化 处 理 技 术 规 范 （ 农医 发 201334号 ） 要 求 ， 集 中 做 无 害 化 处 理 。 4.3.5.4 无 菌 猪 饲 养 用 的 隔 离 器 设 计 有 污 物 存 储 层 ， 污 物 排 放 频 率 根 据 污 物 产 量 确 定 。 排 放 前 ， 隔 离 器的 排 污 管 出 口 应 浸 入 消 毒 液 ； 排 放 后 ， 应 先 关 闭 排 污 阀 门

21、， 再 将 管 口 撤 出 消 毒 液 。5 隔 离 器5.1 分 类无 菌 猪 隔 离 器 分 为 无 菌 子 宫 剥 离 器 、 无 菌 运 输 隔 离 器 和 无 菌 饲 养 隔 离 器 。5.1.1 无 菌 子 宫 剥 离 器适 用 于 无 菌 子 宫 剖 除 术 获 取 无 菌 仔 猪 。 无 菌 状 态 下 ， 结 扎 并 脱 离 母 体 的 子 宫 经 子 宫 剥 离 器 的 消 毒 渡槽 ， 进 入 子 宫 剥 离 器 内 操 作 平 台 ， 在 平 台 上 获 取 新 生 仔 猪 。5.1.2 无 菌 运 输 隔 离 器 与 无 菌 子 宫 剥 离 器 对 接 ， 用 于 无

22、 菌 新 生 仔 猪 的 转 移 ； 单 独 使 用 时 ， 用 于 无 菌 猪 转 运 。5.1.3 无 菌 饲 养 隔 离 器正 压 时 ， 适 用 于 无 菌 猪 和 悉 生 猪 的 饲 养 ， 阻 断 外 源 微 生 物 侵 入 到 隔 离 器 内 部 区 域 ； 负 压 时 ， 适 用 于猪 感 染 性 动 物 实 验 ， 阻 断 感 染 源 扩 散 到 隔 离 器 外 部 区 域 。 无 菌 猪 始 终 生 活 于 无 菌 饲 养 隔 离 器 内 。5.2 结 构5.2.1 无 菌 猪 子 宫 剥 离 器应 由 架 体 、 密 封 罩 、 隔 离 腔 体 、 消 毒 液 槽 、 操

23、 作 手 套 、 无 菌 操 作 台 、 传 递 通 道 、 进 出 风 过 滤 系 统 等组 成 。5.2.2 无 菌 猪 运 输 隔 离 器 应 由 架 体 、 密 封 罩 、 隔 离 腔 体 、 传 递 通 道 、 操 作 手 套 、 进 出 风 过 滤 系 统 等 组 成 。5.2.3 无 菌 猪 饲 养 隔 离 器应 由 架 体 、 密 封 罩 、 隔 离 腔 体 、 传 递 通 道 、 操 作 手 套 、 进 出 风 过 滤 系 统 、 饲 喂 系 统 等 组 成 。 DB50/T 10432020 7 5.3 规 格5.3.1 无 菌 子 宫 剥 离 器应 根 据 实 验 猪 饲

24、 育 品 种 的 要 求 确 定 子 宫 剥 离 器 的 消 毒 液 槽 和 无 菌 操 作 台 的 尺 寸 。5.3.2 无 菌 运 输 隔 离 器应 根 据 无 菌 猪 大 小 、 运 输 数 量 的 要 求 确 定 无 菌 运 输 器 的 尺 寸 。5.3.3 无 菌 饲 养 隔 离 器应 根 据 实 验 猪 饲 育 品 种 、 动 物 实 验 的 要 求 确 定 隔 离 器 的 尺 寸 。 1月 龄 内 的 无 菌 仔 猪 ， 饲 养 隔 离 器 的最 小 空 间 宜 满 足 表 1 的 要 求 。 表 1 1 月 龄 无 菌 猪 饲 养 隔 离 器 最 小 空 间 项 目 体 重 （

25、 kg） 5 5且 10 10kg底 板 面 积 m2/头 0.17 0.35 0.35 0.52 0.52 0.70笼 内 高 度 m 0.4 0.4 0.55.4 要 求5.4.1 隔 离 腔 体可 选 用 软 质 或 硬 质 材 料 。 软 质 隔 离 腔 体 主 体 空 间 大 小 可 随 通 风 而 变 化 ， 宜 用 于 无 菌 饲 养 隔 离 器 。 硬质 隔 离 腔 体 主 体 空 间 大 小 应 不 随 通 风 而 变 化 ， 宜 用 于 无 菌 运 输 隔 离 器 、 无 菌 子 宫 剥 离 器 。5.4.2 架 体采 用 不 锈 钢 材 料 制 作 ， 表 面 应 光 洁

