GB T 26426-2010 饲料中副溶血性弧菌的检测.pdf

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1、ICS 65. 120 B 46 道昌国家标准国不日11: ./、民华人中GB/T 26426-2010 饲料中副溶血性弧菌的检测Method for determination of Vibrio parahaemolyticus in feeds CISO/TS 21872-1: 2007 ,Microbiology of food and animal feeding stuffs一Horizontal method for the detection of potentially enteropathogenic Vibrio spp. -Part 1: Detection of Vi

2、brio parahaemolyticus and Vibrio cholere ,MOD) 2011-01-14发布2011-07-01实施数码防伪中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T 26426-2010 前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准使用重新起草法修改采用ISO/TS21872-1:2007(食品和动物饲料的微生物学潜在肠道致病性弧菌属检测的水平方法第1部分:副溶血性弧菌和霍乱弧菌的检测)(英文版)。本标准与ISO/TS21872-1: 2007相比在结构上有较多调整，附录B中列出了本标准与ISO/TS 21872-1

3、:2007的章条编号对照一览表。本标准与ISO/TS21872-1: 2007相比存在技术性差异，这些差异涉及的条款己通过在其外侧页边空白位置的垂直单线(1 )进行了标识，附录C中给出了相应技术性差异及其原因的一览表。本标准还做了下列编辑性修改:一删除了ISO7937 :2004的目次;一一删除了ISO7937:2004的引言;一一删除了ISO7937: 2004的参考文献。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)归口。本标准起草单位:广东省微生物分析检测中心。本标准主要起草人:朱红惠、孙晓棠、羊宋贞、黎志坤。I 饲料中副溶血性弧菌的检测1 范围本标准规定了饲料中副溶血性弧菌的

4、检验方法。本标准适用于饲料中副溶血性弧菌的检测。2 规范性引用文件GB/T 26426-2010 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 14699. 1饲料采样(GB/T14699.1-2005 ,IS0 6497:2002 , IDT) GB/T 20195动物饲料试样的制备(GB/T20195-2006 ,IS0 6498:1998 , IDT) 3 原理3. 1 概述检测副溶血性弧菌包括4个步骤。注:副溶血性弧菌可以少量存在，而且往往伴随着大量的其他弧菌或其他属

5、的细菌。因此，要检测副溶血性弧菌，连续两次选择性增菌是必要的。3.2 在选择性培养液中第一次增菌称取25g试样加入到选择性培养液中，室温接种增菌培养基(碱性盐蛋白陈水，ASPW)，对于深度冷冻的样品于37.C培养6h :f: 1 h，对于新鲜的或干燥的样品于41.5 .C培养6h土1h。3.3 在选择性培养波中第二次增菌吸取3.2获得的培养液重新接种新的增菌液ASPW管内，于41.5 .C培养18h土1h. 3.4 分离用3.2和3.3获得的培养液接种下面两种固体选择性培养基:-一一硫代硫酸盐-拧攘酸盐-胆盐-煎糖琼脂(TCBS); 一一可选择另一适当的能检测副溶血性弧菌的固体选择性培养基，作

6、为TCBS的补充。TCBS在37.C培养24h土3h后检查结果。第二种选择性培养基按产品说明培养后检查结果。3.5 确证转接3.4中分离的可疑菌落，培养纯化，然后通过适当的生化检验确证。4 稀释液、培养基及试剂除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂，实验室用水采用蒸馆水或去离子水，或相当|GB/T 26426-2010 纯度的水。4. 1 增菌培养基:碱性盐蛋白陈水(ASPW)，参见附录A中的A.L4.2 固体选择性分离培养基4.2. 1 第一种培养基:硫代硫酸盐-拧朦酸盐-胆盐-蔚糖琼脂(TCBS)，参见附录A中的A.204.2.2 第二种培养基:科玛嘉弧菌显色培养基(CV)或大豆蛋

7、白陈-三苯基氯化四氮瞠琼脂(TSAT), 两者可选择其一。严格按照厂商说明制备培养基。4.3 含盐营养琼脂(SNA):参见附录A中的A.3。4.4 检测氧化酶试剂:参见附录A中的A.404.5 革兰氏染色液:参见附录A中的A.50 4.6 含盐三糖铁琼脂(TSD:参见附录A中的人604. 7 检测鸟氨酸脱竣酶(ODC)含盐培养基z参见附录A中的A.70 4.8 检测赖氨酸脱竣酶(LDC)含盐培养基:参见附录A中的A.804.9 精氨酸双水解酶(ADH)含盐培养基:参见附录A中的A.904. 10 检测半乳糖昔酶试剂:参见附录A中的A.10。4. 11 检测呵|喋含盐培养基:参见附录A中的A.1

