SN T 2060-2008 进出口蜂王浆中泰乐菌素残留量测定方法.酶联免疫法.pdf

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1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜进出口蜂王浆中泰乐菌素残留量测定方法酶联免疫法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋狔犾狅狊犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋犈狀狕狔犿犲犾犻狀犽犲犱犻犿犿狌狀狅狊狅狉犫犲狀狋犪狊狊犪狔发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口蜂王浆中泰乐菌素残留量测定方法酶联免疫法中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街号邮政编码：网址电话：中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本印张字数千字年月第一版年月第一次印刷印数书号：定价元书书书前言本标准的附录为资料性附录。本标

2、准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。本标准主要起草人：施伟良、张晓峰、黎昊雁、朱振江、何永强。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛犖犜进出口蜂王浆中泰乐菌素残留量测定方法酶联免疫法范围本标准规定了蜂王浆和王浆冻干粉中泰乐菌素残留量的酶联免疫测定方法。本标准适用于蜂王浆和王浆冻干粉中泰乐菌素残留量的测定。规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注

3、明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。分析实验室用水规格和试验方法（，：）方法提要本标准以酸性的庚烷磺酸钠缓冲液来提取蜂王浆中残留的泰乐菌素，沉淀王浆中蛋白后并调节至。处理后样品中残留的泰乐菌素与酶标记泰乐菌素共同竞争结合至包被在微孔板上的绵羊抗兔抗体，通过洗涤除去未结合的泰乐菌素和酶标记泰乐菌素，然后加入底物显色，用酶标仪测定吸光度，根据吸光度值得出试样中泰乐菌素的含量。试剂和材料除注明外，所有试剂均为分析纯，水为规定的一级水。泰乐菌素检测试剂盒（参见附录）。庚烷磺酸钠缓冲液：称取庚烷磺酸钠（），磷酸钠（）用水溶解并定容到，用磷酸调节至。磷酸盐缓冲液：称取磷酸钠（），用水溶解并定容到，调

4、节至。小柱，（或相当产品），（）。泰乐菌素标准品：纯度大于等于。泰乐菌素标准品溶液的配制：用甲醇作为溶剂配制成的储存液，于条件下保存。仪器和设备酶标仪。八道移液器：。单道移液器：，和。混合振荡器。高速低温离心机：。具塞试管：。电子天平：。酸度计。犛犖犜试样的制备与保存试样的制备原始样品总量不得少于，蜂王浆充分搅拌均匀后，将样品分成两等份；冻干粉采用四分法，将样品分成两等份。分好的样品装入洁净容器，加封并做标识。试样的保存将样品于条件下保存。分析步骤提取称取蜂王浆样品，置于具塞试管中，加入庚烷磺酸钠缓冲液（），充分振荡，条件下离心，取上清液于一干净试管，加入磷酸盐缓冲液（），混合均匀，调节至，此

5、溶液即可供检测用。最后样品稀释倍数为。王浆冻干粉则用水以比例稀释，充分浸泡（以上）后，称取按照上述王浆前处理方法进行提取，最后稀释倍数为。测定条件）给出该信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对某一产品操作步骤的认可。如果其他产品的操作步骤有不同，需经实验评估后采用。操作条件所有操作应在室温下（）进行，泰乐菌素试剂盒中所有试剂的温度均应回升至室温（）后方可使用。洗板条件人工洗涤次数次以上，每次加入洗涤液量为；自动洗板可以预定次。酶标仪测定条件酶标仪测定波长为。测定步骤将测定需用的微孔板备齐并插入微孔架上，记录标准品及样品等在微孔架上的位置。吸取泰乐菌素标准溶液（浓度分别为：、）于孔、；吸取样品

