GB T 18204.5-2013 公共场所卫生检验方法 第5部分 集中空调通风系统.pdf
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1、ICS 13.060 C 51 CiB 中华人民共和国国家标准GB/T 18204.5-2013 公共场所卫生检验方法第5部分:集中空调通风系统Examination methods for public places一Part 5: Central air conditioning ventilation system 2013-12-31发布2014-12-01实施f飞中华人民共和国国家质量监督检验检亵总局串古中国国家标准化管理委员会。叩GB/T 18204.5-2013 目次前言. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 l 范围. 2 规范性
2、引用文件. 3 空调冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌.4 空调系统新风量. 5 空调送风中可吸人颗粒物PM106 空调送风中细菌总数 . 7 空调送风中真菌总数. . 8 空调送风中溶血性链球菌9 空调送风中嗜肺军团菌10 空调风管内表面积尘量11 空调风管内表面微生物12 空调系统净化消毒装置. . . . . . . . 11 前GB/T 18204-37 c。3.3.3 紫外灯z波长360nm土2nm. 3.3.4 滤膜过滤器。3.3.5 滤膜E孔径0.22m-0.45m.3.3.6 真空泵,3.3.7 离心机。GB/T 18204.5-2013 3.3.8 涡旋振荡器。3.3.9 普通光学显
3、微镜、荧光显微镜.3.3.10 水播箱。3.3.11 广口采样瓶z玻璃或聚乙烯材料,磨口,容积500mL。3.4 培养基和试剂3.4.1 GVPC琼脂平板。3.4.2 BCYE琼脂平板。3.4.3 BCYE-CYE琼脂平板(L-半光氨酸缺失的BCYE琼脂平板).3.4.4 革兰民染色鞭。3.4.5 马尿酸盐生化反应管.3.4.6 军团菌分型血清试剂。3.4.7 硫代硫酸锦标准搭液c(NaaSz03)=0.1 mol/LJ。3.5 果样3.5.1 将采样广口瓶(3.1.11)用前灭菌。3.5.2 每瓶中加入Na2S203(c=0.1mol!L)0.3 mL-0.5 mL.中和样品中的氧化物。3.
4、5.3 水样采集位置z冷却水果样点设置在距塔壁20cm、液面下10cm处,冷凝水采样点设置在排水管或冷凝水盘处。3.5.4 每个采样点依无菌操作取水样约500mL。3.5.5 采集的样品2d内送达实验室,不必冷冻,但要避光和防止受热,室温下贮存不应超过15d. 3.6 幢验步骤3.6.1 样品的沉淀或离心z如有杂质可静置沉淀或1000r/min离心1min去除。3.6.2 样品的过滤E将经沉淀或离心的样品通过滤膜(3.1.5)过滤,取下滤膜置于15mL灭菌水中,充分洗脱,备用。3.6.3 样品的热处理z取1rnL洗脱样品,置50c水浴(3.1.10)加热30min. 3.6.4 样品的酸处理:
5、取5mL洗脱样品,调pH至2.2.轻轻摇匀,放置5min. 3.6.5 样品的接种z取洗脱样品(3.4.2)、热处理样品(3.4.3)及酿处理样品(3.4.的各0.1mL,分别接种GVPC平板(3.2.1)。3.6.6 样品的培养z将接种平板静置于CO2培养箱(3.1.2)中,温度为35c 37 c ,C02浓度为2.5% 元COa培养箱可采用烛缸培养法。观察到有培养物生成时,反转平板,孵育10d,注意保湿。3.6.7 菌落观察z军团菌生长缓慢,易被其他菌掩盖,从孵育第3d开始每天在显微镜(3.1.9)上观察。军团菌的菌落颜色多样,通常呈白色、灰色、蓝色或紫色,也能显深褐色、灰绿色、深红色F菌
