2019年春高中生物专题1基因工程1.3基因工程的应用课堂演练（含解析）新人教版选修3.doc

《2019年春高中生物专题1基因工程1.3基因工程的应用课堂演练（含解析）新人教版选修3.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2019年春高中生物专题1基因工程1.3基因工程的应用课堂演练（含解析）新人教版选修3.doc（11页珍藏版）》请在麦多课文档分享上搜索。

1、1基因工程的应用随堂检测1(2018甘肃天水检测)1987 年，美国科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞并获得高水平的表达。长成的烟草植株通体光亮，堪称自然界的奇迹。这一研究成果表明( )萤火虫与烟草的 DNA 结构基本相同萤火虫与烟草共用一套遗传密码 烟草体内合成了荧光素萤火虫和烟草合成蛋白质的方式基本相同A BC D解析：选 D。萤火虫与烟草的遗传物质都是双链 DNA，这是完成基因重组的基础，正确；自然界的所有生物几乎都共用一套遗传密码，即无论在高等生物还是低等生物中，相同的密码子决定的氨基酸种类都相同，正确；萤火虫的荧光素基因导入烟草细胞使得该植株通体光亮，可见荧光素基因在该植株中

2、成功表达，正确；基因的表达包括转录和翻译，最后合成出蛋白质，正确。2(2018盐城高二检测)下列关于植物、动物以及微生物在基因工程的应用方面的叙述，错误的是( )A动物和微生物可以生产基因工程药物，植物不能B三类生物技术操作中目的基因导入受体细胞的方式不同C三类生物技术操作原理相同D三类生物技术操作中用到的工具酶相同解析：选 A。除基因工程的第三步“将目的基因导入受体细胞”的方法不同外，三类生物在基因工程的应用中，从原理、使用工具到操作流程等基本一致，B、C、D 项正确；三类转基因生物都可以用来生产基因工程药物，A 项错误。3(2018东北育才学校高二期中)科学家利用基因工程培育出了耐盐的转基

3、因棉花新品系，下列相关叙述错误的是( )A可通过农杆菌感染法将重组质粒导入受体细胞B含耐盐基因的棉花细胞可经植物组织培养获得完整植株C可用较高浓度的盐水浇灌来鉴定棉花植株的耐盐性D如果目的基因的核苷酸序列是全部未知的，可用 PCR 技术得到大量目的基因解析：选 D。棉花是双子叶植物，通过农杆菌感染法可将重组质粒导入棉花受体细胞，2A 正确；植物组织培养技术可以保持亲本的优良性状，含耐盐基因的棉花细胞经植物组织培养可获得耐盐的植株，B 正确；棉花植株是否耐盐，主要看植株能否在高浓度的盐溶液中生活，因此，可以用较高浓度的盐水浇灌来鉴定棉花植株的耐盐性，C 正确；如果目的基因的核苷酸序列是全部未知的

4、，可从基因文库中获取目的基因，D 错误。4下列有关乳腺生物反应器与微生物生产药物的叙述，错误的是( )A前者在乳汁中提取药物，后者在其细胞或产物中提取B前者是在畜牧业中的应用，后者是在工业生产中的应用C前者合成的蛋白质已加工成熟，后者合成的蛋白质一般没有加工成熟D两者与人体基因结构均相同解析：选 D。动物基因的结构与人类基因的结构基本相同，微生物基因的结构与人类基因的结构不同。5腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症是一种免疫缺陷症，对患者采用的基因治疗方法是：取出患者的淋巴细胞，进行体外培养时转入正常 ADA 基因，再将这些淋巴细胞转入患者体内，使其免疫功能增强，能正常生活。下列有关叙述中不正确的

5、是( )A正常 ADA 基因替换了患者的缺陷基因B正常 ADA 基因通过控制 ADA 的合成来影响免疫功能C淋巴细胞需在体外扩增后再转入患者体内D腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于先天性免疫缺陷症解析：选 A。基因治疗是将正常的基因导入到有基因缺陷的细胞中。正常的 ADA 基因可以控制合成正常的 ADA 来影响免疫功能；为获得大量含正常 ADA 基因的淋巴细胞，需在体外扩增后再转入患者体内；腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于先天性免疫缺陷症。6(2017高考全国卷)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回

6、答下列问题：(1)在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的 mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是_。提取 RNA 时，提取液中需添加 RNA 酶抑制剂，其目的是_。(2)以 mRNA 为材料可以获得 cDNA，其原理是_。(3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是_(答出两点即可)。(4)当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA 连接酶催化形成的化学键是_。(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是_。3解析：(1)在进行基因工程操作时，若要