6、溶液于其余微孔中。吸取泰乐菌素酶标记物溶液于每一个微孔。用封口膜封孔条，并持微孔板在台面上以圆周运动方式混匀，室温（）下避光温育（温育过程中晃动振动反应板）。倒出孔中的液体，将微孔架反扣在吸水纸上反复拍打，以除去孔中过多的残液，用洗涤缓冲液洗板次。迅速加入底物溶液于每一个微孔底部，然后，持微孔板在台面上以圆周运动方式混匀后，室温（）下避光温育。迅速加入反应终止液于每一个微孔，然后，持微孔板在台面上以圆周运动方式混匀后，将微孔架置于酶标仪中，在处测量吸光度（加入反应终止液后应在内读取吸光度）。平行试验按以上步骤，对同一标准溶液、同一样品溶液均应进行平行试验测定。空白试验除不称取试样外，均按上述步

7、骤进行。犛犖犜阳性质控每次测定均应做一个添加自配泰乐菌素标准品溶液（）的监控样品。以确定实验过程的操作准确性。结果计算标准品和样品的平均值除以零标准（、）的平均值，再乘以，计算出各标准液和样品的百分比吸光度值。零标准为（最大吸光度值），其他值为最大吸光度值的百分数。以吸光度的百分比值（犅犅）为纵坐标（），泰乐菌素标准溶液浓度（）的对数值为横坐标，绘制标准工作曲线。从标准工作曲线上得到试样中相应的泰乐菌素浓度后，结果按式（）进行计算：犡犮犞犿（）式中：犡样品中泰乐菌素的残留量，单位为微克每千克（）；犮从标准工作曲线上得到的样品中泰乐菌素浓度，单位为纳克每毫升（）；犞样品溶液的最终定容体积，单位为

8、毫升（）；犿样品溶液所代表的最终试样质量，单位为克（）。也可以用各种酶标仪的数据处理软件进行计算。所得结果表示至一位小数。确证试验如被测样品中泰乐菌素残留量的值大于限量要求时，应用其他方法进行确证。本方法测定低限和回收率检测低限本方法的检测低限为。回收率本方法泰乐菌素添加浓度和回收率实验数据：添加量为时，回收率为；添加量为时，回收率为；添加量为时，回收率为。犛犖犜附录犃（资料性附录）泰乐菌素试剂盒（杭州迪恩科技有限公司产品）犃试剂盒组成犃预包被抗体的孔板：条孔。犃泰乐菌素标准溶液：。犃泰乐菌素酶标记物溶解液。犃泰乐菌素酶标记物冻干粉：根据泰乐菌素试剂盒中说明，可用酶标记物溶解液配制成泰乐菌素酶

9、标记物溶液。犃显色剂。犃稀释液：根据泰乐菌素试剂盒中说明，可用蒸馏水倍稀释后使用。犃洗涤浓缩液（倍浓缩）：可用水稀释后使用。犃反应终止液。试剂盒应在避光条件下保存。犃标准校正曲线标准校正曲线见图。狔狓犚图犃标准校正曲线）给出该信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对某一产品的认可。如果其他产品具有相同的效果，需经实验评估后使用这些等效产品。犛犖犜犉狅狉犲狑狅狉犱犜犺犲犪狀狀犲狓犃狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犻狊犪狀犻狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犪狀狀犲狓犜犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱狑犪狊狆狉狅狆狅狊犲犱犫狔犪狀犱犻狊狌狀犱犲狉狋犺犲犮犺犪狉犵犲犱狅犳犮犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犪狀犱犪犮犮狉犲犱犻狋犪狋犻狅