26、 、 耐 腐 蚀 。 架 体 应 稳 定 、 牢 固 、 平 整 ， 装 拆 和 移 动 方 便 。 风 机 与 架 体 采 用 管 道 连 接 ， 运 行 时 无 明 显 振 动 。5.4.3 密 封 罩宜 采 用 耐 腐 蚀 、 耐 高 温 、 耐 压 、 易 清 洗 、 透 明 、 柔 韧 、 无 毒 塑 料 密 封 罩 ， 具 有 带 塞 消 毒 孔 。 宜 用 于无 菌 猪 隔 离 器 内 物 品 传 递 系 统 的 密 封 。 观 察 窗 宜 置 于 隔 离 器 顶 部 ， 使 用 耐 腐 蚀 、 耐 高 温 、 易 清 洗 、 透 明等 硬 质 材 料 密 封 连 接 。5.4.

27、4 传 递 通 道用 于 物 品 和 动 物 的 密 封 传 递 。 应 密 封 。5.4.5 操 作 手 套连 接 于 隔 离 器 密 封 罩 的 操 作 用 胶 质 手 套 ， 应 密 封 、 大 小 适 用 。 5.4.6 进 出 风 过 滤 系 统进 风 处 应 有 初 效 、 中 效 、 高 效 过 滤 ， 出 风 处 应 有 高 效 过 滤 。5.4.7 消 毒 液 槽 DB50/T 10432020 8 宜 采 用 耐 腐 蚀 的 不 锈 钢 等 硬 质 材 料 密 封 连 接 组 成 ， 具 有 开 口 ， 应 可 以 液 封 ， 具 有 放 水 口 ， 可 排 放 废液 。5

28、.4.8 无 菌 操 作 台采 用 耐 腐 蚀 的 不 锈 钢 等 硬 质 材 料 密 封 连 接 组 成 ， 底 部 具 有 水 平 推 拉 盖 ， 应 可 密 封 。5.5 性 能空 气 进 风 口 应 经 初 效 、 中 效 、 高 效 三 级 过 滤 ， 出 风 口 经 高 效 过 滤 ， 使 隔 离 器 内 在 静 态 时 的 送 风 口 洁净 度 达 到 GB 14925-2010要 求 的 7级 或 更 高 洁 净 度 要 求 ， 沉 降 菌 不 应 检 出 ， 气 流 速 度 应 为 0.1-0.3m/s，内 外 梯 度 压 差 应 为 20-55Pa， 换 气 次 数 应 为

29、 20-50 次 /h， 噪 音 应 55db。5.6 用 途在 隔 离 环 境 下 ， 无 菌 猪 隔 离 器 的 用 途 见 表 2。 表 2 无 菌 猪 隔 离 器 用 途项 目 环 境 分类 使 用 功 能 适 用 实 验 动物无 菌 子 宫 剥离 器 正 压 无 菌 猪 子 宫 外 表 面 消 毒 和 新 生 无 菌 仔 猪 的 获 取 无 菌 猪无 菌 运 输 隔离 器 正 压 新 生 无 菌 仔 猪 运 输 、 体 表 清 洁 和 运 输 无 菌 猪无 菌 饲 养 隔离 器 正 压 /负 压 正 压 用 于 无 菌 猪 的 饲 养 和 动 物 实 验 和 悉 生 猪 的 实 验

30、/负 压 用于 猪 感 染 性 动 物 实 验 无 菌 猪 、 悉生 猪6 日 粮 6.1 分 类根 据 无 菌 猪 的 日 龄 ， 日 粮 主 要 分 为 代 乳 粉 、 粉 料 、 颗 粒 料 。6.1.1 代 乳 粉宜 选 用 商 业 化 新 生 乳 猪 奶 粉 或 新 生 婴 儿 奶 粉 。 采 用 辐 照 、 高 压 高 温 处 理 等 方 法 灭 菌 。 宜 采 用 Co60辐 照 灭 菌 。6.1.2 粉 料选 用 乳 猪 全 价 粉 料 。 采 用 辐 照 、 高 压 高 温 处 理 等 方 法 灭 菌 。 宜 采 用 Co 60辐 照 灭 菌 。6.1.3 颗 粒 料选 用

