DB21 T 3804-2023 骨片法海参种类鉴定规范.pdf

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1、ICS67.120.30CCS B 5121辽宁省地方标准DB21/T 38042023骨片法海参种类鉴定规范2023-08-30 发布2023-09-30 实施辽宁省市场监督管理局 发 布DB21/T 38042023I前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由辽宁省农业农村厅提出并归口。本文件起草单位：大连海洋大学。本文件主要起草人：丁君，常亚青，宋坚，王荦，张伟杰，赵冲，尹东红。本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函

2、等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024-23447862。文件起草单位通讯地址：大连海洋大学（辽宁省大连市黑石礁街52号），联系电话：0411-84762131。DB21/T 380420231骨片法海参种类鉴定规范1范围本文件规定了骨片法鉴定不同种类海参的术语和定义、判定原理、试剂、仪器和工具、样品准备、样品固定、骨片制备、观察和拍照、观察判定。本文件适用于活海参、盐渍海参、干海参、即食海参和食品海参种类的鉴定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文

3、件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 31602 食品安全国家标准 干海参SC/T 3215 盐渍海参SC/T 3308 即食海参3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。海参骨片 sea cucumber ossicles骨片是位于海参真皮表层的内骨骼，主要成分是碳酸钙，是随海参胚胎发育而逐渐完善稳定的重要特征，形状、大小随种类不同而差别很大，是进行海参分类及快速鉴别的重要依据。注：本部分内容主要参考廖玉麟中国动物志.棘皮动物门.海参纲，世界重要经济海参种类）。桌形体 table海参骨片的

4、一种。典型的桌形体具穿孔的底盘，底盘边缘平滑或带突起，中央有一塔部，多由4个立柱和1个横梁构成，顶部具有齿。发育不全的桌形体只剩穿孔的底盘。注：本部分内容主要参考廖玉麟中国动物志.棘皮动物门.海参纲，世界重要经济海参种类）。4判定原理同种海参具有不同类型的骨片，特别是桌形体结构，具有种的特异性，可用于鉴定海参种类。依据不同种海参体壁内桌形体骨片形态的差异，能够准确、快速鉴定不同种类海参，且不受加工方式限制。5试剂DB21/T 380420232无水乙醇、次氯酸钠（NaClO）标准溶液（0.1 mol/L）、戊二醛溶液、十二烷基苯磺酸钠（C18H29NaO3S）、蒸馏水。6仪器和工具扫描电子显微

5、镜、光学显微镜、医用手术刀、灭菌吸水纸、烧杯、吸管、镊子、滤纸、载玻片、盖玻片、胶膜等。7样品准备活海参对活海参进行清洗，清除表面泥沙等杂质。从近尾端剖开海参腹部，清除海参体腔内的肠、呼吸树、生殖腺等内脏以及杂质，剩余部分为刺参体壁组织。盐渍海参盐渍海参的制备符合SC/T 3215（所有部分）中的规定。沿着海参的腹部开口处将海参上下剪开，清除泥沙等杂质。使用蒸馏水冲洗3次，用吸水纸将海参表面的水吸干。干海参干海参的制备符合GB 31602（所有部分）中的规定。将海参表面清洗干净，放入烧杯中，倒入蒸馏水，水量约为海参体积的 50 倍，浸泡 24 h。沿着海参的腹部开口处将海参上下剪开，清除泥沙等

6、杂质。将处理好的海参放入装有蒸馏水的烧杯中，水量浸没参体，大火煮沸，调至小火保持沸腾 30 min，自然冷却至室温。即食海参即食海参的制备符合SC/T 3308（所有部分）中的规定。蒸馏水冲洗 3 次，用吸水纸将海参表面的水吸干。食品海参用 95%的十二烷基苯磺酸钠（C18H29NaO3S）（或洗涤剂）清洗食品海参表面的油渍，清水冲洗 3 次，用吸水纸将海参表面的水吸干。8样品固定将上述制备好的海参体壁组织，置于无水乙醇中固定 24 h，无水乙醇需没过海参样品，每种海参固定三只。每个样品配有单独的烧杯和吸管。9骨片制备样品清洗切取背部体壁组织样本约 0.5 cm3，用蒸馏水冲洗干净，吸水纸吸干

7、水分。DB21/T 380420233样品处理将样品放置于 5 mL离心管中，向烧杯中滴加 2 mL 3 mL次氯酸钠（NaClO）标准溶液，静置10 min30 min，根据体壁溶解状况，样品析出肉眼可见的白色颗粒。骨片悬液制备用镊子取出剩余的体壁组织，加入蒸馏水，并用吸管反复冲洗。待白色颗粒沉淀后，用吸管吸去上层溶液，再滴加蒸馏水，重复漂洗 3 次。10观察和拍照光学显微镜观察吸管吸取骨片悬液 1 滴 2 滴 置于载玻片上，用盖玻片将其固定，显微镜下观察并拍照。扫描电子显微镜观察将 9.3 处理后的样品用无水乙醇漂洗 3 次 5 次，吸取骨片悬液，均匀滴加在载玻片上，65 烘干 2 min

8、，喷金后在扫描电子显微镜下观察并拍照。11观察判定判定规则根据自制的光学显微镜照片和扫描电镜照片，并根据相关资料，总结出海参桌形体的形态特征。海参骨片形态特征11.2.1仿刺参桌形体骨片形态特征仿刺参（Apostichopus japonicus）桌形体骨片由底盘和立柱组成，底盘近似为圆形，具有穿孔，底盘边缘具突起，中央有 1 个塔部。幼小刺参桌形体塔部高，有 2 个 4 个立柱和 1 个 3 个横梁，底盘较大，边缘平滑，桌形体底盘内部含有 42个 7 个小孔，底盘中央存在 4 个大孔，塔部长度为86.67m12.47 m；成年刺参桌形体退化，塔部变低或消失，变成不规则的穿孔板，内部小孔数目减

