GB T 14926.20-1994 实验动物 脱脚病病毒(鼠痘病毒)检验方法.pdf

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1、GBT 14926.2094 1 主题内容与适用范围 本标准规定了鼠痘病毒的检验方法、试剂等，适用于检测实验小鼠群中鼠痘病毒的感染情况。 2 引用标准 GBT 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法 3 设备、材料和试剂 3.1 痘苗病毒毒种。 3.2 BHK-21 传代细胞，Vero传代细胞。 3.3 酶标仪。 3.4 生物显微镜。 3.5 恒温培养箱。 3.6 离心机4000r/min。 3.7 微量加样器。 3.8 聚苯乙烯板。 3.9 冰箱4，20。 4 检验步骤 4.1 痘苗病毒ELISA抗原制备：将痘苗病毒接种BHK-21传代细胞，待细胞病变达时，收获病毒，

2、将病毒液冻化三次，2000rmin离心20min，将上清液装入透析袋，用聚乙二醇（分子量20000）脱水浓缩510倍，低温保存。 4.2 痘苗病毒抗原片制备：将痘苗病毒接种Vero细胞，待细胞病变达时，将感染细胞制成抗原片。 4.3 阳性血清 用痘苗病毒免疫SPF小鼠，制成阳性血清。 4.4 阴性血清 确证无鼠痘病毒感染的SPF小鼠血清。 5 检验方法 5.1 采用ELISA（见GB/T 14926.18中4.1）方法或IEA（见GB/T 14926.18中4.2）方法进行血清学检验。 5.2 当标本出现阳性结果时，则选用同一方法或另一方法重试，结果阳性则判为阳性，对疑鼠痘病鼠，可进行病毒检查，取病鼠脾脏，制成10悬液，3000r/min离心30min，取上清接种BHK21细胞或Vero细胞，如出现病变，同上法制成抗原片，用痘苗病毒阳性血清进行特异页码，1/2GBT 14926.20942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92620R.htm性鉴定。 6 结果报告 根据判定结果做出报告。 页码，2/2GBT 14926.20942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92620R.htm