GB T 15683-1995 稻米直链淀粉含量的测定.pdf

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1、GB/T 156831995 本标准等效采用国际标准ISO 6647：1987稻米直链淀粉含量的测定 。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了稻米直链淀粉含量的测定方法和结果计算。 本标准适用于稻米直链淀粉含量的测定。 2 引用标准 GB 5491 粮食、油料检验 扦样、分样法 GB 5497 粮食、油料检验 水分测定法 GB 5513 粮食、油料检验 还原糖和非还原糖测定法 3 定义 本标准采用下列定义： 3.1 直链淀粉：淀粉中的多糖组成，其大分子具有明显的链状结构。 3.2 支链淀粉：淀粉中的多糖组成，其大分子具有支链结构。 4 原理 将大米粉碎至细粉以破坏淀粉的晶形结构，使其易于完全分

2、散及糊化，并对粉碎试样脱脂，脱脂后的试样在氢氧化钠溶液中分散，向一定量的试样分散液中加入碘试剂，在620nm处测定所形成的复合物的吸光度。 考虑到支链淀粉对试样中碘-直链淀粉复合物的影响，利用直链淀粉与支链淀粉的混合物制备校正曲线，从校正曲线上读取试样中直链淀粉含量。 5 试剂 所用试剂除注明外，均为分析纯，水为蒸馏水或至少相同纯度的水。 5.1 甲醇（GB 683）：85（ V/V）。 5.2 乙醇（GB 679）：95（ V/V）。 5.3 氢氧化钠（GB 629）：1mol/L水溶液。 5.4 氢氧化钠（GB 629）：0.09mol/L水溶液，准确标定。 5.5 乙酸（GB 676）：

3、1mol/L溶液。 5.6 碘试剂：用具盖称量瓶称取2.0000.005g碘化钾（GB 1272），加适量的水以形成饱和溶液，加入 0.2000.001g碘（GB 675），碘全部溶解后将溶液定量移至100mL容量瓶中，加水至刻度，页码，1/7GB/T 1568319952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156830K.htm摇匀。每天 用前现配，避光保存。 5.7 马铃薯直链淀粉标准溶液：1mg/mL。 称取1000.5mg脱脂及平衡后的直链淀粉于100mL烧杯中，加入1.0mL无水乙醇湿润样品，再加 入9.0mL1mol/L氢氧化钠溶液（5.3）

4、于85水浴中分散10min，移入100mL容量瓶，用70mL水分数次 洗涤烧杯，洗涤液一并移入容量瓶中，加水至刻度，剧烈摇匀。 1mL此标准分散液含1mg直链淀粉。 马铃薯直链淀粉标准品的制备见附录A（补充件）。 5.8 支链淀粉标准溶液：1mg/mL 称取1000.5mg经除去蛋白质、脱脂及平衡后蜡质大米支链淀粉于100mL烧杯中，加入1.0mL无水乙醇湿润样品，再加入9.0mL1mol/L氢氧化钠溶液（5.3），于85水浴中分散，移入100mL容量瓶中，用70mL水分数次洗涤烧杯，洗涤液一并移入容量瓶中，加水至刻度，剧烈摇匀。 1mL此标准溶液含1mg支链淀粉。 蜡质大米支链淀粉标准品的制

5、备见附录B（补充件）。 6 仪器 实验室常用仪器和专用设备： 6.1 实验室用磨粉机：可将大米粉碎并通过80目筛。 6.2 筛：80目。 6.3 实验室用砻谷机。 6.4 实验室用碾米机。 6.5 分光光度计：具有1cm比色皿，可在620nm处测量吸光度。 6.6 脂肪抽提器：索氏或古氏。 6.7 容量瓶：100mL。 6.8 具塞比色管：50mL。 7 取样 按GB 5491规定执行。 8 操作步骤 页码，2/7GB/T 1568319952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156830K.htm8.1 试样制备 用粉碎机粉碎至少20粒大米样品（稻谷

6、样品应先脱壳，然后将糙米粉碎），全部通过80目筛，混匀，装入磨口广口瓶中备用。 用甲醇在索氏抽提器回流抽提试样4h（精度在标一以上的大米抽提2h），或在古氏抽提器中抽提2h（56滴/s），脱脂，将试样分散于盘中静置2d，使残余甲醇挥发及水分含量达到平衡。 8.2 称样 称取1000.5mg试样于100mL小烧杯中。 8.3 样品溶液 用移液管小心地向试样部分（8.2）中加入1.0mL无水乙醇（5.2），将粘附于杯壁上的试样全部冲下，充分湿润样品，再用移液管加入9.0mL1mol/L氢氧化钠溶液（5.3），在室温下静置1524h分散试样，或在85水浴中分散1015min，迅速冷却，移入100mL

