DB1304 T 126-2003 草莓脱毒育苗技术规程.pdf

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1、I305DB邯郸市士也方标准1)川30411 120-2003草莓脱毒育苗技术规程2003-10-1发布2003-10-10实施1邓单阝市质量技术监督局1)D1304八126-2003毛左J月I i青木标准2003年10月1日首次发布本标准！I-1成安县草莓协会提出本标准起草单位：成安县草莓协会成安县技术监督局木标准主要起草人：杨建军杨峰梁领军刘建民范振海中光辉IN弓1.304厂1 126一）（）3莓脱毒育苗技术规程范用本标准规定了草薄脱毒育苗技术的灭菌、育苗、移栽及林苗后初期管理。水标准适用1-.在入:1.控制的环崦卜进行的草荀幕尖脱毒育苗2定义2. 1脱毒育苗组织培养简称组培）植物州织培养

2、是指在无菌条件.F.将离I水的桥物器官、川川、细欣以及原生项休济作在人1-控制的环境中使其形成完撰的植株2. 2有菌指暴露在空气中或曾经接触过自然水源的物体表面在自然条件下形成的或附带的细菌23无菌经物理灭菌法或化学灭菌法处理过的物体，2.4 41理灭菌指利用高温、射线等杀菌或滤膜过滤除菌等物理拱旅而进行的灭菌主要包括：千热、湿热、射线、超声孩、流休过滤等除菌技术拮施25化学灭筒指利用各种化学药剂，杀灭细菌的技术措施常用的灭菌剂有：氛化汞、福尔马林，双氧水、来苏水等。3灭菌3它洗涤3.1.1昌洗洛的器In、用具洗涤用1%稀盐酸或洗衣粉，肥皂将可溶性无机物除去然后用清水洗净3.1.2不易洗涤的器

3、皿用具洗涤IN弓1304/1 126-20033节2二配制洗液称4()g工业用策铭欣钾加入I OOrl水11，加热致移解然后冷却，再慢慢注入浓流赦800m,边加边搅拌，3. 1.2.2洗涤方法将特洗的器具、用具浸泡在洗液中，浸泡时间不低于刁小时，再用清水冲洗千净，在洗涤过程中应防止洗液戮到衣服和皮肤上损坏衣服或灼伤皮肤3.2接种用具灭菌3.2. 1接种玻摘、金属用具灭蔺，育使用千烘法灭菌，把器皿或用具放胃在电热烘箱或纤外线千澡箱内干烘，保持Ell度170(,干烘2小时，玻嘀器具还可用高Ifs.蒸汽灭前3.2.2接种常用金属器械（如：刀、剪、摄子等）灭菌，在使用前应用70%酒精棉球仔细擦净，浸泡

4、在70%酒 fl中，使用时先在酒精灯外焰上灼烧，特冷却后使川。3.2.3接种服、相子，口革灭菌用高温、湿热法灭菌，将洗净晾千的衣、相. L l甲用纸包好后放入高压灭菌锅中，待漏度达到121 IC.湿度达到100%,压力达到1.05翻r。时，灭菌30分钟3.3培养基灭菌3.3.1 At1.A*基 it质灭蔺用高压燕汽灭菌法灭菌，将耐热培养鹅物质置于高1灭蔺锅中，当温度达到121C ,压力达到0. 105?pa时，灭菌15分种至40分种。3.3.2不耐热培养其物质灭菌应采用过馆灭菊法灭菌，将固体物质叉入溶器内然后向溶器内加水，边加边搅拌，加水至固体物质充分溶解，将溶液用目滤网过滤，液休物质直接用滤

5、网过滤。3.4 *4材料的表面灭菌3.4二冲洗3.4.1.1将采来的植物材料除去不用的部分，用软毛刷或毛笔轻轻刷洗干净，置于烧怀中加入清水，用木棒轻轻揽拌或直接用流水冲洗DI弓I304/TI 26-20033. 4. 1.2将清洗干净的植物材料胃入每loom L加40g洗衣粉的洗衣粉治液中用木棒轻轻搅拌5分钟再用清水冲洗下净3.4. 2表面灭苗3.4.2.，工作人员换眨:1：作服，戴上：l：作帽，用肥皂洗手至肘部，然后用清水冲净，擦干，再用709 M“J*擦手至别 103.4.2.2将处理好的植物材料和接种用具、灭苗溶液、无蔺水、空烧杯、持用培养纂等哭T无菌工作台L:种箱中。3.4.2.3把沥