6、落整齐,表面光滑,呈典型毛玻璃状,在紫外灯下,部分菌落有荧光.3.6.8 菌落验证z从平皿上挑取2个可疑菌落,接种BCYE琼脂平板(3.2.2)和BCYE-CYE琼脂平板(3.2.剖,35C37 c培养2d,凡在BCYE琼脂平板上生长而在BCYE-CYE琼脂平板上不生长的则为军团菌菌落。3.6.9 菌型确定=应进行生化培养与血清学实验确定嗜肺军团菌。生化培养z氧化酶一/弱+),硝酸盐还原(一),尿素蹲(-),明肢液化(+),水解马尿酸。血清学实验z用嗜肺军团菌诊断血清进行分型。4 空调系统新凤量本章规定了用风管法测定集中空调通风系统的新风量,即直接在新风管上测定新风量的方法。2 GB/T 18
7、204.5-2013 本章规定集中空调通风系统新风量的测定采用GB/T18204.1-2013中6.2的风管法。5 空调迭风中可眼入颗粒物PM105.1 总则本章规定了用光散射式粉尘仪测定集中空调通风系统送风中可吸人颗粒物PM10的质量浓度,测量范围0.001mg/m3-10 mg/m3 5.2 原理当光照射在空气中悬罪的颗粒物上时,产生散射光。在颗粒物性质一定的条件下,颗粒物的散射光强度与其质量浓度成正比。通过测量散射光强度,应用质量浓度转换系数K值,求得颗粒物质量浓度。5.3 仪器光散射式粉尘仪z颗粒物捕集特性Da50=10m士0.5m,马=1.5士0.1.其中:Da50为捕集效率为50%
8、时所对应的颗粒物空气动力学直径;t1g为捕集效率的几何标准差。测量灵敏度z对于校正粒子,仪器计数1CPM=O.OOl mg/m3 测量相对误差z对于校正粒子,测量相对误差小于士10%。测量范围z优于0.001mg/m3.-.10 mg/m气仪器应内设出厂前已标定的具有光学稳定性的自校装置。注1:校正控子为平均粒径。.6m、几何标准偏差t11.25的聚苯乙烯被子.注21CPM为每分钟脉冲计数值,相对浓度的一种表示方法.5.4 制定步骤5.4.1 测点数量与位置5.4.1.1 每套空调系统选择3个.-.5个送风口进行检测。送风口面积小于0.1旷的设置1个检测点,送风口面积在0.1m2以上的设置3个
9、检测点。5.4.1.2 风口设置1个测点的在送风口中心布置,设置3个测点的在送风口对角线四等分的3个等分点上布点。5.4.1.3 检测点位于送风口散流器下风方向15cm.-.20 cm处。5.4.2 检测时间与频次5.4.2.1 应在集中空调通风系统正常运转条件下进行检测。5.4.2.2 每个测点检测3次,5.4.3 仪器操作5.4.3. 1 对粉尘仪光学系统进行自校准。5.4.3.2 根据送风中PM10浓度、仪器灵敏度、仪器测定范围确定仪器测定时间。5.4.3.3 按使用说明书操作仪器。5.5 结果计算5.5.1 数据转换对于非质量浓度的计数值,按式。)转换为PMlO质量浓度。3 G/T 1
10、8204.5-2013 c=R.K 式中zc一一可吸人颗粒物PM10的质量浓度,单位为毫克每立方米(mg/m3); R一一仪器计数值,单位为计数每分(CPM); K质量浓度转换系数,单位为毫克每立方米计数每分mg/(m3 CPM)。注g质量浓度转换系数K的确定见GB/T18204.2-2014附录B.5.5.2 迭凤口PM1D浓度计算第h个送风口PM10的质量浓度(c,)按式(2)计算。式中zCij-一第j个测点、第t次检测值zn一一测点个数。Ck =均(均斗5.5.3 空调系统选民中PM10浓度测定结果.( 1 ) ( 2 ) 一个系统且)送风中PM10的测定结果(C.)按该系统全部检测的送
11、风口PMlQ质量浓度(Ck)的算术平均值给出。6 空调送凤中细菌总数6.1 总则本章规定了用培养法测定集中空调通风系统送风中的细菌总数。6.2 原理集中空调通风系统送风中采集的样品,计数在营养琼脂培养基上经35oC31 t、48h培养所生长发育的嗜中温性需氧和兼性厌氧菌落的总数为细菌总数。6.3 仪器和设备6.3.1 六级筛孔撞击式微生物采样器。6.3.2 高压蒸汽灭菌器。6.3.3 恒温培养箱。6.3.4 平皿:;90mm. 6.4 培养基6.4.1 营养琼脂培养基成分z蛋白陈10 g 氯化铀5 g 肉膏5g 琼脂20 g 蒸锢水1 000 mL 4 GB/T 18204.5-2013 6.