7、容量瓶中，用70mL水洗涤烧杯34次，洗涤液一并移入容量瓶中，加水至刻度，剧烈摇匀。 8.4 试验空白 测定时同时做一试验空白，相同的操作步骤及与测定所用同量试剂，但用2. 5mL0.09mol/L氢氧化钠溶液（5.4）代替试样溶液。 8.5 校正曲线绘制 8.5.1 标准系列溶液的制备 按照下表将一定体积的直、支链淀粉标准分散液及2.0mL0.09mol/L 氢氧化钠溶液混匀。注：上述数据是在平均淀粉含量为90的大米干基基础上计算所得。 对常规分析可用预先测定了直链淀粉含量的脱脂大米代替直链淀粉分散液作校正用。 8.5.2 显色 稻米中直链淀粉含量， （干基） 混合液组成，mL直链淀粉（5.

8、7）支链淀粉（5.8）0.09mol/L氢氧化钠 （5.4）0 10.0 20.0 25.0 30.0 0 2.0 4.0 5.0 6.0 18.0 16.0 14.0 13.0 12.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 页码，3/7GB/T 1568319952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156830K.htm 准确移取2.5mL标准系列溶液于50mL比色管中，比色管中预先加入25mL水，加0.5mL1mol/L乙酸溶 液（5.5），混匀，再加入1.0mL碘试剂（5.6），加水至刻度，塞上塞子，摇匀，静置20min。 8.5.3 吸光度

9、测定 用分光光度计（6.5）将试样空白溶液调零，在620nm处测吸光度。 8.5.4 绘制校正曲线 以吸光度为纵坐标，直链淀粉含量为横坐标，绘制校正曲线。直链淀粉含量以稻米干基质量的百分率表示。 8.6 测定 8.6.1 显色 准确移取2.5mL样品溶液于盛有25mL水的50mL比色管中，依8.5.1步骤操作，先加入乙酸溶液。 8.6.2 吸光度测定 用分光光度计将试样空白溶液调零，在620nm处测吸光度。 8.7 测定次数 每一样品定容液取两份平行测定。 9 结果表示 由吸光度在校正曲线上查出相对于干基的直链淀粉的百分率表示。 以两次测定结果的算术平均值为测定结果，测定结果保留一位小数。 1

10、0 结果允许差 直链淀粉含量在10.0以上的双试验允许差不得超过1.0，直链淀粉含量在10.0以下的双试验允许差不得超过0.5。 附 录 A 马铃薯直链淀粉标准品制备方法 （补充件） A1 仪器、设备 A1.1 组织捣碎机。 A1.2 筛：80目。 页码，4/7GB/T 1568319952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156830K.htmA1.3 离心机（4000r/min）。 A1.4 冰箱。 A1.5 磁力搅拌器。 A1.6 232型甘汞电极或具有相同性能的其他型号。 A1.7 213型铂电极或具有相同性能的其他型号。 A1.8 01.00

11、0V毫伏表。 A2 试剂 除注明外，均为分析纯，水为蒸馏水。 A2.1 氢氧化钠（GB 629）：0.5mol/L溶液。 A2.2 盐酸（GB 622）：1，1.5和2mol/L溶液。 A2.3 正丁醇（HG 31012）。 A2.4 异戊醇（ZBG 63001）。 A2.5 碘酸钾标准溶液：称取0.2140g碘酸钾（GB 651，优级纯），用水溶解后转入1000mL容量瓶中，用水定容，即1.0010-4mol/L。A2.6 碘化钾溶液：称取66.40g碘化钾（GB 1272），用水稀释至1000mL，即0.4mol/L。 A3 制备方法 称取100g新鲜马铃薯，洗净，削皮，切块，放入组织捣碎

12、机中，加水200mL，捣碎1min。过80目筛，并用水洗涤筛上物，弃去筛上物，沉淀，弃去上清液。 取沉淀物，加水200mL，再加入200mL1mol/L氢氧化钠溶液，在85水浴上加热搅拌20min至完全分散，冷却，以4000r/min离心20min，取上清液用1.5mol/L盐酸溶液调至pH6.5，然后加入11（ V/V）丁醇-异戊醇80mL，在85水浴中加热10min，冷却至室温，移入冰箱内（24），静置24h，去掉上层污物层，以4000r/min离心20min，弃去上清液，沉淀物即粗直链淀粉。 用饱和正丁醇水溶液洗涤沉淀物（粗直链淀粉），4000r/min离心15min，将沉淀物转入200

