GB T 14926.40-1994 实验动物 肠道鞭毛虫和小袋纤毛虫检验方法.pdf

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1、GB/T 14926.4094 1 主题内容与适用范围 本标准规定了小鼠、大鼠、地鼠和豚鼠肠道鞭毛虫（包括毛滴虫、鼠贾第鞭毛虫、鼠六丝鞭毛虫）及小袋纤毛虫检验的技术要求、检验方法、形态特征。 本标准适用在饲养、繁殖、生产、实验中的小鼠、大鼠、地鼠和豚鼠肠道鞭毛虫及小袋纤毛虫的检验。 2 设备和材料 2.1 设备 2.1.1 显微镜 2.1.2 载玻片 2.1.3 染色皿 2.2 固定液 Schaudinn 饱和氯化汞水溶液 2份 95乙醇 1份 混匀后每100mL中加入冰醋酸5mL。 2.2.2 苏木素染液 苏木素染料 10g 95或100乙醇 100mL 加塞置室温68周成熟后即可使用。用时

2、1份原液加蒸馏水19份。 2.2.3 2铁明矾溶液 硫酸铁铵2g溶于蒸馏水100mL中，于棕色瓶中，4冰箱保存，以防出现沉积物。 3 检验步骤 3.1 直接涂片 于载玻片上滴加1滴生理盐水，解剖动物后立即用接种环挑取新鲜小肠、盲肠、结肠内容物，分别与生理盐水混合涂制成薄而均匀的粪膜。盖上盖玻片后于显微镜下检查。 3.2 铁苏木素染色 用牙签挑取粪便少许，如粪便不易粘于玻片上，可加入适量的血清，均匀涂抹于载玻片上； 页码，1/3GB/T 14926.40942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92640R.htm 将粪膜立刻放入40 Schaudinn

3、 液中35min； 置于50、70酒精各10min； 置于70碘酒精中10min； 于70酒精中1h或过夜（也可放置数日）； 转入50酒精5min，并用水冲洗10min； 放入400.5铁苏木素染液中10min，取出于流水中冲洗半小时； 2铁明矾液中退色1020min，退色过程中应注意观察，具体时间以在显微镜下能看清结构而定；在流水中冲洗10min以上； 顺序在50、70、85、95酒精、纯酒精、纯酒精中脱水25min； 以加拿大树胶封片，于显微镜下观察。 注：常规检验中一般多使用直接涂片法。 4 形态特征 4.1 鼠三毛滴虫（ Trichomonas muris） 滋养体呈梨形，有一明显的波

4、动膜显波浪状运动，虫体以转圈的形式运动。大小为16261014 m，染色后可见虫体前端有一椭圆形核，从核前端毛基体发出的前鞭毛为3根，向后伸出的后鞭毛与虫体融合形成波动膜，末端伸出虫体尾端呈游离状。有一贯穿虫体并从尾部伸出体外的中轴。 4.2 鼠贾第鞭毛虫（ Giardia muris） 滋养体正面观为梨形，侧面观为半月型，虫体运动形式为左右幌动。大小为713510m，左右对称，腹面有一大吸盘，两个核位于虫体前部。有4对鞭毛，按部位分为前、后鞭毛、腹鞭毛、尾鞭毛，各1对。包囊为椭圆形，157 m大小，囊壁厚，未成熟包囊有2个核，成熟后有4个核。 4.3 鼠六丝鞭毛虫（ Spironucleus

5、 muris） 滋养体呈细长形，以直线形式运动，且速度较快。7923 m，较其他类鞭毛虫小，左，右对称，两个核位于虫体前端，核间的毛基体发出6根前鞭毛和2根后鞭毛，2根轴柱贯穿虫体，但未伸出体外。 4.4 小袋纤毛虫（ Balantidium sp.） 滋养体虫体透明无色或呈淡绿色，外形近似椭圆形，周身纤毛不停振动，且虫体不停转动。虫体前端有胞口，呈短小豆状，后端有一小而不明显的胞肛，有一大一小两个核，大的为肾形，小的为圆粒形，多位于大核凹陷处，虫体中部、后部各有一伸缩泡。体表有许多斜形排列的纤毛。包囊壁厚、淡绿色，新形成的包囊可见囊内虫体仍很活动。 5 结果判断 页码，2/3GB/T 14926.40942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92640R.htm5.1 在显微镜下检出虫体为阳性结果。 5.2 根据虫体形态特征定种，不能判断者可送有关机构进一步检验。 6 结果报告 根据结果判定作出报告。 页码，3/3GB/T 14926.40942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92640R.htm