DB35 T 2139-2023 白鹤芋组织培养育苗技术规程.pdf

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1、 ICS 65.020.20 CCS B 05 35 福建省地方标准 DB35/T 21392023 白鹤芋组织培养育苗技术规程 Technical regulation for tissue culture seedlings of Spathiphyllum lanceifolium（Jacq.）Schott 2023-10-25 发布 2024-01-25 实施福建省市场监督管理局 发 布DB35/T 21392023 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 组培设施.1 5 培养基.1 6 诱导培养.2 7 继代增殖培养.3 8 生根培养.3

2、 9 移栽与苗期管理.4 10 苗木质量.5 11 档案管理.5 附录 A（资料性）白鹤芋苗期主要病虫害防治方法.6 DB35/T 21392023 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由福建省林业局提出并归口。本文件起草单位：泉州市泉美生物科技有限公司、泉州市林木种苗站、泉州市林业行政执法支队、福建农林大学、泉州市林业技术推广中心、泉州市国有林场发展中心、泉州市森林资源监测站。本文件主要起草人：郑焙华、谢阿彬、李雪、陈发兴、简丽观、康清炳、

3、黄大头、陈远生、胡晓波、林清山、张莉萍、苏宝川、张春贵、彭金彬、汪国彬、郑建铃、朱志勇、柯贤石。DB35/T 21392023 1 白鹤芋组织培养育苗技术规程 1 范围 本文件规定了白鹤芋Spathiphyllum lanceifolium(Jacq.)Schott组织培养育苗过程的培养基、诱导培养、继代增殖培养、生根培养、移栽与苗期管理、苗木质量和档案管理的技术要求。本文件适用于白鹤芋组织培养育苗生产。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适

4、用于本文件。GB/T 8321（所有部分）农药合理使用准则 LY/T 2289 林木种苗生产经营档案 NY/T 23062013 花卉种苗组培快繁技术规程 3 术语和定义 NY/T 23062013界定的术语和定义适用于本文件。4 组培设施 应符合NY/T 23062013中第4章的规定。5 培养基 基本培养基 基本培养基为改良MS培养基。改良MS培养基是MS中KNO3的含量为2 300 mg/L，NH4NO3的含量为2 000 mg/L。培养基配方 5.2.1 诱导培养基配方 改良MS6-BA 1.0 mg/L4.0 mg/LNAA 0.01 mg/L0.02 mg/L蔗糖30 g/L琼脂粉

5、5 g/L。5.2.2 继代培养基配方 改良MS6-BA 0.5 mg/L4.0 mg/LIBA 0.1 mg/L3 mg/L蔗糖30 g/L琼脂粉5 g/L。DB35/T 21392023 2 5.2.3 生根培养基配方 改良MSNAA 0.1 mg/L3 mg/L蔗糖30 g/L琼脂粉6 g/L。培养基 pH 值 用1 mol/L HCl或1 mol/L NaOH调节培养基pH值为6.0。培养基配制 按照NY/T 23062013中第7章的规定执行。培养基分装 将培养基用分装机分装广口组培瓶(宜用200 g，300 mL)，按60 mL定量分装，避免培养基沾到瓶口。培养基分装好、加盖、封口

6、后，贴好标签，标明名称、配制日期和配制人。培养基灭菌 5.6.1 灭菌 采用高压蒸汽灭菌器进行湿热灭菌，灭菌压力0.10 Mpa0.11 Mpa，温度121 122，灭菌时间20 min22 min。5.6.2 冷却与储存 灭菌后的培养基置于无风、洁净和避光的环境中冷却，环境温度15 27、空气相对湿度60，储存时间不超过15 d。6 诱导培养 外植体的准备 选择性状优良、生长健壮植株的顶芽或根茎作为外植体。将选择好的植株放置于干净、通风良好的环境，在采集外植体前4 d7 d控水控肥，让植株呈轻度萎蔫状。外植体处理 6.2.1 预处理 剥除植株的叶片，取顶芽以下10 mm15 mm，基部干净平

7、滑。6.2.2 清洗 将切割好的外植体先用0.5（V/V）洗洁精清洗，再用自来水清洗23次后放置超净工作台晾干备用。6.2.3 消毒 在超净工作台上根据外植体的大小分瓶，用0.1（m/v）HgCl2消毒8 min12 min后，再使用无菌水冲洗3次，沥干水分备用。外植体接种 6.3.1 准备工作 DB35/T 21392023 3 按照NY/T 23062013中10.110.3的规定准备。6.3.2 物品灭菌 接种所需镊子、手术刀置于电热灭菌器1 min2 min后，置于无菌搁置架上晾置至室温。毛巾用75（v/v）酒精浸泡25 min 30 min后烘干备用或直接高压灭菌后冷却备用。将20

8、cm25 cm、80 g牛皮纸每100张一袋，整齐装于牛皮纸袋中，用透明胶封口，高压灭菌后烘干备用，灭菌压力0.10 Mpa0.11 Mpa，灭菌温度121 122，灭菌时间30 min40 min。6.3.3 接种 将处理后的外植体置于灭菌牛皮纸上进行切割（顶芽8 mm10 mm，茎段2 mm3 mm），按1个外植体瓶接种至诱导培养基上。培养基与培养材料应接触良好，分布均匀。接种后盖好容器盖，标记品种、人员编号，并填写好生产总单。6.3.4 培养条件 培养温度26 28，光照强度1 800 lx3 000 lx，光照时间12 h/d，空气相对湿度4060。6.3.5 培养时间 外植体接种后，

