兽医微生物学知识重点.pdf
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1、兽医微生物学 知识 重 点 第一章 细 菌 的形 态 与 结 构 1 、微 生物: 是存在 于自然界 的一大 群体型 微小、 结构 简单、 肉眼直 接看不 见, 必须借 助光学 显微镜或电 子显微 镜放 大数 百倍 、数 千倍, 甚至 数万 倍才 能观 察到的 微小 生物 。 2、微 生物 的种 类: 三型 八 大类( 三菌 四体 一病 毒) 真核 细胞 型微 生物 :细 胞核有 核膜 和核 仁, 细胞 器完整 ,如 真菌 。 原核 细胞 型微 生物 :仅 有原始 核, 无核 膜、 核仁 。细胞 器很 不完 善。DNA 和 RNA 同时 存在 。有 细菌 、 放 线菌、 支原 体、 衣原 体、
2、 立克次 体、 螺旋 体。 非细 胞型 微生 物 : 是 最 小的一 类微 生物 。 无典型 的细胞 结构 , 只能 在活细 胞内生 长繁 殖 。 核 酸类型 为 DNA 或 RNA 。病 毒属 之。 3、微 生物 的特 点 体积 小、 面积 大 ; 代谢 能力 强, 代谢 类型 多 ; 生长 繁殖 快, 容易 培养 ; 易变 异, 适应 强 ; 种类 多, 分布 广。 4、细 菌的 基本 形态 细菌按 其外 形, 主要 有: 球菌、 杆菌 、螺 旋状 菌。 球菌 菌体呈 球形 或近 似球 形 , 根据细 胞分 裂的 方向 及分 裂后的 各子 细胞 的空 间排 列状态 不同 , 可将 球菌 分
3、 为以 下几种 :单 球菌 、双 球菌 、链球 菌、 四联 球菌 、八 叠球菌 、葡 萄球 菌等 。 杆菌 杆菌是 细菌 中种 类最 多的 类型, 因菌 种不 同, 菌体 细胞的 长短 、粗 细等 都有 所差异 。 杆菌的 形态 : 短 杆状 、 长 杆状、 棒杆 状、 梭状 杆状 、 月亮 状、 竹节 状等 ; 按 杆菌细 胞繁 殖后 的排 列方 式 则 有链状 、栅 状、 “八 ”字 状 等。 螺旋 菌: 弧菌 、螺 菌。 5、科 赫法 则 特殊 病原 菌在 同一 疾病 中查见 ,健 康 者 中不 存在 ; 该病 原菌 能被 分离 培养 得纯种 ; 该纯 培养 物接 种至 易感 动物, 能
4、导致 同 样病 症; 自实验 感 染的 动物 体内 能重新 获得 该病 原菌 的纯 培养。 6 、 细 菌的衰 老型或 退化型 : 指在不 良环境 或老龄 期时 ,细菌 会出现 与正常 形状 不一样 的个体 。若将其重 新置于 正常 培养 环境 时可 恢复正 常 状 态。 7 、 细 菌的多 形性: 指处于衰 老型或 退化型 状态的 细菌 即使置 于适宜 的环境 中生 长,其 形状也 与正常的不 一致, 如嗜 血杆 菌 。 8、 菌落: 单个 细菌 在适 当 的固体 培养 基表 面或 内部 , 经过 一段 时间 培养 后, 生长繁 殖出 数量 巨大 的菌 体, 形成肉 眼可 见、 有一 定形
5、态的群 体。 可用 于细 菌的 分离、 纯化 、计 数和 鉴定 。 9、菌 苔: 各 “ 菌落 ”相 互 连接形 成一 片。 10 、细菌 活的非 可培养 状态 (VBNC ) : 指细菌 处于不良 环境条 件下,细胞 缩成球形,用 常规方 法培养 不能生 长繁殖,但 仍是 活的 一种 特 殊存在 形式 , 在 一定 条件 下可复苏, 并仍 具毒性 。 11、细 菌的 结构 基本 结构 :细 胞壁 、细 胞膜、 细胞 质、 核体 。 特殊 结构 :荚 膜、S 层 、鞭毛 、菌 毛、 芽胞 。 12、磷 壁酸 的功 能 形成 表面 抗原 决定 簇的 成分; 提高 膜结 合酶 的能 力( 使细胞