8、1。4.12 蛋白陈盐水:参见附录A中的A.1204.13 氯化铀溶液t参见附录A中的A.13 0 5 设备和玻璃器皿需配备微生物学常规设备和以下设备。5. 1 恒温培养箱137oC :I: 1 oC。5.2 恒温培养箱或水浴:41.50C士1oC。5.3 水浴锅:44oC 47 oC。5.4 水浴锅:37oC土1C。5.5 干热灭菌烘箱或湿热高压灭菌锅。5.6 玻璃或塑料培养皿z直径9cm10 cm o 5. 7 刻度吸管:标记容量为1mL和10mL，最小刻度分别为0.1mL和O龟5mLo 5.8 pH计:25oC最小检测单位为0.01，精度到士O.1个单位。5.9 显微镜。6 采样实验室样

9、品真实、具有代表性。采样工具，如铲子、匙、采样器、试管、广口瓶、剪子等，应是灭菌的。样品送到微生物检验室应越快越好。采样数量和方式按照GB/T14699. 1执行。7 样晶的制备按照GB/T20195进行试样的制备，样品制备后应尽快检验。8 检验程序副溶血性弧菌检验程序见图102 GB/T 26426-2010 室温下样品25g (mL)+225 mL ASPW 1 mL培养液+10mL ASPW 41. 5 c培养18h土1h 第次增菌分别于TCBS和CV(或TSAT)两种培养基上划线分离31 c培养24h土3h每种培养基上至少挑选5个可疑商落如果可疑菌落数少于5个，挑取所有菌落 分离与纯培

10、养副溶血性弧菌检验程序圄1操作步骤9 检样制备和初始悬液以元菌操作称取试样25g(mL)，加入225mL 37 oC预热的增菌培养基(ASPW)(4.1)，均质|1 min2 min，制成1: 10的初始悬液。I9. 1 第一次选择性增菌对于深度冷冻的样品将初始悬液(9.1)于37oC培养6h :f: 1 h，对于新鲜的或干燥的样品将初始悬液(9.1)于41.5 oC培养6h士1ho 9.2 第二次选择性增菌9.3 用无菌移液管吸取1mL培养液(9.2)注入含10mL ASPW(4. 1)的试管内，于41.5 oC培养18h :f: 3 1 h。GB/T 26426-2010 9.4 分离9.

11、2和9.3培养的两次增菌液，分别用接种环各划线接种在两种培养基上，一块TCBS琼脂平板(4.2.1)和一块科玛嘉弧菌显色培养基(或TSAT)琼脂平板(4.2.2)。翻转上述平皿置37.C培养箱中培养。24h:!:3 h后，检查平板上的可疑菌落，在平皿底部标记要挑取的菌落。典型的副溶血性弧菌在TCBS琼脂平板上表面光滑，菌落绿色(蕉糖阴性)，直径2mm3 mmo 典型的副溶血性弧菌在科玛嘉弧菌显色培养基上表面光滑，菌落粉紫色，直径2mm3 mm。典型的副溶血性弧菌在TSAT琼脂平板上表面光滑，菌落暗红色，直径2mm3 mm。9.5 确证试验9.5.1 菌落挑选和纯化挑选每个平板(9.4)上的至少

12、5个可疑菌落，如果平板上的可疑菌落数少于5个，挑选平板上所有可疑菌落。将挑选的菌落划线接种在含盐营养琼脂(4.3)平板表面，翻转上述平皿置37.C培养箱中培养24h土3h，获得单菌落。用纯培养物进行确证试验。9.5.2 可疑菌落初步鉴定9.5.2. 1 氧化酶试验用铀金丝接种环或玻璃棒挑取在含盐营养琼脂平板(9.5. 1)上纯培养的单菌落，在浸有氧化酶试剂(4.4)的滤纸上划线。也可按照说明使用商业上的测试片。不可用镇锚丝或金属丝接种环取样。如果在10s内变为紫红色、紫罗兰色或探紫色为阳性。9.5.2.2 显微镜观察挑取在含盐营养琼脂平板上纯培养的单菌落(9.5.1)，按9.5. 2. 2a)