12、4.2 制法z将蛋白胀、氧化铀、肉膏榕于蒸馆水中,校正pH值为7.2.7.6,加人琼脂,121t , 20 min 灭菌备用。6.5 采样6.5.1 采样点z每套空调系统选择3个.5个送风口进行检测,每个风口设置1个测点,一般设在送风口下方15cm.20 cm、水平方向向外50cm.100 cm处。6.5.2 采样环境条件z采样时集中空调通风系统应在正常运转条件下,并关闭门窗15min.30 min以上,尽量减少人员活动幅度与频率,记录室内人员数量、温湿度与天气状况等。6.5.3 采样方法z以无菌操作,使用撞击式微生物采样器(6.3.1)以28.3L/min流量采集5min . 15 min.
13、 6.6 检验步骤将采集细菌后的营养琼脂平皿置35t.37 t培养48h,菌落计数。6.7 结果报告6工1送风口细菌总数测定结果z菌落计数,记录结果并按稀释比与采气体积换算成CFU/m3(每立方米空气中菌落形成单位)。6.7.2 空调系统送风中细菌总数测定结果z一个空调系统送风中细菌总数的测定结果按该系统全部检测的送风口细菌总数测定值中的最大值给出。7 空调送凤中真菌总数7.1 总则本章规定了用培养法测定集中空调通风系统送风中的真菌总数。7.2 原理集中空调通风系统送风中采集的样品,计数在抄氏琼脂培养基上经28t、5d培养所形成的菌落数为真菌总数。7.3 仪器和设备见6.3。7.4 培养基7.
14、4.1 沙氏琼脂培养基成分z蛋白陈10 g 葡萄糖40 g 琼脂20 g 蒸锢水1000 mL 7.4.2 制法z将蛋白脏、葡萄糖溶于蒸锢水中,校正pH为5.5.6.0,加入琼脂,115t , 15 min灭菌备用。7.5 采样见6.5.5 GB/T 18204.5-2013 7.6 检验步骤将采集真菌后的沙氏琼脂培养基平皿置28c培养5d,逐日观察并于第5天记录结果。若真菌数量过多可于第3天计数结果,并记录培养时间。7.7 结果报告7工1送风口真菌总数测定结果z菌落计数,记录结果并按稀释比与采气体积换算成CFUjm3(每立方米空气中菌落形成单位。7工2空调系统送风中真菌总数测定结果s一个空调
15、系统送风中真菌总数的测定结果按该系统全部检测的送风口真菌总数测定值中的最大值给出。8 空调迭风中溶血性链琼茵8.1 总则本章规定了用培养法测定集中空调通风系统送风中的萨榕血性链球菌。8.2 原理集中空调通风系统送风中采集的样品,经35c 37 c、24h48 h培养,在血琼脂平板上形成的典型菌落为。一溶血性链球菌。8.3 仪器和设备见6.3.8.4 培养基8.4.1 血琼脂平摄成分z蛋白陈10 g 氧化铀5 g 琼脂20 g 脱纤维羊血5 mL., 10 mL 蒸锢水1000 mL 8.4.2制法z将蛋白脏、氯化销、肉膏加热溶化于蒸锢水中,校正pH为7.47.6,加人琼脂,121c 20 mi
16、n灭菌。待冷却至50c左右,以元菌操作加人脱纤维羊血,摇匀倾皿。8.5 采样见6.5.8.6 栓验步骤8.6.1 培养方法z采样后的血琼脂平板在35c 37 c下培养24h48 h. 8.6.2 结果观察=培养后,在血琼脂平板上形成呈灰白色、表面突起、直径0.5mm0.7 mm的细小菌落,菌落透明或半透明,表面光滑有乳光;镜检为革兰氏阳性无芽抱球菌,圆形或卵圆形,呈链状排列,受培养与操作条件影响链的长度在4个-8个细胞至几十个细胞之间F菌落周围有明显的2mm-4 mm 界限分明、完全透明的元色溶血环。符合上述特征的菌落为溶血性链球菌。. GB/T 18204.5-2013 8.7 结果报告8工