31、成 年 猪 用 全 价 颗 粒 料 。 采 用 辐 照 、 高 压 高 温 处 理 等 方 法 灭 菌 。 一 般 采 用 钴 60 辐 照 灭 菌 。6.2 卫 生 要 求细 菌 、 真 菌 不 得 检 出 ， 黄 曲 霉 毒 素 、 砷 、 铅 以 及 亚 硝 酸 盐 4 项 指 标 应 符 合 GB/T 4789.18 要 求 。 不宜 添 加 任 何 药 物 。 DB50/T 10432020 9 6.3 包 装装 于 防 潮 的 纸 箱 、 纸 桶 （ 袋 ） 或 聚 丙 烯 塑 料 桶 （ 袋 ） 中 ， 内 衬 包 装 食 品 用 高 阻 隔 材 质 的 真 空 包 装 袋 。6

32、.4 贮 存应 贮 存 在 清 洁 、 干 燥 、 阴 凉 、 通 风 的 专 用 仓 库 中 。 要 防 虫 蛀 、 鼠 害 、 防 挤 压 、 霉 变 和 污 染 。6.5 保 质 期不 少 于 3 个 月 ， 不 宜 超 过 6 个 月 。7 无 菌 猪 的 制 备7.1 品 种 选 择 根 据 使 用 用 途 选 择 合 适 的 品 种 。 以 畜 牧 研 究 为 主 或 短 期 实 验 时 ， 宜 选 择 体 型 较 大 品 种 ； 以 医 学 生 物学 研 究 为 主 或 长 期 实 验 时 ， 宜 选 择 小 型 品 种 。7.2 妊 娠 母 猪 的 筛 选妊 娠 猪 应 未 注

33、 射 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 弱 毒 疫 苗 ， 外 观 健 康 、 无 异 常 ； 不 宜 选 择 初 产 和 第 六 胎 次 以 上的 母 猪 。 应 排 除 经 胎 盘 垂 直 传 播 的 四 种 病 毒 ， 包 括 猪 瘟 、 猪 繁 殖 与 呼 吸 综 合 征 、 猪 伪 狂 犬 病 、 猪 细 小 病毒 病 。 病 原 筛 查 方 法 参 照 GB/T16551、 GB/T18641、 NY/T679 和 SN/T 1919-2016 执 行 。7.3 饲 养 环 境 与 条 件 的 准 备7.3.1 隔 离 器 的 准 备无 菌 子 宫 剥 离 器 、 无 菌 运 输

34、 隔 离 器 和 无 菌 饲 养 隔 离 器 宜 在 手 术 前 7-10天 开 始 准 备 。 隔 离 器 内 部 ，宜 选 用 1.5%-2.0%新 制 的 过 氧 乙 酸 喷 雾 10 分 钟 ， 1-2小 时 后 开 启 隔 离 器 上 送 风 装 置 ， 过 夜 排 出 残 留 消 毒 液 。 经 微 生 物 检 测 合 格 ， 持 续 空 转 备 用 。 手 术 前 1 天 ， 将 无 菌 子 宫 剥 离 器 和 无 菌 运 输 隔 离 器 用 传 递 系 统连 接 ， 1.5%-2.0%新 制 的 过 氧 乙 酸 喷 雾 消 毒 传 递 通 道 内 部 空 间 ， 静 置 1小

35、时 后 送 风 过 夜 ， 排 出 隔 离 器 内部 残 余 消 毒 液 ， 备 用 。7.3.2 屏 障 环 境 的 维 持上 述 三 类 隔 离 器 应 始 终 在 屏 障 设 施 下 使 用 。 无 菌 猪 净 化 区 内 各 功 能 区 ， 宜 采 用 1.5%-2.0%新 制 的 过氧 乙 酸 每 天 喷 雾 消 毒 1 次 。 根 据 实 验 人 员 进 出 次 数 增 加 ， 适 当 增 加 喷 雾 消 毒 次 数 。7.4 剖 腹 产 手 术7.4.1 时 间宜 在 预 定 分 娩 日 的 前 两 天 内 进 行 。 妊 娠 末 期 应 积 极 观 察 母 猪 行 为 ， 减