6、壁形 成负 电荷 环境 ,以利 于吸 附镁 离子 ,维 持酶活 ) ; 保证 革兰 氏阳 性致 病菌 (如 A 族链 球菌 )与 其寄 主间的 黏连 ; 构成 噬菌 体的 吸附 位点 。 13、细 胞壁 格兰 阳性 菌 肽聚 糖 磷壁 酸 革兰 阴性 菌 脂多 糖 (LPS ) 组成 : 类 脂A: 无种 属特 异性 ,内毒 素的 主要 毒性 成分 ; 侧链 多糖 : 即 菌体 抗原 , 有种 、型 特异 性; 核心 多糖 :有 属特 异性 。 功能 : 能够 吸 附Ca 2+ 、Mg 2+ 等阳 离子; 为噬 菌体 提供 特异 性 吸 附受体 。 外膜 蛋白 (OMP ) : 包括 微孔蛋
7、白、 脂蛋 白。 周质 间隙 14、细 胞壁 的功 能 维持 菌体 外形 和提 高机 械强度 ,保 护细 菌耐 受低 渗环境 ; 阻挡 有害 物质 进入 菌体 ; 维持 菌体 内外 离子 平衡 ; 参与 细菌 的正 常分 裂; 表面 带有 多种 抗原 分子 ,可诱 发机 体的 免疫 应答 。 15、细 菌细 胞膜 不含 胆固 醇。 16 、拟核 :细菌 不具 有成形 的核, 无核膜 、核仁 ,遗 传物质 称为拟 核(核 质) 。 核质由 单一密 闭环状 DNA 分子反 复回 旋卷 曲盘 绕组 成松散 网状 结构 。 17、荚 膜 概念 : 某些 细菌 在其 细 胞壁 外 周产 生的 一层 包围
8、 整个菌 体 、 边 界清 楚的 黏 液样物 质 , 理 化方 法去 除 后并 不影响 细胞 的生 命活 动。 功能 抗吞 噬作 用: 荚膜 具有 抵抗宿 主吞 噬细 胞的 作用 ,因而 荚膜 是病 原菌 的重 要毒力 因子 。 抗有 害物 质的 损伤 作用 :荚膜 处于 细胞 的最 外层 ,可保 护菌 体避 免和 减少 受有害 物质 的损 伤。 营养 物质 的贮 存场 所与 废物排 出。 18、S 层的 功能 分子 筛和 离子 通道 ; 屏障 作用 ,保 护细 菌; 黏附 宿主 细胞 ; 重要 的表 面抗 原。 19、鞭 毛的 功能 是运 动器 官; 有抗 原性 ; 与致 病性 有关 。 2
9、0、菌 毛 与细 菌的 运动 无关 ; 菌毛 蛋白 具有 抗原 性; 必须 用电 镜观 察; 分普 通菌 毛、 性菌 毛。 21、细 菌细 胞壁 缺陷 型 ( 细菌 L 型) : 细 胞壁 受损 后 仍能 生长 和分 裂的 细菌 。在一 般环 境中 不耐 受菌 体 内 的高渗 透压 会涨 破死 亡 , 在高渗 环境 中 仍 可存 活。 革兰阳 性菌 细胞 壁缺 失后 ,原生 质仅 被一 层细 胞膜 包住 原 生质 体。 革兰阴 性菌 肽聚 糖层 受损 后尚有 外膜 保护 原生 质球。 将两个 不同 的原 生质 体或 原生质 球融 合并 再生 成一 个细菌 的技 术, 称原 生质 体融合 技术
10、。 22、研究 L-细 菌的 意义 诊断 困难 ,由 于L-细 菌 在通常 培养 条件 下不 易成 功,所 以常 误诊 为非 病原 体感染 ; 对干 扰细 胞壁 合成 的药 物敏感 性下 降, 如青 霉素 ,多黏 菌素 等 ; 由于 细胞 壁的 少或 无, 使 抗原 性下 降,L-细 菌的 感染可 逃避 正常 菌抗 体的 攻击而 长期 存在 ; 与慢 性病 和一 些复 发性 疾病有 关; 用药 导致 L 型 对 药不敏 感 进 一步 感染 等 利 用L- 细菌 是进 行细 菌 的基础 研究 。 23、革 兰氏 染色 原理 G + 菌: 肽聚 糖含 量高 , 交 联 度大, 当乙 醇脱 色时 ,
