GB T 14926.10-2001 实验动物 泰泽病原体检测方法.pdf
《GB T 14926.10-2001 实验动物 泰泽病原体检测方法.pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《GB T 14926.10-2001 实验动物 泰泽病原体检测方法.pdf(7页珍藏版)》请在麦多课文档分享上搜索。
1、ICS 65. 020. 30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准dEE 4llnHU 4lnunu nunuL nHUn/一ny一?-7AH户hv41t户。户hv户hu4l,nJ内/n/nuvnudnudnHdnHUanME A斗A斗nt叮lAEE,ABEt-JV 干中4E,nRUAAAA吁户hu户hunkuphunJn/nJnJ nudn叫JvnHdnwdAH.an-AAAAIda-aESEAt-,AEE TTTT JffJ/fJ/JIf BBBB GGGG 实验动物微生物学检测方法(2)Laboratory animal一-Microbiological examination -m
2、ethods 2001 - 08 -29发布2002 - 05 -01实施中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局发布GB/ T 14926.1 0-2001 34 前本标准是对GB/T14926.10-1994(实验动物泰泽氏菌检验方法的修订。本标准增加了ELISA和IFA法作为初步检测的选用方法。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:李红。本标准于1994年1月首次发布。中华人民共和国国家标准实验动物泰泽病原体检测方法G/ T 14926. 102001 Laboratory animalMethod for examination
3、of Tyzzers organism 代替GB/T14926. 10- 1994 1 范围本标准规定了实验动物泰泽病原体的检测方法。本标准适用于小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠和兔泰泽菌的检测。2 引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时,所示版本均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB/ T 14926.42一2001实验动物细菌学检测标本采集GB/ T 14926. 432001 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂GB/ T 14926. 502001 实验动物酶联免疫吸附试验GB/ T 14926. 52
4、2001 实验动物免疫荧光试验3 原理病原体寄居于动物回盲部粘膜细胞内,当动物处于应激状态或免疫力低下时可导致出血性坏死性肠炎或(和)肝脏点状坏死,该病原体具有特殊的菌体形态和排列方式,据此可进行检测。动物感染泰泽病原体后血清中可产生相应的抗体。根据免疫学原理,采用泰泽病原体抗原检测小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔血清中泰泽病原体抗体。4 主要设备和材料4. 1 普通恒温培养箱。4. 2 荧光显微镜。4. 3 生物显微镜。4. 4 酶标仪。4. 5 组织研磨器。4. 6 超声波细胞破碎机。4. 7 聚苯乙烯板,40孔、55孔或96孔(可拆或不可拆),用前洗净晾干,紫外光照射1h。4. 8 微量加样器
5、,容量550L、50200L。4. 9 印有1040个小孔的载玻片。4. 10 盖玻片。4. 11 超低瘟冰箱或液氮罐(保存肝脏用)。中华人民共和国国家质量监督检验检瘟总局2001-08 -29批准2002 - 05 -01实施35 5 培养基和试剂5. 1 血琼脂平皿。5.2 乙酸可的松注射液。5. 3 甲醇。5. 4 姬姆萨染液。5. 5 ELISA抗原。5.5. 1 特异性抗原GB/ T 14926.10 2001 带有严重坏死灶的动物肝脏用PBS制成1: 10的匀浆,超声波粉碎后离心,取上清液作抗原。5. 5. 2 正常抗原未受泰泽菌感染的动物肝脏,按4.5.1法制成。5.6 抗原片5
6、.6.1 抗原带有严重坏死灶的动物肝组织用PBS按1: 10在冰浴中制成匀浆,调整浓度至每个显微镜镜泊视野有适当的菌量,即细菌、肝细胞、细胞碎片完全铺开,不重叠。泰泽菌自溶现象严重,应尽快完成该过程。5. 6.2 抗原片制备将上述抗原液适量滴于玻片孔中,室温干燥后,冷丙酣(4C)固定10mino PBS漂洗后充分干燥,置于一20C备用。5. 7 酶结合物辣根过氧化物酶标记羊或兔抗小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠IgG抗体,用于检测相应动物的血清抗体;辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG抗体,用于检测兔血清抗体;辣根过氧化物酶标记葡萄球菌蛋白A(SPA) ,用于检测小鼠、豚鼠、兔血清抗体。5. 8 荧光结合物荧
- 1.请仔细阅读文档,确保文档完整性,对于不预览、不比对内容而直接下载带来的问题本站不予受理。
- 2.下载的文档,不会出现我们的网址水印。
- 3、该文档所得收入(下载+内容+预览)归上传者、原创作者;如果您是本文档原作者,请点此认领!既往收益都归您。
下载文档到电脑,查找使用更方便
5000 积分 0人已下载
下载 | 加入VIP,交流精品资源 |
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- GB 14926.10 2001 实验 动物 病原体 检测 方法