36、少 因 提 前 分 娩 而 终 止 手 术 的 事件 发 生 。 7.4.2 妊 娠 母 猪 术 前 准 备动 物 准 备 间 内 ， 母 猪 限 位 于 移 动 栏 中 ， 以 温 水 冲 洗 母 猪 体 表 ， 擦 干 ； 移 动 至 手 术 准 备 间 ， 用 海 绵 刷子 蘸 取 碘 伏 ， 将 母 猪 体 表 全 部 擦 拭 ； 再 将 妊 娠 猪 移 至 手 术 间 ， 进 行 麻 醉 、 并 绑 定 于 手 术 床 上 。 宜 采 用 异 DB50/T 10432020 10 氟 烷 呼 吸 麻 醉 法 ， 配 合 肌 肉 松 弛 剂 使 用 。7.4.3 剖 腹 产 手 术麻

37、醉 后 ， 对 整 个 腹 部 再 次 进 行 碘 伏 消 毒 。 剃 毛 ， 垫 灭 菌 手 术 创 巾 ， 切 开 腹 腔 ， 拉 出 子 宫 ， 结 扎 子 宫颈 部 、 切 断 两 端 ， 将 子 宫 浸 入 无 菌 子 宫 剥 离 器 的 消 毒 液 槽 内 10-20s， 之 后 移 入 无 菌 子 宫 剥 离 器 的 无 菌操 作 台 ， 取 出 胎 儿 、 擦 干 羊 水 、 剪 断 脐 带 。7.5 无 菌 仔 猪 的 获 取 与 转 运7.5.1 无 菌 仔 猪 的 获 取将 取 出 的 无 菌 新 生 仔 猪 通 过 灭 菌 后 的 传 递 通 道 ， 快 速 移 入 无

38、 菌 运 输 隔 离 器 ， 封 闭 密 封 罩 ， 尽 量 降 低消 毒 液 对 新 生 仔 猪 的 刺 激 。 利 用 加 热 设 备 对 隔 离 器 外 底 部 进 行 加 热 ， 保 持 隔 离 器 内 温 度 在 34-36 ， 防止 仔 猪 受 冻 。 根 据 新 生 仔 猪 情 况 ， 进 行 人 工 辅 助 呼 吸 。 从 切 开 腹 腔 到 人 工 辅 助 呼 吸 结 束 ， 时 间 控 制 在 30min内 。7.5.2 无 菌 仔 猪 的 转 运上 述 操 作 完 成 后 ， 保 持 密 封 状 态 ， 将 无 菌 运 输 隔 离 器 与 无 菌 子 宫 剥 离 器 断

39、开 连 接 ， 将 无 菌 运 输 隔 离器 传 递 通 道 外 部 密 封 罩 罩 上 ， 并 采 用 1.5%-2%新 制 的 过 氧 乙 酸 喷 雾 消 毒 隔 离 器 外 表 面 。 根 据 使 用 目 的 ，将 无 菌 运 输 隔 离 器 推 入 无 菌 猪 生 产 区 或 者 实 验 区 ， 并 通 过 灭 菌 的 连 接 通 道 和 无 菌 饲 养 隔 离 器 对 接 ， 应 对连 接 通 道 内 部 空 间 消 毒 。 静 置 10min后 ， 开 启 连 接 通 道 ， 将 新 生 无 菌 仔 猪 从 无 菌 运 输 隔 离 器 转 入 无 菌 饲养 隔 离 器 内 。 保

40、持 隔 离 器 内 温 度 在 34-36 。 根 据 新 生 仔 猪 情 况 ， 进 行 人 工 辅 助 呼 吸 。 转 运 操 作 时 间 控制 在 30min 内 。8 无 菌 猪 的 饲 养 管 理8.1 饲 养 流 程 新 生 仔 猪 取 出 后 2h内 第 一 次 人 工 哺 乳 。 将 灭 菌 的 代 乳 粉 和 灭 菌 水 按 比 例 混 合 后 （ 根 据 商 业 化 奶 粉使 用 说 明 确 定 比 例 ） ， 倒 入 隔 离 器 内 各 食 槽 内 。 每 日 早 、 中 、 晚 各 哺 乳 1 次 。 3 日 龄 前 ， 每 次 宜 给 料 量100-200mL； 4

41、日 龄 后 宜 逐 渐 增 加 给 料 量 ， 每 次 200-300mL。 不 喂 水 。 21 日 龄 后 ， 饮 水 不 间 断 ， 宜 补 饲无 菌 猪 用 粉 料 。 42日 龄 后 ， 宜 更 换 为 无 菌 猪 用 颗 粒 料 。8.2 温 度 管 理7日 龄 内 ， 无 菌 饲 养 隔 离 器 内 温 度 保 持 32-35 ； 8-14日 龄 内 ， 无 菌 饲 养 隔 离 器 内 温 度 不 低 于 30 ；21日 龄 后 隔 离 器 内 温 度 不 低 于 26 。8.3 光 照 管 理仔 猪 进 入 隔 离 器 后 ， 按 照 光 照 12h， 黑 暗 12h执 行 。