11、 肽 聚糖因 脱水 而孔 径缩 小, 故结晶 紫- 碘复 合物 被阻 留 在 细胞内 ,细 胞仍 呈紫 色。 G - 菌:肽聚糖层薄, 交联 松散,乙醇脱色不 能使其 结构 收缩,因其含 脂量高 ,乙醇将脂溶解, 缝隙加 大, 酒精将 细胞 脱色 ,呈 无色 ,沙黄 (石 炭酸 复红 )复 染 呈红 色。 方法 细菌标 本固 定 、 结晶 紫初 染 、碘 液媒 染 、 生成 结晶 紫-碘 复合 物 、95% 酒 精脱 色 、稀 释的 复红 复染 。 用途 :细 菌形 态鉴 定、 菌种鉴 定 意义 : 鉴别 细菌 , 选 择 抗菌药 物 , 研 究细 菌对 抗 生素的 敏感 性 、 对 结晶 紫
12、 的敏感 性 , 细 菌的 等电 点 , 指 导临床 用药 。 24、革 兰氏 阳性 细菌 和革 兰氏阴 性细 菌细 胞壁 成分 比较 25、 芽 胞 : 某些 革 兰阳 性 菌在一 定环 境条 件下 , 在 菌体内 部形 成 的 一个 圆形 或卵圆 形 的 休眠 体 。 芽胞 形成 后细菌 即失 去繁 殖能 力。 芽胞 的结 构, 由外 向内 :外衣 外 膜 皮质 芽 孢壁 内膜 芯 髓。 革兰氏 阳性 菌 革兰氏 阴性 菌 细胞壁 厚度 层次 是否含 磷壁 酸 脂多糖 对青霉 素敏 感性 对溶菌 酶敏 感性 厚(15 80nm) 主要 为 1 层 肽聚 糖层 有 无 高 高 薄(10 15
13、nm) 2 层, 肽聚 糖层 和外 膜层 无 有 低或不 敏感 较低 性质 : 一 个细 菌只 形成 一个芽 胞, 一个 芽胞 发芽 也只生 成一 个菌 体, 细菌 数量并 未增 加, 因而 芽胞 不是 细菌的 繁殖 方式 。与 芽胞 相比, 未形 成芽 胞而 具有 繁殖能 力的 菌体 称为 繁殖 体(营 养体 ) 。 特点 对高 温、 干燥 、辐 射、 化学药 物有 强大 抵抗 力。 含水 量低 、壁 厚而 致密 、 通透 性差 、不 易着 色 、 折光性 强。 芽胞 内新 陈代 谢几 乎停 止,处 于休 眠状 态, 但保 持潜在 萌发 力。 不是 繁殖 器官 ,一 个芽 胞萌发 只产 生一
14、 个营 养状 态的细 胞。 意义 对外 界不 良环 境有 强大 的抵抗 力, 是细 菌保存 生 命的一 种休 眠结构 ; 消毒 的指 标是 以杀 灭芽 胞为准 (121 /30min, 朊 病毒除 外) ; 反恐 怖战 争需 要。 第二章 细 菌 的生 理 1、细 菌与 真核 生物 新陈 代 谢的主 要区 别 生长 和繁 殖速 度快 利用 各种 化合 物作 为能 源 能力 强 营养 需求 多种 多样 可利 用超 常流 水线 合成 大分子 物质 能产 生特 殊物 质 2、细 菌物 质摄 取方 式 单纯 扩散( 被 动扩 散) 促进 扩散 主动 运输 基团 转位 需要载 体蛋 白和 能量 ,有 两