13、和9.5. 2. 2b)所述进行确证试验:a) 进行革兰氏染色(4.5)，显散镜观察菌体形态和革兰氏染色反应，记录结果。b) 接种含有ASPW的试管，37.C培养1h6 h。滴一滴菌撞在洁净的玻片中央，在菌液上轻霍以盖玻片，显微镜下观察运动性，记下运动呈阳性的结果。9.5.2.3 选择培养物进行生化试验保留氧化酶反应呈阳性、革兰氏染色阴性、无芽抱、运动性呈阳性的菌落，进行9.5.3所述的生化确证试验。9.5.3 生化确证9.5.3. 1 概述挑取9.5.2.3保留的纯培养物，接种9.5.3. 29. 5. 3. 8中需要的培养基。9.5.3.2 含盐三糖铁琼脂试验先穿剌含盐三糖铁琼脂(4.6)

14、斜面底层，然后在斜面划线，37.C培养24h士3h.观察结果。a) 琼脂培养基斜面一一黄色:乳糖和/或煎糖阳性(利用乳糖和/或煎糖); 红色或无变化:乳糖和廉糖阴性(不利用乳糖和煎糖)。4 GB/T 26426-2010 b) 琼脂培养基底层一一黄色:葡萄糖阳性(发酵葡萄糖); 一一红色或元变化:葡萄糖阴性(不发酵葡萄糖); 一一黑色:产生硫化氢;一一泡沫或破裂:从葡萄糖产气。典型的副溶血性弧菌反应为斜面呈碱性(红色，不利用乳糖和煎糖)和底层呈酸性(黄色，发酵葡萄糖)，不产生硫化氢，不产气，有动力。9.5.3.3 鸟氨酸脱援酶检测接种培养物于液体含盐培养基(4.7)略低于表面层，加1mL灭菌矿

15、物油于表面。37c培养24h :l: 3 h. 培养后呈混浊且紫罗兰色者为阳性反应(细菌生长并产生鸟氨酸脱竣酶)，呈黄色者为阴性反应。9.5.3.4 赖氨酸脱搂酶检测接种培养物于液体含盐培养基(4.8)略低于表面层，加1mL灭菌矿物油于表面。37C培养24h:l: 3 h。培养后呈混浊且紫罗兰色者为阳性反应(细菌生长并产生赖氨酸脱竣酶)，呈黄色者为阴性反应。9.5.3.5 精氨酸双水解酶检测接种培养物于液体含盐培养基(4.9)略低于表面层，加1mL灭菌矿物油于表面。37c培养24h土3 h。培养后呈温浊且紫罗兰色者为阳性反应(细菌生长并产生精氨酸脱竣酶)，呈黄色者为阴性反应。9.5.3.6 户

16、半乳糖昔酶检测接种培养物于含0.25mL盐溶液(4.13)的管中，加一滴甲苯，振荡混匀。37C水浴5min。加0.25 mL检测卢半乳糖昔酶的试剂(4.10)，混匀。37c水浴24h :l: 3 h。不时观察结果。呈黄色者为阳性反应(产生严半乳糖昔酶)，一般20min可见。如果24h不变色为阴性反应。如果用商业的测试片，按照说明书操作。9.5.3.7 昭|睐检测接种培养物于含5mL膜蛋白陈-色氨酸含盐培养基(4.11).37 C培养24h士3h。然后加1mL Kovacs试剂。在液层界面形成红色环者为阳性反应(产生日引喋)，黄褐色环为阴性反应。9.5.3.8 嗜盐性检测接种培养物于0%, 2%

17、 , 6% ，8%和10%不同盐浓度的蛋白陈水(4.12)中，制备菌悬液。37C培养24 h:l: 3 h. 观察液体混浊度判断细菌生长情况。9.5.3.9 生化试验结果副溶血性弧菌生化反应结果见表1。5 GB/T 26426-2010 表1生化试验结果试验副溶血性弧菌V. parahaemolyticus 乳糖煎糖葡萄糖发酵+ 产气(葡萄糖)产生硫化氢1%的含盐三糖铁琼脂上动力+ 鸟氨酸脱竣酶检测+ 赖氨酸脱竣酶检测十精氨酸双水解酶检测ONPG水解P51味产生+ 0%氯化纳2%氯化纳+ 蛋白腺盐水生长6%氯化锅+ 8%氯化纳十10%氯化销注:十为阳性，一为阴性。9.5.4 致病性因素确定(选