7、从植物体中提取几丁质酶的 mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是相对于老叶而言嫩叶组织细胞更容易被破碎。提取RNA 时，提取液中需添加 RNA 酶抑制剂，其目的是防止 RNA 降解。(2)以 mRNA 为材料获得cDNA 的原理是在逆转录酶的作用下，以 mRNA 为模板按照碱基互补配对的原则可以合成cDNA。(3)若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因是目的基因无复制原点且目的基因无表达所需启动子。(4)DNA 连接酶催化形成的化学键是磷酸二酯键。(5)若获得的转基因植株不具备所期望的性状表现，根据中心法则分析，其可能的原因是目的基

8、因的转录或翻译异常。答案：(1)嫩叶组织细胞易破碎 防止 RNA 降解 (2)在逆转录酶的作用下，以 mRNA 为模板按照碱基互补配对的原则可以合成 cDNA (3)目的基因无复制原点；目的基因无表达所需启动子 (4)磷酸二酯键 (5)目的基因的转录或翻译异常7应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据下列材料回答问题：材料一：蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢” ，有着超强的抗张度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法培育转基因蜘蛛羊。材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食

9、用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。(1)图中，过程所需要的工具酶有_，构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由_、_、启动子、终止子等部分组成。(2)过程将重组质粒导入山羊受体细胞时，采用最多也最有效的方法是_。通过过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从_中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。(3)通过培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有_等突出优点。解析：基因工程常用限制酶、DNA 连接酶和载体作为工具。基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点。将目的基因导入动物细胞的常用方法是显微注射法。基因工程育种的优点是能克服远

10、缘杂交不亲和的障碍，目的性较强。4答案：(1)限制酶、DNA 连接酶 目的基因 标记基因 (2)显微注射法 乳汁 (3)目的性强，能克服远缘杂交的不亲和的障碍(或能有效地打破物种间的生殖隔离界限)课时作业一、选择题1(2018长春外国语学校高二月考)科学家在河南华溪蟹中找到了金属硫蛋白基因，并以质粒为载体，采用转基因方法培育出了硫吸收能力极强的转基因烟草。下列有关该烟草培育的说法正确的是( )A金属硫蛋白基因需插入到质粒上，才能转移到受体细胞中B需用特定的限制酶切割烟草的核酸C同种限制酶既可以切割含目的基因的 DNA 片段又可以切割质粒，因此不具有专一性D转基因烟草与原烟草相比基因组成发生了变

11、化，导致两者出现生殖隔离解析：选 A。金属硫蛋白基因需插入到质粒上，才能转移到受体细胞中，A 正确；在基因工程中，需用特定的限制酶切割目的基因和运载体，而不是切割烟草的核酸，B 错误；限制酶具有专一性，能识别特定的脱氧核苷酸序列，C 错误；转基因烟草与原烟草之间一般不会出现生殖隔离，D 错误。2(原创)下列有关目的基因的操作能够改善产品品质的是( )A将草鱼的生长激素基因导入鲤鱼体内B将肠乳糖酶的基因导入奶牛的基因组C将人血清白蛋白的基因改造后在山羊的乳腺中表达D将 Bt 毒蛋白基因整合到烟草或棉花的基因组并实现表达解析：选 B。将草鱼的生长激素基因导入鲤鱼体内是提高鲤鱼的生长速度。导入肠乳糖

12、酶基因的奶牛的牛奶中乳糖含量少，改善了牛奶的品质。将人血清白蛋白的基因改造后在山羊的乳腺中表达是乳腺生物反应器的应用。Bt 毒蛋白基因是抗虫基因，能够提高植物的抗性。3(2018南京高二检测)在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作正确的是( )A用限制酶切割烟草花叶病毒的核酸B用 DNA 连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体C重组 DNA 分子只能导入烟草的受精卵D用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞属于细胞水平的检测解析：选 B。限制酶一般只切割 DNA 分子双链，而烟草花叶病毒是 RNA 病毒，A 项错误；DNA 连接酶连接目的基因和载体，构建基因表达载体(即重组 DNA