15、个突 出特 点: 转运 过程 中物 质发 生了 化学变 化; 主要 存在 于厌 氧菌 和兼 性厌氧 菌中 。 3、时 代时 间: 一个 菌体 分 裂为两 个菌 体所 需的 时间 。 4 、 生 长曲线 :将细 菌接种在 液 体培 养基并 置于适 宜温 度中, 定时取 样检查 活菌 数,可 发现细 菌 生长过程 具有规 律性 。以 时间 为横 坐标, 以活 菌数 的对 数为 纵坐标 ,可 得 一 条生 长曲 线。 5、细 菌生 长繁 殖 的 四个 时 期 迟缓 期: 是细 菌来 到新 环境的 一个 适应 过程 。 特点: 代谢 活跃 ,合 成并 积累 所需酶 系统 ; RNA 含量 明显 增多
16、,但DNA 含 量无 变化 ; 细菌 数不 增加 。 对数 期 : 细 菌生 长迅 速 , 以 恒定 速度 进行 分裂 繁 殖, 活菌 数以 几何 级数 增 长, 达到 顶峰 , 生长 曲线 接近 一条斜 的直 线。 此时 病原 菌致病 力最 强, 形态 、染 色特性 及生 理活 性较 典型 ,对抗 菌药 物的 作用 较敏 感。 OD=0.4 0.6 认 为处 于对 数期。 稳定 期 : 因 营养 的消 耗 、 代 谢产 物的 蓄积 , 细菌 繁殖速 度下 降 , 死 亡数 逐 步上升 , 新繁 殖的 活菌 数 与死 菌数大 致平 衡 。 细 菌的 形 态及生 理性 状常 有改 变 , 格兰阳
17、 性菌 此时 可染 成阴 性 , 毒素 、 抗生 素、 芽孢 多此时 产 生。 衰亡 期: 死菌 数超 过活 菌数, 细菌 的菌 体变 形或 自溶, 染色 不典 型, 难以 进行鉴 定。 6、培 养基 概念 : 是 人工 配制 的基 质,含 有细 菌生 长繁 殖必 需的营 养物 质。 培养 基制 成后, 要经 灭菌 处理 。 营养 条件 基本 营养 氧气 :根 据细 菌对 氧的 需求, 可分 为需 杨菌 、厌 氧菌及 兼性 厌氧 菌 厌氧 培养 基: 是为 培养 厌氧菌 而设 计 的 温度 :根 据细 菌对 温度 的适应 范围 ,可 将细 菌分 为嗜冷 菌、 嗜温 菌、 嗜热 菌 酸碱 度:
18、多数 病原 菌的 最适 ph 为7.2 7.6 ,鼻 疽伯氏 菌偏 酸, 霍乱 弧菌 偏碱 7、培 养基 的分 类 按营 养成 分 基础 培养 基: 基本 营养 成分 营养 培养 基: 在基 础培 养基中 添加 一些 其他 营养 物质, 如葡 萄糖 、血 液、 血清、 生长 因子 等 按状 态 固体 培养 基 :1.5% 2% 琼脂, 用于 细菌 分离 纯化 半固 体培 养基 :0.5% 琼 脂,作 穿刺 试验 液体 培养 :扩 增纯 培养 的菌体 按功 能 鉴别 培养 基 : 在培 养基 中加入 特定 底物 ,观 察细 菌生长 后的 分解 底物 ,从 而鉴别 细菌 。 选 择培 养基 : 在
19、培 养基 中加入 某种 化学 物质 , 使 抑制一 类细 菌 生 长 , 而 有 利于另 一类 细菌 生长 , 从 而将 后者选 择出 来。 麦康凯 培养 基内 含胆 盐, 能抑制 革兰 阳性 菌的 生长 ,大肠 杆菌 及沙 门菌 可生 长。 厌 氧培 养基 : 用于 厌氧 菌的分 离 、 培 养和 鉴别 。 将普通 培养 基放 在 无 氧环 境中培 养 , 或 者使 培养 基 本身成为无 氧环 境。 庖肉培 养基 是常 用的 厌氧 培养基 之一 ,其 中不 含饱 和脂肪 酸和 谷胱 甘肽 的肉 渣起到 了还 原剂 的作 用。 8 、分 离培养 :将标 本或培养 物划线 接种在 固体培 养基