18、做项)副榕血性弧菌都是致病性的，为了确定菌株的致病性，需要检测菌株是否含有耐热直接溶血素(TDH)或TDH相关溶血素基因，这些检测应该在经认可的有能力的实验室进行。将分离出的副溶血性弧菌阳性菌株接种到含盐营养琼脂斜面(4.3)送至经认可的有能力的实验室进行确证。应同时提供尽可能多的关于分离菌株的信息。警告:副溶血性弧菌为对人和环境有中度潜在危险的病原，微生物操作、庭弃物处理及个人防护等生物安全保障规定参见GB19489。10 报告根据所分离菌株是否符合9.5.3.9所述的生化确证特性，报告25g(mL)样品中检出或未检出副溶血性弧菌。6 A.1 醋性盐蛋白脏水(ASPW)A. 1. 1 成分蛋

19、白陈氯化铀蒸锢水A. 1.2 制法附录A(资料性附录)培养基和试剂20.0 g 20.0 g 1000 mL GB/T 26426-2010 溶解各成分于水中，必要时加热。调整pH值，使培养基pH值在25.C时为8.6士0.2.分装烧瓶和试管(9.1和9.3).121 .C灭菌15min. A.2 前代磺酸盐-拧攘酸盐-胆盐-震糖琼脂(TCBS)A.2.1 成分蛋白陈10.0 g 酵母膏5.0 g 拧朦酸铀10.0 g 硫代硫酸铀10.0 g 拧攘酸铁1. 0g 氧化铀10.0 g 牛胆汁粉8.0 g 煎糖20.0 g 澳靡香草酷蓝0.04 g 靡香草酷蓝0.04 g 琼脂12. 0 g 18

20、. 0 gl) 蒸锢水1000 mL A.2.2 制法加热煮沸至各成分完全溶解，调整pH值，使培养基pH值在25.C时为8.6士0.2.不要使用高压灭菌器。A.2.3 制备琼脂平板冷却至50.C.每个灭菌平板倾注15mL20 mL.凝固备用。用之前，最好使琼脂表面干燥。1) 据凝胶强度而定。7 GB/T 26426-2010 A.2.4 培养基质量控制用含盐营养琼脂(SNA)和下列菌株作对照，评估每批TCBS平板效率。一一-V.arahaemolyticuNCTC 10885; 一一-V.furnissiiNCTC 11218; 一-Escherichiacoli A TCC 25922，87

21、39或117750平板效率计算公式见式(A.l)。式中zA 一一每批TCBS平板效率;A=号型X100 4守SNAN TCBS-TCBS培养基上产生的菌落数;NSNA-SNA培养基上产生的菌落数。( A.1 ) 对于副溶血性弧菌(阳性对照)，平板效率至少应为50%，大肠杆菌的平板效率应小于1%(阴性对照)。副溶血性弧菌NCTC10885菌落应为绿色(蔚糖阴性)，而弗氏弧菌NCTC11218菌落应为黄色(蔚糖阳性)。A.3 含盐营养琼脂(SNA)A. 3.1 成分牛肉膏蛋白陈氯化铀琼脂蒸锢水A.3.2 制法5.0 g 3.0 g 10.0 g 12. 0 g 18. 0 g2l 1 000 mL

22、 热溶解各成分，调整pH值，使培养基pH值在25oc时为7.2:!:0. 20分装到适当容量的烧瓶和试管中，121oc灭菌15min，试管需制成斜面。A.3.3 制备琼脂平板冷却至50OC，每个灭菌平板倾注15mL20 mL，凝固备用。用之前，最好使琼脂表面干燥。A.4 检测氧化酶试剂A. 4.1 成分四甲基对苯二股蒸锢水A.4.2 制法用之前迅速溶解各成分于冷的蒸馆水中。2) 据凝胶强度而定。8 1. 0g 100 mL A.5 草兰氏染色液A. 5.1 结晶紫染色液A.5. 1. 1 成分结晶紫95%乙醇1%草酸镀水潜液A. 5. 1. 2 制法1 g 20 mL 80 mL 将结晶紫溶解

23、于乙醇中，然后与草酸镀溶液1昆舍。A.5.2 草兰氏破液A. 5. 2.1 成分腆腆化饵蒸锢水A. 5. 2. 2 制法1 g 2 g 300 mL GB/T 26426-2010 将腆与腆化饵先进行混合，加人蒸锚水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸锢水至300mL。A.5.3 沙黄复染波A. 5. 3.1 成分沙黄95%乙醇蒸锢水A. 5. 3. 2 制法将沙黄溶解于乙醇中，然后用蒸馆水稀释。A.5.4 染色法0.25 g 10 mL 90 mL 将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染色液，染色1min，水洗;滴加革兰氏腆液，作用1min，水洗;滴加95%乙醇脱色，约30s，水洗;滴加沙黄复染液

