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    GB T 14926.40-1994 实验动物 肠道鞭毛虫和小袋纤毛虫检验方法.pdf

    • 资源ID:255681       资源大小:101.98KB        全文页数:3页
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    GB T 14926.40-1994 实验动物 肠道鞭毛虫和小袋纤毛虫检验方法.pdf

    1、GB/T 14926.4094 1 主题内容与适用范围 本标准规定了小鼠、大鼠、地鼠和豚鼠肠道鞭毛虫(包括毛滴虫、鼠贾第鞭毛虫、鼠六丝鞭毛虫)及小袋纤毛虫检验的技术要求、检验方法、形态特征。 本标准适用在饲养、繁殖、生产、实验中的小鼠、大鼠、地鼠和豚鼠肠道鞭毛虫及小袋纤毛虫的检验。 2 设备和材料 2.1 设备 2.1.1 显微镜 2.1.2 载玻片 2.1.3 染色皿 2.2 固定液 Schaudinn 饱和氯化汞水溶液 2份 95乙醇 1份 混匀后每100mL中加入冰醋酸5mL。 2.2.2 苏木素染液 苏木素染料 10g 95或100乙醇 100mL 加塞置室温68周成熟后即可使用。用时

    2、1份原液加蒸馏水19份。 2.2.3 2铁明矾溶液 硫酸铁铵2g溶于蒸馏水100mL中,于棕色瓶中,4冰箱保存,以防出现沉积物。 3 检验步骤 3.1 直接涂片 于载玻片上滴加1滴生理盐水,解剖动物后立即用接种环挑取新鲜小肠、盲肠、结肠内容物,分别与生理盐水混合涂制成薄而均匀的粪膜。盖上盖玻片后于显微镜下检查。 3.2 铁苏木素染色 用牙签挑取粪便少许,如粪便不易粘于玻片上,可加入适量的血清,均匀涂抹于载玻片上; 页码,1/3GB/T 14926.40942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92640R.htm 将粪膜立刻放入40 Schaudinn

    3、 液中35min; 置于50、70酒精各10min; 置于70碘酒精中10min; 于70酒精中1h或过夜(也可放置数日); 转入50酒精5min,并用水冲洗10min; 放入400.5铁苏木素染液中10min,取出于流水中冲洗半小时; 2铁明矾液中退色1020min,退色过程中应注意观察,具体时间以在显微镜下能看清结构而定;在流水中冲洗10min以上; 顺序在50、70、85、95酒精、纯酒精、纯酒精中脱水25min; 以加拿大树胶封片,于显微镜下观察。 注:常规检验中一般多使用直接涂片法。 4 形态特征 4.1 鼠三毛滴虫( Trichomonas muris) 滋养体呈梨形,有一明显的波

    4、动膜显波浪状运动,虫体以转圈的形式运动。大小为16261014 m,染色后可见虫体前端有一椭圆形核,从核前端毛基体发出的前鞭毛为3根,向后伸出的后鞭毛与虫体融合形成波动膜,末端伸出虫体尾端呈游离状。有一贯穿虫体并从尾部伸出体外的中轴。 4.2 鼠贾第鞭毛虫( Giardia muris) 滋养体正面观为梨形,侧面观为半月型,虫体运动形式为左右幌动。大小为713510m,左右对称,腹面有一大吸盘,两个核位于虫体前部。有4对鞭毛,按部位分为前、后鞭毛、腹鞭毛、尾鞭毛,各1对。包囊为椭圆形,157 m大小,囊壁厚,未成熟包囊有2个核,成熟后有4个核。 4.3 鼠六丝鞭毛虫( Spironucleus

    5、 muris) 滋养体呈细长形,以直线形式运动,且速度较快。7923 m,较其他类鞭毛虫小,左,右对称,两个核位于虫体前端,核间的毛基体发出6根前鞭毛和2根后鞭毛,2根轴柱贯穿虫体,但未伸出体外。 4.4 小袋纤毛虫( Balantidium sp.) 滋养体虫体透明无色或呈淡绿色,外形近似椭圆形,周身纤毛不停振动,且虫体不停转动。虫体前端有胞口,呈短小豆状,后端有一小而不明显的胞肛,有一大一小两个核,大的为肾形,小的为圆粒形,多位于大核凹陷处,虫体中部、后部各有一伸缩泡。体表有许多斜形排列的纤毛。包囊壁厚、淡绿色,新形成的包囊可见囊内虫体仍很活动。 5 结果判断 页码,2/3GB/T 14926.40942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92640R.htm5.1 在显微镜下检出虫体为阳性结果。 5.2 根据虫体形态特征定种,不能判断者可送有关机构进一步检验。 6 结果报告 根据结果判定作出报告。 页码,3/3GB/T 14926.40942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92640R.htm


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