6、千的植物材料转放到灭过菌的花角瓶或了LI瓶Ili,倒入0.1%级化汞溶液或20%新洁尔灭溶液，轻轻摇动三角瓶或1. Li瓶灭菌7分钟一R分钟3.4.2.4在灭菌时间大于7分钟，小于吕分钟时，将灭菌溶液倒出，倒出灭菌溶液不得倒出植物材料。然后立即倒入无菌水轻轻摇动冲洗，每次冲佚3分钟，冲洗3-10次。4接种4. 1接种前准备在接种前10分种，工作人员穿戴好工作服、1作帽，然后用70%酒精擦试工作台和双手。将经过灭菌处理的植物材料和接种用具放叉T作台上，将特用试管或三角瓶，水平拿着靠近酒精火焰上烤10-15秒钟。4. 2选材应选用生长R天一10天的苹尖或浩取休眠的苹段经入一1.催芽15天的顶芽和腋

7、芬。4. 3接种将经过表面灭菌茎尖材料在解All镜一F，用解刘针一层一层地仔细剥离叶片，直到暴甜出圆滑生长点，用锋利的解#I)刀小心切取0.59大小的带I-2个叶原基的茎尖，然后用右手拿镊子夹住送入试管轻轻插入培养签I，放入培养室进行培养，镊子灼烧后放回架L4. 4培养IN弓1304/1 126-2003将接种的茎尖放在温度为25光照I 000I,X-300011的培养室内培养，光照以日光灯为光源的，每天用40瓦的日光灯服光招小时一t小时，芬分化期每30天更换一次培并基，培铃天嫩苹生很期，侮25天换一次培养基培养25天强化嫩茎期，侮2。天更换一次培养基，培养2。天。4. 5移栽4.5. 1炼苗

8、当试管苗生根长达0.scep时应进行炼苗，炼苗时温度应保持在20一35，光照不少于100001.X（一般采用60%一75%的遮阳网下炼苗) to天强光照射不少T4小时炼苗时问为7天至10天I it炼苗后期应对瓶膜揭盖，拐盖时环境应湿润，宜先将瓶盖或封膜半if.，次日全部揭丿f.揭盖时应选在空气混度开始升高的傍晚进行，揭膜炼苗时间x,1天一3天。4.524 . 5 . 2试特苗移栽选用墓质应选用疏松、排水性和透气性的良好物质（如石珍、珠岩），并用0.3%一：-0.5%高锰酸钾彻底消毒。4.5.2.2移栽应选择无风阴湿的夭气进行称栽，取苗时手要轻，不能用力过猛扯断苗根。洗苗时应一手轻捏苗的根茎上部

9、，另一手轻揉苗根，将培养基和松散的愈伤组织清理掉，然后轻拿试管苗，将根系均匀分布于营养杯中撒入墓质，移栽后应及时喷水保持湿度、温度，并逐渐加强光照，适时喷00.2磷酸二氮钾和0.1%尿素溶液进行叶而追肥，叶面追肥每7天进行一次。4.5. 3容器移栽4.5.3. 1容器应选择lOcn X 10cm或RcauXBcm的圆型软塑料杯。4.5.3.2基质应选择疏松、排水性和透气性好的沙襄土或腐稍土4. 5苗，33移栽当试管苗移栽20天后应进行容器移栽，移栽时先在营养杯中装入四分之一基质，左手轻拿试管右手将根均匀地分布干营养杯中，然后左手扶苗，右手柱杯中撤基质，用两手捏住杯沿轻墩儿IN 3 1 3041

10、T126-2003下，亻吏苗根与基质贴紧，基质应加至距营养杯眨:fl1，处。移栽后及时喷水，使基质VIA I立即砚盖塑料薄膜，容器苗在膜内培养10天一15天，拥腆缎练3天一5天后可移植到大M.4.6.4大田移栽45月.1移苗密度试管苗移栽应适应密植，株距应为30cm，行Ili.应为50cm.4.5.4.2移栽移栽时应选择在阴天进行，先确定株距、行Ili I川化铲挖成深5cm,底部成圆锥形的小穴，然后将容器苗轻轻暇入穴，注意根要舒展，不可窝根，再筱土杆J1根 fl部 W) MII IM. :I仆实后以土表与小苗根颈部持平，及时浇透水，使土与苗根接紧4.5.4.3移苗初期管理移植时灌水后隔3天一5