24、，复染1min，水洗;待干，镜检。A.6 含盐三糖铁琼脂(TSI)A. 6.1 成分蛋白陈牛肉膏酵母膏20.0 g 3.0 g 3.0 g 9 GB/T 26426-2010 氯化铀乳糖蔚糖葡萄糖拧攘酸铁苯酣红琼脂蒸锢水A.6.2 制法10.0 g 10.0 g 10.0 g 1. 0g 0.3 g 0.024 g 12. 0 g 18. 0 g3l 1000 mL 溶解各成分于水中，必要时加热。调整pH值，使培养基pH值在25.C时为7.4 :f: 0. 2.分装到适当容量的试管中，121.C灭菌15min.制成斜面，斜面长约4.5cm，底部深度约2.5cm. 如果培养基放置超过8天，用之前

25、先放入沸水浴10min使之融化，冷却制成斜面。A.7 检测鸟氨酸脱搓酶(ODC)含盐培养基A.7.1 成分L-鸟氨酸盐酸盐酵母膏葡萄糖澳甲酷紫氯化铀蒸锢水A.7.2 制法5.0 g 3.0 g 1. 0g 0.015 g 10.0 g 1 000 mL 溶解各成分于水中，必要时加热。调整pH值，使培养基pH值在25.C时为6.8土O.2。分装试管，每管2mL5 mL,121 .C灭菌15min. A.8 检测赖氨酸脱搂酶(LDC)含盐培养基A. 8.1 成分L-赖氨酸盐酸盐酵母膏葡萄糖滇甲酣紫氯化铀蒸锢水A.8.2 制法5.0 g 3.0 g 1. 0g 0.015 g 10.0 g 1000

26、 mL 溶解各成分于水中，必要时加热。调整pH值，使培养基pH值在25.C时为6.8士0.2。分装试管，3) 据凝胶强度而定。每管2mL-5 mL, 121 .C灭菌15min. A.9 精氨酸双水解酶(ADH)含盐培养基A.9.1 成分精氨酸盐酸盐酵母膏葡萄糖澳甲酣紫氧化铀蒸锢水A.9.2 制法5.0 g 3.0 g 1. 0g 0.015 g 10.0 g 1000 mL GB/T 26426-2010 溶解各成分于水中，必要时加热。调整pH值，使培养基pH值在25.C时为6.8士0.20分装试管，每管2mL-5 mL,121 .C灭菌15min。A.10 检测户半乳糖昔酶试剂A. 10.

27、 1 ONPG溶液A.10.1.1 成分0-硝基苯-D-毗喃半乳糖昔(ONPG)0.08 g 蒸锢水15 mL A.l0. 1. 2 制法将ONPG溶解于约50.C水中，冷却。A.10.2 缓冲液A. 10.2. 1 成分磷酸二氢铀(NaH2P04)氢氧化铀(NaOH)(0.1 mol/L) 用蒸馆水补充至终体积A. 10.2.2 制法6.9 g 约3.0mL 50 mL 将磷酸二氢铀榕解在45mL水中，用氢氧化铀调整pH值，使pH值在25.C时为7.0士0.2.定容至50mL。A. 10.3 完全试剂A.10.3.1 成分缓冲液(A.10. 2) 5 mL 11 GB/T 26426-201

28、0 ONPG溶液CA.10. 1) A.10.3.2 制法15 mL 将缓冲液加入到ONPG溶液中。o.C5 .C保存。A. 11 检测用|睐含盐培养基A. 11. 1 色氨酸含盐培养基A.11.1.1 成分陈娥白色铀水蛋f化懵酷四氯蒸10.0 g 1. 0g 10.0 g 1 000 mL A. 11. 1.2 制法溶解各成分于水中，必要时加热，过滤。调整pH值，使培养基pH值在25.C时为7.0:1:0.2.分装试管，每管约5mL ,121 .C灭菌15min。A. 11. 2 Kovacs试剂A. 11. 2. 1 成分对二甲氨基苯甲醒盐酸Cp为1.18 g/mL1.19 g/mL) 2