13、 分子)，B 项正确；作为目的基因的受体细胞，可以是烟草的受精卵，也可以是一般的体细胞或烟草的原生质体，C项错误；D 项应该属于个体生物学水平的检测，D 项错误。54下表有关基因表达的选项中，不可能的是( )基因 表达的细胞 表达产物A 细菌抗虫蛋白基因 抗虫棉叶肉细胞 细菌抗虫蛋白B 人酪氨酸酶基因 正常人皮肤细胞 人酪氨酸酶C 动物胰岛素基因 大肠杆菌工程菌细胞 动物胰岛素D 兔血红蛋白基因 兔成熟红细胞 兔血红蛋白答案：D5(2018云南师大附中期末)下面有关基因工程的叙述，正确的是( )A利用基因工程技术可分别从大肠杆菌和青霉菌体内获取基因工程药品胰岛素和青霉素B用氯化钠处理大肠杆菌可

14、以使其处于感受态C启动子也称为起始密码子，终止子也称为终止密码子D由大肠杆菌工程菌获得的人的干扰素不能直接利用解析：选 D。青霉菌产生青霉素是一种自身基因的正常表达，故从青霉菌体内获得的青霉素不属于基因工程药品，A 错误；用氯化钙处理大肠杆菌可以使其处于感受态，B 错误；启动子和终止子都是一段特殊的 DNA 序列，负责调控基因的转录，而起始密码子和终止密码子都存在于 mRNA 上，分别决定翻译的起始和终止，C 错误；大肠杆菌是原核生物，无内质网和高尔基体，由大肠杆菌工程菌生产的干扰素不具备天然活性，需经过人工加工处理后才能利用，D 正确。6科学家将含人的 抗胰蛋白酶基因的 DNA 片段，注射到

15、羊的受精卵中，该受精卵发育成的羊能分泌含 抗胰蛋白酶的奶。这一过程不涉及( )ADNA 按照碱基互补配对原则自我复制BDNA 以其一条链为模板合成 RNACRNA 以自身为模板自我复制D按照 RNA 密码子的排列顺序合成蛋白质解析：选 C。目的基因在通过转基因工程得到的受体羊体内能够进行复制、转录和表达，RNA 以自身为模板自我复制不能发生在正常的真核细胞内。7上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了 30多倍，这标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。以下与此有关的叙述中正确

16、的是( )A所谓“提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因B可将白蛋白基因导入牛的卵细胞中，通过组织培养形成转基因牛C人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，这是因为只在转基因牛的乳腺细胞6中才有人白蛋白基因D运用基因工程技术让牛合成人白蛋白，该技术将导致定向变异解析：选 D。 “提高基因表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中的人白蛋白基因合成出更多的蛋白质。动物细胞的全能性较难实现，用牛的卵细胞不能培养形成转基因牛。转基因牛的每个正常细胞中都含有人白蛋白基因，人们只在转基因牛的乳汁中才能获取人白蛋白，这是因为人白蛋白基因只在转基因牛的乳腺细胞中表达。 8如图是利用基因工

17、程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述正确的是( )A的构建需要限制性核酸内切酶和 DNA 聚合酶参与B侵染植物细胞后，重组 Ti 质粒整合到的染色体上C的染色体上若含抗虫基因，则就表现出抗虫性状D只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异解析：选 D。A 项，为重组 Ti 质粒，其构建需要限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶。B 项，含重组 Ti 质粒的农杆菌侵染植物细胞后，重组 Ti 质粒上的目的基因整合到受体细胞的染色体上，而并非整个重组 Ti 质粒整合到的染色体上。C 项，目的基因导入受体细胞后不一定能进行表达，所以抗虫基因导入植物细胞后，培育成的植株也不一定具有抗虫性状。D 项，转基因

18、抗虫植株是否培育成功，可以从个体生物学水平上进行检测，即观察植株是否具有抗虫性状，如果具有抗虫性状则说明发生了可遗传变异(基因重组)。9近年来基因工程的发展非常迅猛，基因治疗不断取得新进展。下列疾病可用基因治疗医治的是( )A21三体综合征B镰刀型细胞贫血症C地方性甲状腺肿D青少年型糖尿病解析：选 B。21三体综合征是染色体异常遗传病，患者 21 号染色体有三条，病因不属于基因异常，不能进行基因治疗；镰刀型细胞贫血症可用基因治疗医治；地方性甲状腺肿采取的是放射性治疗或手术治疗；青少年型糖尿病属于自身免疫病，必须注射胰岛素治疗。10(2018枣庄八中高二月考)研究发现，let7 基因能影响癌基因