13、mL饱和正丁醇水溶液中，在85水浴中加热溶解1015min，冷却至室温，移入冰箱内（24），静置24h，弃去上层污物层，以4000r/min离心10min，沉淀物再加200mL饱和正丁醇水溶液，在85水浴中加热溶解，反复纯化3次。最后沉淀物用无水乙醇反复洗涤离心34次，分散于盘中2d，使残余乙醇挥发及水分达到平衡，即得直链淀粉标准品。 A4 标准品质量测定 A4.1 碘结合量测定 A4.1.1 测定 页码，5/7GB/T 1568319952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156830K.htm 称取0.1000g标准品于100mL烧杯中，加入1.0

14、mL无水乙醇湿润样品，再加入 10mL0.5mol/L氢氧化钠溶液于85水浴中完全分散，冷却后移入100mL容量瓶中，用水洗烧杯数次，洗涤液一并移入容量瓶中，加水至刻度，摇匀。吸取5.0mL（含直链淀粉5mg）分散液放入200mL烧杯中，加入85mL水，5.0mL1mol/L乙酸溶液及5.0mL0.1mol/L碘化钾溶液，按电位滴定要求，将烧杯置于电磁搅拌器上，把铂电极及甘汞插入液面下，在电磁搅拌下，用2mL微量滴定管滴加碘酸钾标准溶液，每次滴加0.1mL（或 0.05mL），1min后读取毫伏数，滴定终点用二次微商法计算。 A4.1.2 计算 直链淀粉碘结合量=0.7610/ m（1- M）

15、 V100 A4.2 碘-淀粉复合物吸收光谱测定 称取0.1000g标准品，移入100mL烧杯中，加入1.0mL无水乙醇湿润样品，再加入9.0mL1.0mol/L氢氧化钠溶液，在85水浴中完全分散，冷却后移入100mL容量瓶中，用水洗涤烧杯数次，一并移入容量瓶中，加水至刻度，定容。取定容液2.0mL于100mL容量瓶中，移取3.0mL0.09mol/L氢氧化钠溶液，加入50mL水稀释后，再加入1.0mL1mol/L乙酸溶液和1.0mL碘试剂，加水定容至100mL，静置10min，用分光光度计测定 500800nm处的吸收光谱。 A4.3 淀粉含量测定 称取0.1000g标准品加入10mL0.5

16、mol/L氢氧化钠溶液，在85水浴中加热分散，再加入21.5mL2mol/L盐酸溶液，在沸水浴中回流水解2h，用费林氏液法（见GB 5513）测定还原糖，乘以0.9系数，即得淀粉含量，计算标准品淀粉含量。 A4.4 马铃薯直链淀粉标准品标准 马铃薯直链淀粉标准品必须具备： a.碘结合量在1920之间； b.max为640650nm；c.淀粉含量在85以上。 附 录 B 蜡质大米支链淀粉标准品的制备 （补充件） B1 制备方法 由已知至少含支链淀粉99（ m/m）的蜡质大米制备。浸泡蜡质大米在组织捣碎机中捣碎至通过80100目筛，用试剂（20g/L十二烷基硫酸钠溶液，用前加2g/L亚硫酸钠溶液）

17、或碱式中： m直链淀粉质量，mg；M直链淀粉水分含量，；V1.0010-3mol/L碘酸钾溶液滴定体积，mL；0.7610每毫升1.0010-3mol/L碘酸钾相当于碘的质量0.7610mg。 页码，6/7GB/T 1568319952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156830K.htm（3g/L氢氧化钠溶液）彻底萃取蛋白质，洗涤，然后 用甲醇在索氏抽提器中抽提4h，脱脂，将除去蛋白质和脂肪的支链淀粉分散于盘中静置2d，使残余甲醇挥发及水分含量达到平衡。 B2 标准品质量鉴定 碘-淀粉复合物吸收光谱测定 取5.8溶液5.0mL（1mg/mL支链淀粉），加50mL水稀释后，再加入1.0mL1mol/L 乙酸溶液，1mL碘试剂，加水至100mL，静置10min，用分光光度计测定400640nm的吸收光谱。 B3 蜡质大米支链淀粉标准品质量 蜡质大米支链淀粉标准品必须具备 max520530nm， 620nm在20时为17以下。页码，7/7GB/T 1568319952006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR156830K.htm