9、顶芽培养35 d42 d形成芽团，茎段培养56 d60 d切口部位首先产生愈伤组织，进而形成芽眼，并分化不定芽团。7 继代增殖培养 继代接种 按照不定芽团块直径8 mm10 mm进行切割，切割的团块保证大小均匀，并切除基部的老组织，切除团块上的根、黄化、老叶及基部褐变、软腐组织，不伤芽。将切割好的团块按照10团/瓶的接种量均匀地接种至继代培养基上培养。培养条件 培养温度24 26，光照强度2 100 lx3 000 lx，光照时间12 h/d，空气相对湿度4065。培养周期 继代周期30 d35 d，参照7.1和7.2。继代苗质量 叶形叶色正常、无畸形，茎叶无玻璃化。无真菌、细菌污染。继代增殖

10、代数控制在15代以内。8 生根培养 生根接种 将高度25 mm30 mm，叶数2.5片，最大叶宽13 mm的继代苗，按单株切割接种到生根培养基上。DB35/T 21392023 4 培养条件 培养温度23 25，光照强度2 100 lx3 600 lx，光照时间12 h/d，空气相对湿度4060。培养时间 培养时间15 d25 d。生根苗质量 苗高40 mm60 mm，根数3条，根长10 mm20 mm，叶片数量3片，最大叶宽15 mm。茎叶无玻璃化，植株挺直有光泽，无畸形。无真菌、细菌污染。9 移栽与苗期管理 生根苗移栽 9.1.1 炼苗 将瓶苗置于温室苗床上炼苗，光照强度2 100 lx3

11、 600 lx，环境温度20 28，时间3 d4 d。9.1.2 消毒 炼苗完成后，从瓶中取出苗，用清水清洗去除根茎部的培养基，用甲基托布津1 000倍液消毒5 min，放在育苗盘内。9.1.3 移栽 生根苗种植于105目或128目穴盘，规格为54 cm28 cm4.5 cm。基质为泥炭土（3 mm10 mm）3：珍珠岩1（v/v），种植深度8 mm10 mm，穴盘苗生长期75 d100 d。苗期管理 9.2.1 光照 瓶苗移栽后14 d内，光照强度控制在1 800 lx2 700 lx，14 d后光照强度调整控制在3 000 lx4 500 lx。9.2.2 温度 瓶苗移栽后14 d内，温度

12、控制在20 28，14 d后温度调整控制在18 30。9.2.3 湿度 瓶苗移栽后14 d内，空气相对湿度控制在8090，14 d后空气相对湿度调整控制在7090。9.2.4 水肥管理 温度在25 以上，空气相对湿度70，早上9点和下午2点各喷一次叶面水。移栽长出新根后，每周施800倍的美瑞莱（NPK201020）+2 000倍硫酸镁、800倍的美瑞莱（NPK14014）、800倍的美瑞莱（NPK202020）+2 000倍硝酸钾，3种肥液轮流使用。DB35/T 21392023 5 9.2.5 病虫害防治 白鹤芋苗期主要病害有褐斑病、炭疽病、链格孢菌病害等，虫害主要有蚜虫、蓟马等，具体危害症

13、状和防治方法参见附录A，所有农药使用按照GB/T 8321（所有部分）的规定执行。10 苗木质量 苗高70 mm110 mm，根数5条，叶片数量4片，最大叶宽18 mm。植株健壮挺拔，无病虫害，无畸形叶，无徒长，基部无黄叶，根系旺盛，土球完整无烂根，冠幅匀称。11 档案管理 按照LY/T 2289的规定执行。DB35/T 21392023 6 附录A （资料性）白鹤芋苗期主要病虫害防治方法 白鹤芋苗期主要病虫害防治方法见表A.1。表A.1 白鹤芋苗期主要病虫害防治方法 病虫害名称 症状/危害状 防治方法 褐斑病（brown spot）发病初期在叶背面可见水渍状斑点，在后期叶缘出现棕褐色斑点 喷

14、施 72农用链霉素可溶性粉剂 1 500 倍液，每月 1 次，不超过 2 次 炭疽病（Colletotricnum panacicola）病斑长圆形，病部黑色坏死，病斑外有黄色晕圈，病部正、背面布满褐色菌落 喷施 40炭疽福美可湿性粉剂 1 000 倍液或50多菌灵加 60甲基托布津可湿性粉剂 600 倍液，每 7 d10 d 防治 1 次，不超过 2 次 链格孢菌（Alternaria alternata）发病初期，叶尖、叶缘散生不规则病斑，以后逐渐扩大，呈黑褐色 喷施 75百菌清可湿性粉剂 800 倍液或 70代森锰锌、64杀毒矾 M_8、40灭菌丹可湿性粉剂1 000 倍液，每隔 10d 防治一次，不超过 2 次 蓟马（Thripidae）以成虫和若虫锉吸植株幼嫩组织汁液，为害叶片出现褐色条纹，严重时嫩叶嫩梢变硬卷曲枯萎 喷施溴氰菊酯 2 500 倍液或杀灭菊酯 2 500 倍液、52.25农地乐 1 000 倍液、0.3印楝素乳油 1 000 倍，每月 1 次，不超过 2 次，于傍晚或清晨光线较弱时喷施 蚜虫（Aphididae）常群集在嫩叶的背面吸取汁液，导致叶片失绿，严重时造成叶片卷曲皱缩变形，甚至干枯 喷施 10吡虫啉可湿性粉剂 1 500 倍液或 50辟蚜雾可湿性粉剂 2 000 倍液，每月 1 次，不超过 2 次