19、 RAS 的表达，使肺癌细胞的增殖受到抑制，其影响机理如图所示。下列相关叙述正确的是( )7A目的基因是否在受体细胞中转录，可用抗原抗体杂交技术来进行检测Blet7 基因转录的 miRNA 与 RAS mRNA 的配对遵循碱基互补配对原则C肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中 RAS mRNA 含量减少引起的Dlet7 基因转录的 miRNA 无翻译功能是因为 let7 基因缺少启动子答案：B二、非选择题11(2018四川资阳高二诊断)菊天牛是菊花的主要害虫之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗虫菊花。请回答下列问题：(1)可用_处理土壤农杆菌，使其处于_以便吸收重组质粒。(

20、2)将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够_的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到菊花细胞的_上，最终形成转基因植株。(3)用 PCR 方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据_的脱氧核苷酸序列设计特异引物，以_为模板进行第一轮扩增。(4)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛 2 龄幼虫，实验结果如下表所示：组别 死亡率(%)转基因植株 1 60.00实验组转基因植株 2 53.33对照组 13.33对照组应饲喂等量的_菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物。据表分析，实验组与对照组_差异显著，说明转基因菊花对菊天牛 2 龄幼虫有较强的毒杀作用。答案：(1)Ca

21、2 (或 CaCl2) 感受态 (2)将 TDNA 转移至受体细胞 染色体 DNA (3)抗虫基因(或目的基因) 转基因菊花的 DNA(或含目的基因的菊花 DNA)(4)非转基因 死亡率12科学家尝试使用 Cre/LoxP 位点特异性重组系统，在确定目的基因导入成功后，删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因。其技术过程如图 1 所示(图中的代表基因前的启动8子)，据图回答：(1)LoxP 是一种仅由 34 个碱基对构成的小型 DNA 片段，由两个含 13 个碱基对的反向重复序列和中间间隔的 8 个碱基对序列共同组成，自身不会表达，插入质粒后也不影响原有基因的表达，其碱基序列如图 2 所示：Cre

22、酶能特异性地识别此序列并在箭头处切开 LoxP，其功能类似于基因工程中的_酶。(2)将重组质粒导入植物细胞最常用的方法是_。作为标记基因，抗除草剂基因用于检测目的基因是否导入成功的原理是_。(3)确定目的基因导入成功后，抗除草剂基因就没有用了。抗除草剂基因继续留在植物体内可能会造成的安全问题是_。经 Cre 酶处理后，质粒中的两个 LoxP 序列分别被切开后，可得到图 1 中右侧的这两个 DNA 分子。由于_，因此抗除草剂基因不再表达。解析：(1)基因工程中的限制酶能特异性地识别脱氧核苷酸序列并在特定位点处切开，Cre 酶的功能与之类似。(2)将重组质粒导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法。

23、抗除草剂基因和目的基因在同一个质粒上，可以用抗除草剂基因作为标记基因来检测目的基因是否导入成功。(3)抗除草剂基因继续留在植物体内可能会转移到杂草中，形成能抗除草剂的超级杂草。由图示可知，经 Cre 酶处理后，抗除草剂基因前没有了启动子，因此不能表达。答案：(1)限制 (2)农杆菌转化法 抗除草剂基因和目的基因在同一个质粒上 (3)抗除草剂基因可能转移到杂草中 抗除草剂基因前没有了启动子13(2018无锡天一中学高二期末)我国科学家屠呦呦因青蒿素的研究荣获 2015 年诺贝尔生理学或医学奖。青蒿素是目前世界上最有效的治疗疟疾药物，为青蒿植株的次级代谢产物，其化学本质是一种萜类化合物，其生物合成

24、途径如图 1 所示。正常青蒿植株的青蒿素产量很低，难以满足临床需求，科学家为了提高青蒿素产量，将棉花中的 FPP 合成酶基因导入了青蒿植株并让其成功表达，获得了高产青蒿植株，过程如图 2 所示。9(1)研究人员从棉花基因文库中获取 FPP 合酶基因后，可以采用_技术对该目的基因进行大量扩增，该技术除了需要提供模板和游离的脱氧核苷酸外，还需要提供_、_等条件。(2)图 2 中的为_，形成过程中需要_等酶；棉花 FPP 合成酶基因能够和质粒连接成的主要原因是_。(3)若不能在含有抗生素 Kan 的培养基上生存，则原因是_。(4)由题意可知，除了通过提高 FPP 的含量来提高青蒿素的产量外，还可以通

