GB T 17999.3-1999 SPF鸡 血清平板凝集试验.pdf

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1、GB/T 17999.3. 1999 前兰f1 本标准参照农业部1992年版鸣白荆鸡伤寒沙门氏菌多价染色平板凝集抗原与阴、阳性血清制备及检验规程编制而成。SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准，包括SPF鸡微生物学监视总则和9种SPF鸡微生物学检测方法。本标准为(SPF鸡血清平板凝集试验。SPF鸡微生物学检测方法还包括以下部分2GB/T 17999. 1 - 1999 SPF鸡红细胞凝集抑制试验;GB/T 17999.2 1999 SPF鸡血清中和试验pGR/T 17999.1-1999 SPF鸡琼脂扩散试验;GB/T 17999. 5 -1999 SPF鸡酶联免疫吸附试验gGB/T 17999

2、.6-1999 SPF鸡胚敏感试验;GB/T 17999.7-1999 SPF鸡鸡自病沙门氏菌检验sGB/T 17999.8-1999 SPF鸡试管凝集试验gGB/T 17999.9-1999 SPF鸡间接免疫荧光试验。本标准由中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出。本标准由农业部畜牧兽医司归口。本标准起草单位2中国兽药监察所、农业部实验动物研究中心。本标准主要起草人:张学琴、陈德威、赵立红。71 中华人民共和国国家标准SPF鸡血清平板凝集试验GB!T 17999.3 1999 SPF chicken. .Serum plate agglutination t四t1 范围本标准规定了鸡mL清

3、平板凝集试验所用试剂、材料，操作程序及结果判定等。本标准适用rSPF鸡感染以下病原菌后的凝集抗体的监测:鸡臼荆沙门氏菌(Salmonellaullo 门ml，)、鸡毒支原体(且今户lasmagall旧卢t川，m)、滑液囊支原体(Myc户lasmasyrwviae)、副鸡嗜血杆菌(l-laemphilus户。rgallinrum)。2 原理血清1板凝集试验是细商性抗原与相应的抗体结合后，在适量的电解质参与f.经过一段时间出现!土JHb!可见的凝集现象。常采用已知的标准细菌性抗原液检测相应的凝集抗体。3 试剂和材料3. 1 试剂3. 1. 1 凝集抗!点。3. 1. 2 阴性、同1陀血清。3. 1

4、. 3 被检血清。3. 2 材料3. 2. 1 玻璃板。3. 2. 2 移液器(TD10L200L)及吸头。4 操作程序4. 1 使用前10min - 20 min自冰箱取出抗原、阴性或阳性血清与被检血清，使其达到室温。4.2 用移液器吸取充分混匀的诊断抗原一滴(0.025 mLO. 05 mL).垂直漓子玻璃板上，然后迅速在抗原旁边滴加问垦的被检血清一滴(0.025 mLO. 05 mL)。4. 3 用牙签使血清与抗原混合均匀，涂布成直径为1cm ,._. 2 cm的片状，不断摇动玻璃板.2min内观察结果。4.4 试验应在20C25 C条件下进行。4.5 每批试验应设阳险血清与阴性血清对照。5 结果判定在2min内出现50%(十十)以上凝集者为阳性.2min内;在凝集(-)者为阴性，介于上述两者之l因为J凝，凝集判读标准见表L国家质量技术监督局1999-1个10批准2000- 04 -01实施7币GB/T 17999. 3-1999 表1血清平板凝集试验判读标准类别平板所见中士果判定1 出现大的凝集块.底质清亮，即100%凝集十十十十2 出现明显凝集块，底质稍有lil浊，即75%凝集十t+ 阳性3 出现可见的凝集颗糙，底质混浊，即50%凝集+十底质极棍浊，出现轻微可见的微细颗糙，即十可凝4 25%凝集5 底质均匀致极混浊，无凝集现象，即不凝集阴性76