20、表面, 因划线 的分散 作用 ,许多 原混杂 的细菌在固 体培养 基表 面 散 开。 9、液 体培 养基 中的 生长 现 象 浑浊 :大 多数 细菌 沉淀 :链 状生 长的 细菌 菌膜 :专 性需 氧菌 ,如 结核杆 菌、 枯草 杆菌 10、 生化 反应 : 细菌 对糖 、 蛋 白质 的分 解能 力不 同 , 代 谢产 物各 异 , 利 用生 物化学 方法 鉴别 不同 细菌 称为 细菌的 生化 反应 。 主 要有 氧化酶 试验 、VP 试 验、 甲 基红试 验、 吲哚 试验 等。 11、 生 物被 膜: 通 常生 活 在自然 界中 的细 菌并 非以 游离的 单个 菌体 形式 存在 , 而是 以
21、群 落形 式出 现, 这 种 群落的 主要 表现 形式 称 生 物被膜 。 是一 种被 自身 产 生的多 聚基 质包 裹着 菌细 胞的结 构群 体 , 是 细菌 具 有保护 性 的一种 生长 模式 ,其 结构 中具有 水和 营养 物质 的通 道。 12、生 物膜 的特 性 生长 速度 缓慢 且不 均一 。 细菌生 物膜 是在 不利 环境 下形成 的, 环境 变化 对 其 影响较 小。 在膜 表面 的细 菌, 由 于营 养等 因素, 分 裂较 快,体 积 较 大, 内层 相反 。 细菌 毒力 下降 毒力强 的细 菌形 成被 膜菌 后,一 般不 会使 动物 致死 。 耐药 性提 高 逃逸 宿主 的
22、免 疫监 视 多糖膜 能降 低免 疫细 胞和 免疫分 子的 趋化 ,使 被膜 菌与宿 主长 期共 存 。 13 、密度 感应(QS) : 多数细 菌能合 成并释 放一种 称为 自身诱 导素( 信息素) 的信 号分子 ,胞外 信号分子浓 度随细 菌密 度的 增加 而增 加, 达到 一个 临界 浓度 时 , 信 息素 会 启 动菌 体中 相 关基因 的表 达 , 调 控细 菌 的生物 行 为 ,以 适应 环境 的变 化, 这一现 象称 群体 感应 调节 。 14、微 生物 种群 间的 关系 :互生 、共 生、 拮抗 、寄 生。 15、正 常菌 群与 其宿 主之 间形成 共生 关系 ,具 体表 现为
23、营 养、 免疫 、生 物拮 抗三方 面。 16、菌 膜病 :牙 周炎 、中 耳炎、 坏死 性筋 膜炎 、心 内膜炎 。 17、无 特定 病原 体动 物(SPF ) : 指不 存在 某些 特定 的 具有病 原性 或潜 在病 原性 微生物 的动 物。 18、感 受态 :细 胞生 活周 期中 一 种特 殊的 生理 状态 。 第三章 消 毒 与灭 菌 1、灭菌 : 指杀 灭物 体中 所 有病原 微生 物和 非病 原微 生物及 其芽 胞、 霉菌 孢子 的方法 。 2、消毒 : 指杀 灭物 体中 病 原微生 物的 方法 。只 要求 达到消 除传 染性 的目 的, 对非病 原微 生物 及其 芽胞 、 孢子并
24、 不 要 求全 部杀 死。 3、防腐 : 指阻 止或 抑制 微 生物生 长繁 殖的 方法 。 4、无菌 : 指没 有活 微生 物 的状态 。 5、无 菌操 作: 防止 微生 物 进入机 体或 局部 环境 的操 作技术 。 6、物 理消 毒灭 菌法 :热 力 灭菌法 、辐 射灭 菌法 、超 声波灭 菌法 、滤 过灭 菌法 。 7、热 力灭 菌法 :干 热灭 菌 、湿热 灭菌 。 二者 比较 同一温 度下 , 湿 热灭 菌 效 力比 干 热灭 菌大。 原因: 湿热 中细 菌菌 体蛋 白较 易凝固 ; 湿热 的穿 透力 比干 热大 ; 湿热 的蒸 汽有 潜热 存在 。 干热 灭菌 法 火焰 灭菌 法
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