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14、犱狔，狑犺犻犮犺犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲狋犺犲狊狅犾犻犱狆犺犪狊犲犜犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊，狋犺犲狊犪犿狆犾犲狊犪狀犱狋犺犲犲狀狕狔犿犲犮狅狀犼狌犵犪狋犲犪狉犲犪犱犱犲犱狋狅狋犺犲犿犻犮狉狅狆犾犪狋犲狑犲犾犾狊犇狌狉犻狀犵狋犺犲犳犻狉狊狋犻狀犮狌犫犪狋犻狅狀，狋犺犲狉犲犻狊犪犮狅犿狆犲狋犻狋犻狅狀犪犿狅狀犵狋犺犲犳狉犲犲犿狅犾犲犮狌犾犲狊，犾犻犽犲狋狔犾狅狊犻狀，狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅狉狊犪犿狆犾犲狊犪狀犱狋犺犲犲狀狕狔犿犲（犲狀狕狔犿犲犮狅狀犼狌犵犪狋犲）犳狅狉狋犺犲犫犻狀犱犻狀犵狊犻狋犲狊狅犳狋犺犲犪狀狋犻狋狔犾狅狊犻狀犪狀狋犻犫狅犱狔犪犱狊狅狉犫犲犱狋狅狋犺犲狊狅犾犻犱狆犺犪狊犲犃犳狋犲

15、狉狋犺犲狑犪狊犺犻狀犵狊狋犲狆，犪狀狔狌狀犫狅狌狀犱犿狅犾犲犮狌犾犲犻狊狉犲犿狅狏犲犱犜犺犲犫狅狌狀犱犲狀狕狔犿犲犪犮狋犻狏犻狋狔犻狊犱犲狋犲狉犿犻狀犲犱犫狔犪犱犱犻狀犵犪狀犪犿狅狌狀狋狅犳犮犺狉狅犿狅犵犲狀狊狌犫狊狋狉犪狋犲犜犺犲犲狀狕狔犿犲犮狅狀狏犲狉狋狊狋犺犲犮狅犾狅狉犾犲狊狊犮犺狉狅犿狅犵犲狀犻狀狋狅犪犮狅犾狅狉犲犱（犫犾狌犲）狆狉狅犱狌犮狋犜犺犲犪犱犱犻狋犻狅狀狅犳狋犺犲狊狋狅狆狉犲犪犵犲狀狋犾犲犪犱狊狋狅犪犮狅犾狅狉犮犺犪狀犵犲犳狉狅犿犫犾狌犲狋狅狔犲犾犾狅狑犜犺犲犪犫狊狅狉犫犪狀犮犲，犿犲犪狊狌狉犲犱犫狔犪犿犻犮狉狅狆犾犪狋犲狉犲犪犱犲狉（狀犿），犻狊犻狀狏犲狉狊犲犾狔狆狉狅狆狅

16、狉狋犻狅狀犪犾狋狅狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狅犳犮狅狉狋犻犮狅狊狋犲狉狅犻犱狊犻狀狋犺犲狊犪犿狆犾犲犚犲犪犵犲狀狋狊犪狀犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犝狀犾犲狊狊狅狋犺犲狉狑犻狊犲狊狆犲犮犻犳犻犲犱，犪犾犾狋犺犲犮犺犲犿犻犮犪犾狉犲犪犵犲狀狋狊狊犺狅狌犾犱犫犲犃犚犵狉犪犱犲狑犪狋犲狉犻狊狋犺犲犳犻狉狊狋犵狉犪犱犲犛犖犜狑犪犲狉狆狉犲狊犮狉犻犽犲犱犻狀犌犅犜犈狀狕狔犿犲犻犿犿狌狀狅犪狊狊犪狔犽犻狋犳狅狉狋犺犲狇狌犪狀狋犻狋犪狋犻狏犲犪狀犪犾狔狊犻狊狅犳狋狔犾狅狊犻狀狊犲犲犪狀狀犲狓犃犎犲狆狋犪狀犲狊狌犾犳狅狀犻犮犪犮犻犱狊狅犱犻狌犿狊犪犾狋犫狌犳犳犲狉狊：犠犲犻犵犺犎犲狆狋犪狀犲狊狌犾犳狅狀犻犮犪犮

