GB T 19915.2-2005 猪链球菌2型分离鉴定操作规程.pdf
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1、ICS 07.100.30 C 53 道雪中华人民共和国国家标准GB/T 19915.2-2005 猪链球菌2型分离鉴定操作规程Methods for detection of Stre ptococcus suis type 2 2005-09-27发布中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局中国国家标准化管理委员俨2005-11-01实施060609000420 GB/T 19915.2一2005前言猪链球菌2型是链球菌属的成员,其致病菌株可致猪链球菌病,引起猪败血症、脑膜炎等。人可通过伤口感染该菌,并导致发病和死亡。建立准确、可靠的检测方法是诊断、控制和预防该菌引致的猪链球菌病的迫切要求。
2、本标准是采用经典的细菌学鉴定方法并结合现代分子生物学技术制定的。本标准的附录A为资料性附录,附录B为规范性附录。本标准由国家标准化管理委员会提出。本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。本标准由南京农业大学、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局和中国检验检疫科学院负责起草。本标准主要起草人z陆承平、姚火春、陈国强、张敬友、张常印、唐泰山、姜巍、王凯民、林样梅、韩雪清、吴绍强、刘建、贾广乐、梅琳。本标准为首次发布。I GB/T 19915.2一2005猪链球菌2型分离鉴定操作规程1 范围本标准规定了猪链球菌2型分离鉴定的操作方法。本标准适用于猪及其产品中猪链球菌2型的分离鉴定,也可用于送检菌株的
3、鉴定。2 规范性引用文件血清型。猪链球菌2一种重要的人畜共患4 操作规程4. 1 方法概要检验程序的流程示意图见附录A4.2 试荆和材料除另有规定,所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682-1992的蒸馆水。各种培养基的制备方法见附录B(规范性附录)。4.3 仪器和设备4.3. 1 匀质器和匀质杯。4.3.2 天平:称量范围ogl 000 g,读数精度0.1g。4.3.3 培养箱:36.C土1.C。4.3.4 恒温水浴锅。134及1/2共35个以感染特定的人群,是GB/T 19915.2-2005 4.4 步骤4.4.1 样晶采集对病猪,最急性和急性病例可无菌采集死亡猪的心、肝、肺、肾、脾
4、脏、淋巴结等组织,慢性病例如关节炎型一般采取关节液及周围组织F对活猪可采取扁桃体拭子、鼻腔拭子。4.4.2 分离培养4.4.2.1 迭栓菌株的分离划线接种于普通琼脂绵羊血平板,36c土1C培养24h土2h,如菌落生长缓慢,可延长至48h土2 h,使之形成单个菌落,以供鉴定用。4.4.2.2 病料的分离和触片检查用经火焰灭菌并冷却的接种环蘸取病料内部组织后划线接种于普通琼脂绵羊血平板,于360C士10C培养24h士2h,如菌落生长缓慢,可延长至48h:l: 2 h后观察。同时取病料做组织触片,姬姆萨染色(按GB/T4789.28的方法进行染色)后镜栓,如见球菌则表明病料中可能含有链球菌。4.4.
5、2.3 扁桃体和鼻腔拭子的分离扁桃体和鼻腔拭子样品加入到含有5mL灭菌的选择性THB增菌液(见第B.4章)的试管中,于36C士lC培养24h士2h后,划线接种于选择性普通琼腊绵羊血平板(见第B.2章)。4.4.2.4 动物产晶的均质、增菌和分离以无菌操作取检样25g,加入装有225mL灭菌选择性THB增菌液见第B.4章)的广口瓶内,均质,于36.C士10C培养24h:l: 2 h后,划线接种于选择性普通琼脂绵羊血平板(见第B.2章)。4.4.3 初步鉴定猪链球菌2型在370C培养24h后,在普通琼脂绵羊血平板和选择性普通琼脂绵羊血平板上形成圆形、微凸、表面光滑、湿润、边缘整齐、半透明的菌落,直
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