29、-甲基-2丁醇5 g 约25mL 75 mL A. 11. 2. 2 制法混合各成分。A.12 蛋白臆盐水A. 12. 1 成分蛋白豚氯化铀蒸饵水10.0 g 0，20，60，80或100g 1000 mL A. 12.2 制法溶解各成分于水中，必要时加热。调整pH值，使培养基pH值在25c时为7.5士0.2。分装试管，121 .C灭菌15min. A.13 氧化铀溶液A. 13. 1 成分氯化锅10.0 g GB/T 26426-2010 蒸锢水1000 mL A. 13.2 制法溶解各成分于水中，必要时加热。调整pH值，使培养基pH值在25.C时为7.5土0.2.分装试管，121 .C灭菌

30、15min。13 GB/T 26426-2010 附录B(资料性附录)本标准与ISO/币21872-1:2007相比的结构变化情况本标准与ISO/TS21872-1: 2007相比在结构上有较多调整，具体章条编号对照情况见表B.L表B.1本标准与ISO/TS21872-1 : 2007的章条编号对照情况本标准章条编号对应的国际标准章条编号4.5 4.6-4.13 5.5-5.12 6.5-6.9 8 附录A9 9 9.1-9.5 9.1-9.5 10 10 11 附录A附录BA.5 A.6-A.13 B.5-B.12 14 GB/T 26426-2010 附录C(资料性附录)本标准与ISO/T

31、S21872-1 : 2007的技术性差异及其原因表c.1给出了本标准与ISO/TS21872-1: 2007的技术性差异及其原因。表C.1本标准与ISO/币21872-1:2007的技术性差异及其原因本标准章条编号技术性差异原因1 删除ISO/T52187 2- 1: 2007关于食品以及食品生产和食根据我国国情，食品与动物饲晶处理过程中环境样品的适用范围料分别制定标准本标准只检测副溶血性弧菌，1 删除150/T521872-1: 2007关于霍乱弧茵的适用范围删除了检测霍乱弧菌的相关内容关于规范性引用文件，本标准做了具有技术性差异的调整，调整的情况集中反映在第2章规班性引用文件中，具删除的

32、国际标准元对应的国体调整如下:内标准，为便于标准使用者使2 一一删除了1506887; 用，本标准将这些内容直接列出删除了1507218;纳入本标准中;增加引用了国内删除了1508261; 标准，便于标准使用者使用中文增加引用了GB/T14699. 1; 术语增加引用了GB/T20195 只列出了培养基及试剂名称，将成分及配制方法转至附录4 按G/T20000. 1要求，与我A中国标准版式保持一致4.2.2 增加了科玛嘉弧菌显色培养基(CV)便于标准使用者使用4.5 增加了省略的革兰氏染色液便于标准使用者使用5. 55. 9 增加了省略的几种设备和玻璃器皿便于标准使用者使用将ls0/TS218

33、72-1: 2007中采样按照相应的国际标准执6 行，如果没有标准可按双方达成的一致意见执行，改为按照我国饲料采样有标准国内标准GB/T14699. 1执行7 将根据国际标准改成根据国内标准执行便于标准使用者使用8 将检验程序由150/T521872-1: 2007中附录A转至本标按GB/T20000. 1要求，与我准第9章中国标准版式保持一致9.1 称取试样量由Xg(mL)改为25g(mL) 便于使用，与我国标准保持一致9.4 增加了典型副溶血性弧菌在科玛嘉弧菌显色培养基上的便于标准使用者使用培养特征9.5.3.9 删除了霍乱弧菌相关的生化试验说明本标准只检测副溶血性弧菌15 GB/T 26

34、426-2010 表c.1 (续)本标准章条编号技术性差异原因删除了ISO/TS21872-1 :2007中3术语和定义的内容按GB/T20000. 1要求，与我国标准版式保持一致删除了ISO/TS21872-1 :2007中第11章检测报告要求检测报告应当注明抽样方法，所使用的检测方法，培养温度及接GB/T20000. 1要求，与我其结果。还需要提及在本标准中未涉及的所有操作步骤细节或所有可选步骤以及所有可能影响最终结果的细节。检国标准版式保持一致测报告应当包含对完成检测样品的所有必要的信息。删除参考文献按GB/T20000. 1要求，与我国标准版式保持一致16 参考文献lJ GB 1948

35、9-2008实验室生物安全通用要求GB/T 26426-2010 17 EON-N叮NH圈。华人民共国家标准饲料中副溶血性弧菌的检测GB/T 26426-2010 国和中* 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 印张1.5字数31千字2011年5月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2011年5月第一版* 书号:155066.1-42014 24.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533定价GB/T 26426-2010 打印日期:2011年6月8RF002