17、犻犱狊狅犱犻狌犿狊犪犾狋犆犎（犆犎）犛犗犖犪犵犪狀犱犖犪犘犗犎犗犵，犱犻狊狊狅犾狏犲狑犻狋犺狑犪狋犲狉狋狅狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀狅犳犔，犪犱犼狌狊狋狆犎狋狅狌狊犻狀犵犎犘犗犘犺狅狊狆犺犪狋犲犫狌犳犳犲狉：犠犲犻犵犺犵犖犪犎犘犗犎犗，犱犻狊狊狅犾狏犲犻狀犔狑犪狋犲狉，犪犱犼狌狊狋狆犎狋狅犎犔犅犮狅犾狌犿狀狊：犗犪狊犻狊，犿犔（犿犵）犜狔犾狅狊犻狀狊狋犪狀犱犪狉犱（犔狔狅狆犺犻犾犻狕犲犱）：犘狌狉犻狋狔犜犺犲狆狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀狅犳狋狔犾狅狊犻狀狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀（犵犿犔）：狊狋狅狉犲狊犪犿狆犾犲犪狋犃狆狆犪狉犪狋狌狊犪狀犱犲狇狌犻狆犿犲狀狋犈犔犐犛犃狉犲犪犱犲狉犲狇狌犻

18、狆狆犲犱狑犻狋犺犪狀犿犳犻犾狋犲狉犔犔犿狌犾狋犻犮犺犪狀狀犲犾犿犻犮狉狅狆犻狆犲狋狋犲狑犻狋犺狊狌犻狋犪犫犾犲狋犻狆狊狏犪狉犻犪犫犾犲狏狅犾狌犿犲狆狉犲犮犻狊犻狅狀犿犻犮狉狅狆犻狆犲狋狋犲狑犻狋犺狊狌犻狋犪犫犾犲狋犻狆狊：犔犔，犔犔犪狀犱犿犔犿犔犛犪犽犲狉狏狅狋犲狓犆犲狀狋狉犻犳狌犵犲：狉犿犻狀犜犲狊狋狋狌犫犲狑犻狋犺狆犾狌犵：犿犔犈犾犲犮狋狉狅狀犻犮犫犪犾犪狀犮犲：犵犵狆犎犿犲狋犲狉犘狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀犪狀犱狊狋狅狉犪犵犲狅犳狊犪犿狆犾犲犘狉犲狆犪狉犪狋犻狅狀狅犳狊犪犿狆犾犲犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犜犺犲狑犺狅犾犲狆狉犻犿犪狉狔狊犪犿狆犾犲狊犺狅狌犾犱犫犲犿狅狉犲狋犺犪狀犵犉狅狉狉狅狔犪犾犼犲

19、犾犾狔狊犪犿狆犾犲狊：犇犻狏犻犱犲犻狋犻狀狋狅狋狑狅犲狇狌犪犾狆犪狉狋狊犪犳狋犲狉犿犻狓狑犲犾犾犉狅狉狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔狆狅狑犱犲狉狊犪犿狆犾犲狊：犇犻狏犻犱犲犻狋犻狀狋狅狋狑狅犲狇狌犪犾狆犪狉狋狊犫狔狇狌犪狉狋犪狋犻狅狀犜犺犲狀犽犲犲狆狋犺犲狆狉犲狆犪狉犲犱狊犪犿狆犾犲犻狀狋狅狋狑狅狊犪犿狆犾犲犫狅狋狋犾犲狊，狊犲犪犾犪狀犱犾犪犫犲犾犛犖犜犛狋狅狉犪犵犲狅犳狊犪犿狆犾犲犛狋狅狉犲狊犪犿狆犾犲犪狋犃狀犪犾狔狊犻狊狆狉狅犮犲犱狌狉犲犈狓狋狉犪犮狋犻狅狀犘狉狅犮犲犱狌狉犲犠犲犻犵犺狋犵狊犪犿狆犾犲狅犳犺狅犿狅犵犲狀犻狕犲犱狋犻狊狊狌犲狋狅犿犔狋犲狊狋狋狌犫犲犃犱犱犿犔犎犲狆狋犪狀犲狊狌犾犳狅狀犻