17、1送风口萨禧血性链球菌测定结果z菌落计数,记录结果并按稀释比与采气体积换算成CFU/m3(每立方米空气中菌落形成单位)。8工2空调系统送风中萨禧血性链球菌测定结果z一个空调系统送风中溶血性链球菌的测定结果按该系统全部检测的送风口萨榕血性链球菌测定值中的最大值给出。9 空调送凤中晴肺军团菌9.1 总则本章规定了用液体冲击法测定集中空调通风系统送风中的嗜肺军团菌。9.2 原理采用液体冲击法采集集中空调通风系统送风中的气溶胶,样品经培养在GVPC琼脂平板上生成典型菌落,并在BCYE琼脂平板上生长而在BCYE-CYE琼脂平板不生长,进一步经生化实验和血清学实验鉴定确认的菌落为嗜肺军团菌。9.3 仪器和
18、设备9.3.1 微生物气溶胶浓缩器z采样流量注100L/min,对于直径3.0m以上粒子其捕集效率二三80%(或浓缩比注的。9.3.2 被体冲击式微生物气溶胶采样器z采样流量7L/min-15 L/min,对于0.5m粒子的捕集效率二三90%。9.3.3 离心管z容棋50mL. 9.3.4 平皿E抖。mm.9.3.5 COz培养箱:35C -37 c。9.3.6 紫外灯z波长360nm士2nm。9.3.7 涡旋振荡器。9.3.8 普通光学显微镜、荧光显微镜。9.3.9 水榕箱。9.4 试剂和培养基9.4.1 来样眼收渡1一-GVPC液体培养基9.4.1.1 GVPC添加剂成分z多粘菌素B硫酸盐
19、10 mg 万古霉素0.5 mg 放线菌酣80 mg 9.4.1.2 BCYE添加剂成分za-酣戊二酸1.0 g N-2酷胶基-2胶基乙烧磺酸(ACES)10.0 g 氢氧化饵2.88 g L半眈氨酸盐酸盐0.4 g 焦磷酸铁0.25 g 7 GB/T 18204.5-2013 9.4. 1.3 吸收液成分z活性炭2 g 酵母浸出粉10 g GVPC添加剂BCYE添加剂蒸锢水1000 mL 9.4.1.4 制法z将活性炭、酵母浸出粉加水至1000 mL, 121 c下高压灭菌15min,加人GVPC添加剂(9.4.1.1)和BCYE添加剂(9.4.1.2),分装于灭菌后的离心管(9.3.3)中
20、备用。9.4.2 采样眼收灌2一一酵母提取菠9.4.2.1 吸收液成分=酵母浸出粉12 g 蒸锢水1000 mL 9.4.2.2 制法z将酵母浸出精加水至1000 mL, 121 c下高压灭菌15min,分装于灭菌后的离心管(9.3.3)中备用。9.4.3 盐酸氧化饵溶渡c(HCl.KCl) =0.01 mol/LJ 9.4.3.1 成分=盐酸(0.2mol/L) 3.9 mL 氧化饵(0.2mol/L) 25 mL 9.4.3.2 制法z将上述成分混合,用1mol/L氢氧化铀调整pH=2.2士0.2,121c下高压灭菌15min 备用。9.4.4 GVPC琼脂平板。9.4.5 BCYE琼脂平
21、板。9.4.6 BCYE-CYE琼脂平板。9.4.7 革兰氏染色液。9.4.8 马尿酸盐生化反应管。9.4.9 军团菌分型血清试剂。9.5 采样9.5.1 采样点z每套空调系统选择3个-5个送风口进行检测,每个风口设置1个测点,一般设在送风口下方15cm-20 cm、水平方向向外50cm-100 cm处。9.5.2 将采样吸收液1(9.4.1)20mL倒入微生物气溶胶采祥器(9.3.2)中,然后用吸管加人矿物油1滴-2滴。9.5.3 将微生物气搭肢浓缩器(9.3.1)与微生物气溶胶采样器(9.3.2)连接,按照微生物气溶胶浓缩器和微生物气溶胶采样器的流量要求调整主流量和浓缩流量。9.5.4 按
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