42、8.4 物 品 进 出 消 毒 8.4.1 屏 障 环 境 物 品 进 出 消 毒 操 作8.4.1.1 物 品 转 入 屏 障 环 境进 入 屏 障 环 境 的 物 品 应 经 过 严 格 的 消 毒 灭 菌 处 理 。 灭 菌 之 前 ， 耐 高 温 高 压 物 品 ， 如 手 术 器 械 、 器 具 、 DB50/T 10432020 11 纱 布 ， 宜 打 包 放 入 灭 菌 盒 或 灭 菌 袋 ， 应 首 选 压 力 蒸 汽 灭 菌 ； 不 耐 热 、 不 耐 湿 的 物 品 ， 如 采 样 拭 子 、 采 血针 宜 选 用 包 装 完 整 的 商 业 化 产 品 ， 并 经 过

43、环 氧 乙 烷 等 低 温 灭 菌 处 理 ； 无 菌 猪 饲 养 中 使 用 的 其 他 物 品 ， 如称 重 器 、 皮 尺 、 记 号 笔 、 塑 料 制 品 等 ， 宜 纯 水 清 洁 物 品 外 表 面 、 晾 干 后 ， 用 消 毒 液 （ 如 新 制 的 1.5%-2%过 氧 乙 酸 ） 喷 雾 表 面 至 湿 润 、 静 置 1h 以 上 。 之 后 ， 所 有 待 进 入 屏 障 环 境 的 灭 菌 物 品 应 放 置 于 传 递 窗 ，经 紫 外 消 毒 30min 后 ， 转 入 屏 障 环 境 。8.4.1.2 物 品 转 出 屏 障 环 境屏 障 环 境 内 ， 可

44、循 环 使 用 的 物 品 （ 如 手 术 器 械 、 器 具 、 创 巾 等 ） ， 应 从 污 物 走 廊 转 出 至 清 洗 消 毒 室 ，清 洗 、 烘 干 、 保 存 。 不 可 循 环 使 用 的 物 品 （ 如 采 样 拭 子 、 采 血 管 、 采 血 针 、 刀 片 、 纱 布 等 ） ， 应 从 污 物走 廊 转 出 至 废 弃 物 品 存 放 处 理 间 ， 分 类 处 理 。8.4.2 隔 离 环 境 物 品 进 出 消 毒 操 作8.4.2.1 物 品 进 入 隔 离 环 境 与 无 菌 猪 饲 养 无 关 的 物 品 不 转 入 隔 离 环 境 。 物 品 进 入

45、隔 离 环 境 前 ， 应 保 持 隔 离 器 传 递 通 道 内 侧 密 封罩 为 密 封 状 态 。 打 开 隔 离 器 传 递 通 道 外 侧 密 封 罩 ， 将 物 品 （ 如 袋 装 灭 菌 奶 粉 、 袋 装 灭 菌 饲 料 、 称 重 器 、皮 尺 等 ） 放 入 传 递 通 道 内 ， 关 闭 传 递 通 道 外 侧 密 封 罩 ， 打 开 外 侧 密 封 罩 上 消 毒 孔 ， 用 消 毒 液 （ 如 新 制 的1.5%-2%过 氧 乙 酸 ） 喷 雾 处 理 至 物 品 外 表 面 湿 润 ， 关 闭 消 毒 孔 ， 静 置 1h及 以 上 ； 打 开 隔 离 器 传 递 通 道 内侧 密 封 罩 ， 将 物 品 转 入 隔 离 器 内 部 操 作 台 上 ， 再 次 关 闭 内 部 密 封 罩 。 完 成 物 品 转 入 操 作 。8.4.2.2 物 品 转 出 隔 离 环 境物 品 转 出 隔 离 环 境 前 ， 应 保 持 隔 离 器 传 递 通 道 外 侧 密 封 罩 关 闭 状 态 。 打 开 隔 离 器 传 递 通 道 内 侧 密 封罩 ， 将 物 品 转 入 传 递 通 道 内 部 ； 关 闭 传 递 通 道 内 侧 密 封 罩 后 ， 再 开 启 传 递 通 道 外 侧 密 封 罩 ， 将 物 品 转 出 ，