DB1304 T 126-2003 草莓脱毒育苗技术规程.pdf
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1、I305DB邯郸市士也方标准1)川30411 120-2003草莓脱毒育苗技术规程2003-10-1发布2003-10-10实施1邓单阝市质量技术监督局1)D1304八126-2003毛左J月I i青木标准2003年10月1日首次发布本标准!I-1成安县草莓协会提出本标准起草单位:成安县草莓协会成安县技术监督局木标准主要起草人:杨建军杨峰梁领军刘建民范振海中光辉IN弓1.304厂1 126一)()3莓脱毒育苗技术规程范用本标准规定了草薄脱毒育苗技术的灭菌、育苗、移栽及林苗后初期管理。水标准适用1-.在入:1.控制的环崦卜进行的草荀幕尖脱毒育苗2定义2. 1脱毒育苗组织培养简称组培)植物州织培养
2、是指在无菌条件.F.将离I水的桥物器官、川川、细欣以及原生项休济作在人1-控制的环境中使其形成完撰的植株2. 2有菌指暴露在空气中或曾经接触过自然水源的物体表面在自然条件下形成的或附带的细菌23无菌经物理灭菌法或化学灭菌法处理过的物体,2.4 41理灭菌指利用高温、射线等杀菌或滤膜过滤除菌等物理拱旅而进行的灭菌主要包括:千热、湿热、射线、超声孩、流休过滤等除菌技术拮施25化学灭筒指利用各种化学药剂,杀灭细菌的技术措施常用的灭菌剂有:氛化汞、福尔马林,双氧水、来苏水等。3灭菌3它洗涤3.1.1昌洗洛的器In、用具洗涤用1%稀盐酸或洗衣粉,肥皂将可溶性无机物除去然后用清水洗净3.1.2不易洗涤的器
3、皿用具洗涤IN弓1304/1 126-20033节2二配制洗液称4()g工业用策铭欣钾加入I OOrl水11,加热致移解然后冷却,再慢慢注入浓流赦800m,边加边搅拌,3. 1.2.2洗涤方法将特洗的器具、用具浸泡在洗液中,浸泡时间不低于刁小时,再用清水冲洗千净,在洗涤过程中应防止洗液戮到衣服和皮肤上损坏衣服或灼伤皮肤3.2接种用具灭菌3.2. 1接种玻摘、金属用具灭蔺,育使用千烘法灭菌,把器皿或用具放胃在电热烘箱或纤外线千澡箱内干烘,保持Ell度170(,干烘2小时,玻嘀器具还可用高Ifs.蒸汽灭前3.2.2接种常用金属器械(如:刀、剪、摄子等)灭菌,在使用前应用70%酒精棉球仔细擦净,浸泡
4、在70%酒 fl中,使用时先在酒精灯外焰上灼烧,特冷却后使川。3.2.3接种服、相子,口革灭菌用高温、湿热法灭菌,将洗净晾千的衣、相. L l甲用纸包好后放入高压灭菌锅中,待漏度达到121 IC.湿度达到100%,压力达到1.05翻r。时,灭菌30分钟3.3培养基灭菌3.3.1 At1.A*基 it质灭蔺用高压燕汽灭菌法灭菌,将耐热培养鹅物质置于高1灭蔺锅中,当温度达到121C ,压力达到0. 105?pa时,灭菌15分种至40分种。3.3.2不耐热培养其物质灭菌应采用过馆灭菊法灭菌,将固体物质叉入溶器内然后向溶器内加水,边加边搅拌,加水至固体物质充分溶解,将溶液用目滤网过滤,液休物质直接用滤
5、网过滤。3.4 *4材料的表面灭菌3.4二冲洗3.4.1.1将采来的植物材料除去不用的部分,用软毛刷或毛笔轻轻刷洗干净,置于烧怀中加入清水,用木棒轻轻揽拌或直接用流水冲洗DI弓I304/TI 26-20033. 4. 1.2将清洗干净的植物材料胃入每loom L加40g洗衣粉的洗衣粉治液中用木棒轻轻搅拌5分钟再用清水冲洗下净3.4. 2表面灭苗3.4.2.,工作人员换眨:1:作服,戴上:l:作帽,用肥皂洗手至肘部,然后用清水冲净,擦干,再用709 M“J*擦手至别 103.4.2.2将处理好的植物材料和接种用具、灭苗溶液、无蔺水、空烧杯、持用培养纂等哭T无菌工作台L:种箱中。3.4.2.3把沥
6、千的植物材料转放到灭过菌的花角瓶或了LI瓶Ili,倒入0.1%级化汞溶液或20%新洁尔灭溶液,轻轻摇动三角瓶或1. Li瓶灭菌7分钟一R分钟3.4.2.4在灭菌时间大于7分钟,小于吕分钟时,将灭菌溶液倒出,倒出灭菌溶液不得倒出植物材料。然后立即倒入无菌水轻轻摇动冲洗,每次冲佚3分钟,冲洗3-10次。4接种4. 1接种前准备在接种前10分种,工作人员穿戴好工作服、1作帽,然后用70%酒精擦试工作台和双手。将经过灭菌处理的植物材料和接种用具放叉T作台上,将特用试管或三角瓶,水平拿着靠近酒精火焰上烤10-15秒钟。4. 2选材应选用生长R天一10天的苹尖或浩取休眠的苹段经入一1.催芽15天的顶芽和腋
7、芬。4. 3接种将经过表面灭菌茎尖材料在解All镜一F,用解刘针一层一层地仔细剥离叶片,直到暴甜出圆滑生长点,用锋利的解#I)刀小心切取0.59大小的带I-2个叶原基的茎尖,然后用右手拿镊子夹住送入试管轻轻插入培养签I,放入培养室进行培养,镊子灼烧后放回架L4. 4培养IN弓1304/1 126-2003将接种的茎尖放在温度为25光照I 000I,X-300011的培养室内培养,光照以日光灯为光源的,每天用40瓦的日光灯服光招小时一t小时,芬分化期每30天更换一次培并基,培铃天嫩苹生很期,侮25天换一次培养基培养25天强化嫩茎期,侮2。天更换一次培养基,培养2。天。4. 5移栽4.5. 1炼苗
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