GB T 14926.35-1994 实验动物 兔脑胞内原虫的检验方法.pdf

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1、GB/T 14926.3594 1 主题内容与适用范围 本标准规定了检查实验动物体内寄生的兔脑胞内原虫的取样、染色检验方法及结果判定标准。 本标准适用于实验动物生产、使用及检测单位对实验大鼠、小鼠、地鼠、豚鼠及兔的检验。 2 设备和材料 注射器 载玻片 甘油 甲醇 无菌生理盐水 姬姆萨（Giemsa）染液 中性缓冲液 3 检验步骤 3.1 取样 3.1.1 活体动物的取样 所检验动物不能处死时，用消毒好的注射器吸24mL无菌生理盐水，注入动物腹腔，轻轻抽打23次，然后吸出少许腹腔液，在干净载玻片上涂片，编号。 3.1.2 剖杀动物的取样 将动物处死，立即打开腹腔，用吸管吸取少许腹腔液涂片，或用

2、干净载玻片在动物腹腔脏器表面轻压一下，制成压印片，编号。 3.2 固定和染色 涂片或压印片晾干，用甲醇固定5min，中性缓冲液冲洗，晾干。姬姆萨染液染色1520min，中性缓冲液冲去多余染液，蒸馏水冲洗，晾干。 3.3 结果判定 在光学显微镜高倍镜或油镜下对染好的涂片或压印片进行仔细检查，在腹腔巨噬细胞胞浆内查找原虫孢子，发现孢子或滋养体即判为阳性。 4 兔脑胞内原虫的主要形态特征 页码，1/2GB/T 14926.35942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92635R.htm 兔脑胞内原虫的孢子为卵圆形，平均大小为1.52.5 m，一端含有一个核，另一端有呈多圈卷曲的丝状物。该虫在宿主腹腔巨噬细胞胞浆内行孢子生殖，姬姆萨染色将孢子染成蓝色。检查中常见的是巨噬细胞内的假包囊（直径约30 m），无囊壁，只见上百个滋养体聚积在一起。 5 结果报告 根据判定结果，作出报告。 页码，2/2GB/T 14926.35942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92635R.htm