GB T 14926.27-1994 实验动物 小鼠腺病毒检验方法.pdf

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1、GBT 14926.2794 1 主题内容与适用范围 本标准规定了小鼠腺病毒抗体的检验方法，试剂等。适用于检测实验小鼠群的小鼠腺病毒感染情况。 2 引用标准 GBT 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法。 3 设备、材料和试剂 3.1 小鼠腺病毒（MAd）毒种、FL株。 3.2 小鼠肾原代细胞。 3.3 ELISA、IFA和IEA所需的设备、材料和试剂等见GBT 14926.18中4.1和 4.2。 4 检验步骤 4.1 玻片抗原的制备：MAd FL株毒种接种小鼠肾原代细胞，约24天，细胞病变达“”时涂片。涂片、鉴定和保存见GBT 14926.18中4.2.3。 4.

2、2 ELISA 抗原的制备：MAd FL株毒种接种小鼠肾原代细胞，细胞病变达“ ”时 收毒，冻融3次，离心3000rmin，取上清，超速离心后收集沉淀物，滴定抗原效价，分装保存（见 GBT 14926.18中4.1.2.2）。 4.3 阳性血清：MAd FL株毒种免疫SPF小鼠的阳性血清或免疫腹水，ELISA滴度11 280，IFA和IEA滴度1：160。 4.4 阴性血清：确证无MAd感染的SPF小鼠群血清。 5 检验方法和结果判定 5.1 ELISA法：是首选的方法，使用MAd ELISA抗原，酶结合物用抗小鼠IgG酶结合物或SPA-酶结合物均可。操作步骤和结果判定见GBT 14926.18中4.1.3。待检 血清110阳性，经重试或用IFA重试仍为阳性判阳性。 5.2 IFA或IEA法：亦可使用，用MAd FL株玻片抗原，抗小鼠IgG荧光结合物（作IFA）和SPA-酶结合物（作IEA），操作步骤和结果判定见GBT 14926.18中4.2.4。待检 血清15阳性经重试（本法或另一法）仍为阳性判阳性。 6 结果报告 根据结果作出报告。 页码，1/1GB/T 14926.27942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92627R.htm