11、天淮第2次水，以后很据滴情15天一20天灌水一次，保持峨水分不低于田间持水里的70%,移栽7日后应喷施0.2磷酸；二氢钾和0.2%尿素溶液进行叶面施肥。DD 1304f t 126一（)03附录A（规范性的附录）培养基的配制方法A. I培养攀组成成分A. 1.1无机营养成分主要有N, P, K. Ca. M叹、S.Fe, Mn. Zi卜R和M.A. 1.2有机营养成分A. 1.2. 1含氮物质主贾有81.居弓6. B3、和肌醇等难1屯素和氮基酸八】22雄源主要是浓度为rIP-aT,的Pr, -A. 1.3A. 1.3.生长激寨生长末主要有吲哚zJ酸I几、吲哚-3 T酸I队、蔡z,酸N从，7氛笨

12、氧T_.酸2, 4 I),次些撤素广泛用于生根，并与细V ill分裂素相ri作用促进苹的增硝A. 1.3.2细胞分裂家主要有苄基腺嗦吟1)-BA和赤琳素GAp主哭用于促进细胞分裂和由愈伤细织或器官分化不定芽。八1.4琼脂是一种由海燕将平的习搪类物质主要用干使用浓度为0).7一1，A. 2配制方法A. 2二将琼脂蔗馆按使用景放入容器，按使用浓度加入熬馏水并加热至溶解然后分别按使用浓度加入培养墓各种元素，包括生长调节物质和其他特殊成分充分混合后用0. 1 m1./L氢板化钠（Nac,n )和0. Imol./I,盐酸“Cl调节PS值至5.0-6.022把配制好的昔养液分别赞入娇养器中，川康或盖村严

13、瓶日，决入高爪灭菌锅在温度为，2tear.力，.05k叹/(,Ml,的状态F灭菌i5分钟一一一一J-11191度浓表Al女1q养基19液配华1.表(MS培养-,fV.式盐分类配料名称硝酸馁(N114卜K)3 )硝酸钾（KNO3 )氛化钙(cac12 21121)硫成镁(MgSO4.71120)磷酸二氢钾（K甚121(丶）无机物质翩成(13nO., )硫赦铭(M?s（）二刁It加）硫酸锌(7nSO4 71120)徽最元素钥酸钠(Na2MoO4 21120)硫酸铜(CuSO4 51120 )抓化钻（吸,n1.12 6奋120)硫酸亚铁（FeS04 71120 )乙二胺四乙酸二钠（Nat-FIYIA

14、)烟酸(VB3)盐破毗哆醉(V16)盐酸硫胺素(VB1)铁盐有机物质Dill 30411 126 2003表A2漱素使用浓度配料表一P r 漱素名称G一：节基氮基腺嗦争I3A单位川g/I.川g/L起好布期0. 1茎芽增拍期生恨期赤霉素（c1A3 ) mg/I族糖凉月片0.130 . 8ll川304f F! 26 -2003草莓脱毒育苗技术规程编制说明我县0是八十年代初，引进种植的，有一十多年的种植历史。草莓是一种生产周期姐、效益高的奸济作物，也是具有营养、药用和医疗价值的高样水果具委、具政府把草莓种植列入县农业经济发展之道在草莓种植过程中，病苗、死苗逐年上升，严重地阻碍了草莓种植的发展。为此经成安具草莓协会提出，并与成安县技术监督局菜同起草制定了草莓脱毒育描技术规矜）在标准起草过程中我们严格按照标准化导则GB1. 1.G川. 2,GB1. 3编写，参照了河北林果研究等科学先进资料，结合县农艺师和经验丰富的草莓种植人员深入田问进行了充分试验论证。在标准编制过程中，描述力求详尽、实用、可操作性强，该标准与国内同类育苗技术相比具有先进水平，该标准的实施为草莓育苗提供了规范性指导，受到了广大果农的好评。成安县草莓协会二00三年九月日