9、少到 7个2 个。仿刺参的骨片形态图见图 1。11.2.2梅花参骨片形态特征梅花参（Thelenota ananas）的体壁只有杆状体，没有桌形体。梅花参有 4 种类型的杆状体。型杆状体为繁简不同的分叉杆状体,骨长约 120 m,枝干纤细较直,主、副枝干上具小尖刺,有的分枝 2 次,有的 3 次 4 次；型杆状体为繁简不同的分叉杆状体,骨长约 85 m,枝干弯曲不规则,枝干上小尖刺较多,有的分枝 2 次,有 3次 4 次；型杆状体形状像英文字母“X”,骨长约 45 m,枝干上具多个尖刺,有的主干较短,长约6 m,有的主干较长,长达 26 m；型杆状体为棒状,长约110m,直径 10 m左右,骨

10、干上具多个小尖刺。11.2.3花刺参桌形体骨片形态特征花刺参（Stichopus herrmanni）桌形体底盘近圆形，面积有大有小，小的直径在 40 m左右，大的直径在 65 m左右，周缘呈波状，中央有 4 个大孔，周缘有小孔 12个 18 个。顶部有两种类型的DB21/T 380420234结构：一种中央有 1 个大孔，周缘具小齿 16 个左右，成4簇排列；另一种中央有 1 个大孔，周缘具小齿 15 个，成 5 簇排列。顶部与底盘之间有4个立柱支撑，立柱之间无横梁相连。花刺参的骨片形态图见图 2）。11.2.4糙刺参桌形体骨片形态特征糙刺参（Stichopus horrens）桌形体有 2

11、 种，疣足内有巨大的I型桌形体，底盘巨大，呈圆形，周缘光滑，直径约 80 m 120 m，中央有 4 个大孔，周缘有许多大小不一的穿孔，塔部高，有4根立柱，1根 2 根横梁，末端愈合呈尖状。II 型桌形体底盘呈圆形，周缘光滑，直径约 30 m 50 m，中央有 1 个大孔，周缘有 6 个 12 个小孔，塔部适度高，有4根立柱，1 根横梁，顶部呈马耳他十字形，中央有 1 个穿孔，具小齿 24 个。糙海参的骨片形态图见图 3。11.2.5玉足海参桌形体骨片形态特征玉足海参（Holothuria leucospilota）桌形体底盘近圆形，直径在 55 m 左右，周缘平滑或呈波状，中央 1 个大孔，

12、周缘 12 个左右的小孔。顶部有两种类型的结构：一种中央有 1 个大孔，周缘无小孔，具齿 12 个左右；另一种中央有1个大孔，周缘 6 个左右小孔，具齿 14 个左右。桌形体顶部与底盘有 4 个立柱支撑，立柱之间有 1 个横梁相连。玉足海参的骨片形态图见图 4。11.2.6虎纹海参桌形体骨片形态特征虎纹海参（Holothuria pervicax）桌形体底面近圆形，直径约 30 m 40 m，周缘光滑，中央有3 个或 4 个大孔，周缘有 3 个 6 个小孔。桌形体塔部退化，仅有 3 个或 4 个极低的立柱，其中 3 根立柱末端有横梁相连，一根立柱独立无横梁。虎纹海参的骨片形态图见图 5。图 1

13、仿刺参（Apostichopus japonicus）桌形体骨片扫描电镜图和光学显微镜图注：a 仿刺参骨片扫描电镜图；b,c:仿刺参骨片光学显微镜图DB21/T 380420235图2 花刺参（Stichopus herrmanni）图3 糙刺参（Stichopus horrens）桌形体骨片扫描电镜图桌形体骨片扫描电镜图图4 玉足海参（Holothuria leucospilota）图5 虎纹海参（Holothuria pervicax）桌形体骨片扫描电镜图桌形体骨片扫描电镜图注：图 2 图 4：a,b,c,d 为不同角度骨片扫描电镜图表 1海参骨片形态特征海参桌形体直径穿孔桌形体底盘立柱与

14、横梁仿刺参具穿孔近似圆形，边缘突起2 个 4 个立柱1 个 3 个横梁梅花参只有杆状体，无桌形体花刺参40m 65m中央有 4 个大孔，周缘小孔 12 个18 个近圆形，面积有大有小4 个立柱无横梁糙刺参I 型：80m 120mII 型：30m 50mI 型：中央有 4 个大孔，周缘穿孔大小不一II 型：中央 1 个大孔，周缘小孔 6 个 12 个I 型：底盘巨大，圆形II 型：底盘圆形，周缘光滑I 型：4 个立柱，1 个 2个横梁II 型：4 个立柱，1 个横梁玉足海参55m中央 1 个大孔，周缘小孔12 个左右近圆形4 个立柱1 个横梁虎纹海参30m 40m中央 3 个或 4 个大孔，周缘小孔 3 个6 个近圆形3 个 4 个立柱，3 个立柱与横梁相连DB21/T 380420236海参种类判定将待鉴定的海参按本文件“7”至“9”制备出桌形体骨片并拍照，与“11.1”和“图 1 图 5”对比，进行海参种类的鉴定，如与上述常见的海参骨片不能对应，查阅世界重要经济海参种类-ISSN1020-8682。