25、过哪些途径来提高青蒿素的产量？(试举一例)_。解析：(1)PCR 技术可在体外快速扩增目的基因，PCR 的条件：模板(目的基因)、原料(四种脱氧核苷酸)、引物、热稳定 DNA 聚合酶( Taq 酶)。(2)图 2 中的为构建的基因表达载体(重组质粒)，形成过程中需要限制酶切割目的基因和载体，再用 DNA 连接酶连接。由于切割棉花 FPP 合成酶基因和质粒后，具有相同的黏性末端，两者能够连接成基因表达载体。(3)重组质粒中含有标记基因，若不能在含抗生素 Kan 的培养基上生长，说明重组质粒未导入农杆菌。(4)据图分析可知，FPP 在 ADS 基因表达的情况下，生成青蒿素，或者抑制 SQS 基因的

26、表达，降低 FPP 生成其他萜类化合物的量，因此要提高青蒿素的产量，可以通过抑制 SQS 基因的表达(或增强 ADS 基因的表达)这些途径。答案：(1)PCR 引物 热稳定的 DNA 聚合酶 (2)基因表达载体(重组质粒) 限制酶和DNA 连接酶 切割后具有相同的黏性末端 (3)重组质粒没有导入农杆菌(4)抑制 SQS 基因的表达(或增强 ADS 基因的表达)14HIV 属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题：(1)用基因工程方法制备 HIV 的某蛋白(目的蛋白)时，可先提取 HIV 中的_，以其作为模板，在_的作用下合成_，获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。(

27、2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是_，该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是_。10(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是 HIV 主要感染和破坏了患者的部分_细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。(4)人的免疫系统有_癌细胞的功能。艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。解析：(1)HIV 的遗传物质是 RNA，所以要想获得相应的目的基因，应以 HIV 的 RNA 为模板，在逆转录酶的作用下合成 cDNA(或 DNA)。(2)目的蛋白注入机体后相当

28、于抗原。在抗原的刺激下，机体进行体液免疫，由浆细胞产生相应抗体(分泌蛋白)，由于该抗体能与目的蛋白(抗原)发生特异性结合，所以可通过抗体检测出有无目的蛋白，从而确定体内有无 HIV。(3)HIV 主要攻击人体的 T(或 T 淋巴)细胞，从而降低机体免疫系统的防卫功能。(4)癌细胞在机体中属于抗原，人体的免疫系统能够监控和清除癌细胞。答案：(1)RNA 逆转录酶 cDNA(或 DNA)(2)抗体 抗原抗体特异性结合 (3)T(或 T 淋巴)(4)监控和清除15医学研究发现，番茄红素具有一定的抗癌效果，其合成、转化途径如图 1 所示。由于普通番茄合成的番茄红素易发生转化，科学家设计了一种重组 DN

29、A(质粒三)，它能转录出双链 RNA(发卡)，番茄细胞可以识别侵入的双链 RNA 并将该双链 RNA 及具有相同序列的单链 RNA 一起降解，提高了果实中番茄红素的含量(图 2)。请分析回答下列问题：(1)转录出“发卡”的 DNA 片段实际上是两个反向连接的_基因，由于“发卡”阻止了其在细胞内的_(填“转录”或“翻译”)过程，所以提高了果实中番茄红素的含量。(2)为保证第二个目的基因片段反向连接，处理已开环质粒二所用的两种限制酶是_和_。(3)科学家发现，培育成功的转基因番茄植株对光能的利用能力有所下降，据图 1 推测11可能的原因是_。为解决此问题，可以按照乳腺生物反应器的原理，在转录出“发

30、卡”的 DNA 片段前面加入只在果实中发挥作用的_。(4)去磷酸化是去掉黏性末端最外侧游离的磷酸基团。对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要目的是阻止其_。解析：(1)重组 DNA(质粒三)能转录出双链 RNA(“发卡”)，从而提高果实中番茄红素的含量，根据题干信息和图 1 可知其阻止了番茄红素环化酶的翻译，所以转录出“发卡”的 DNA 片段实际上是两个反向连接的番茄红素环化酶基因。(2)图 2 中，目的基因的两侧存在限制酶 Ecl、 BamH切点，所以为保证第二个目的基因片段反向连接，处理已开环质粒二所用的两种限制酶是 Ecl 和 BamH。(3)转基因番茄植株对光能的利用能力有所下降，据图 1 推测可能的原因是转基因番茄细胞中缺乏番茄红素环化酶，胡萝卜素、叶黄素合成受阻，光反应减弱。要使目的基因只在果实中发挥作用，可以在目的基因前面加上只在果实中发挥作用的启动子。(4)对已开环的质粒二两端去磷酸化的主要目的是阻止其自身成环(环化)。答案：(1)番茄红素环化酶 翻译 (2) Ecl BamH (3)胡萝卜素、叶黄素合成受阻，光反应减弱 启动子 (4)自身成环(自身环化)