20、犮犪犮犻犱狊狅犱犻狌犿狊犪犾狋犫狌犳犳犲狉狊（）犆犲狀狋狉犻犳狌犵犲狉犿犻狀犪狋犳狅狉犿犻狀犘狌狋犿犔狊狌狆犲狉狀犪狋犲狀狋犻狀狋狅犪犮犾犲犪狀狋狌犫犲，犪犱犱犿犔狆犺狅狊狆犺犪狋犲犫狌犳犳犲狉（），犪犳狋犲狉狏狅狉狋犲狓犻狀犵，犪犱犼狌狊狋狆犎狋狅犪狀犱犻狋狊狉犲犪犱狔犳狅狉犈犔犐犛犃犪狊狊犪狔犉狅狉狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔狆狅狑犱犲狉，犻狋狊犺狅狌犾犱犫犲犱犻狆犻狀狑犪狋犲狉（）犪狋犾犲犪狊狋犺，狋犺犲狀狑犲犻犵犺犵犳狅狉犲狓狋狉犪犮狋犻狅狀犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犿犲狋犺狅犱犜犲狊狋犮狅狀犱犻狋犻狅狀）犗狆犲狉犪狋犻狅狀犮狅狀犱犻狋犻狅狀）犜犺犲犻狀犳狅狉犿犪狋犻狅狀狊狌狆

21、狆犾狔犻狀犵犺犲狉犲犻狀犻狊犼狌狊狋犳狅狉狋犺犲犮狅狀狏犲狀犻犲狀犮犲狌狊犪犵犲犳狅狉狋犺犲狌狊犲狉狊狅犳狋犺犻狊狊狋犪狀犱犪狉犱犪狀犱狀狅狋犳狅狉狊狅犿犲犮犲狉狋犪犻狀狆狉狅犱狌犮狋狊犪狌狋犺狅狉犻狕犪狋犻狅狀犪狀犪犾狔狊犻狊狆狉狅犮犲犱狌狉犲犜犺犲狋犲狊狋犻狀犵狆狉狅犮犲狊狊狅犳犪狀狅狋犺犲狉犲狇狌犪犾犽犻狋狊犿犪狔犫犲犱犻犳犳犲狉，狊狅犻狋狊犺狅狌犾犱犫犲狌狊犲犱犪犳狋狋犲狊狋犻狀犵，犲狏犪犾狌狋犻狅狀犪狀犱狏犲狉犻犳犻犮犪狋犻狅狀犃犾犾狋犺犲狅狆犲狉犪狋犻狅狀狊犺狅狌犾犱犫犲犱狅狀犲犪狋狉狅狅犿狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲（）犜犺犲狉犲犪犵犲狀狋狊狊犺狅狌犾犱犫犲犫狉狅狌犵犺犲狌狆狋狅犪犿犫

22、犻犲狀狋狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲（）犫犲犳狅狉犲狊狋犪狉狋犻狀犵狋犺犲狋犲狊狋犜犺犲狑狅狉犽犮狅狀犱犻狋犻狅狀狅犳狑犪狊犺犿犪犮犺犻狀犲犕犪狀狌犪犾狑狅狉犽：犃犾犾狋犺犲狑犲犾犾狊犿狌狊狋犫犲狑犪狊犺犲犱犿犪狀狌犪犾犾狔犿狅狉犲狋犺犪狀狋犻犿犲狊犈犪犮犺狋犻犿犲犻狀犼犲犮狋犔狑犪狊犺狊狅犾狌狋犻狅狀狑犻狋犺犿狌犾狋犻犮犺犪狀狀犲犾犿犻犮狉狅狆犻狆犲狋狋犲犃狌狋狅犿犪狋犻狊犿狑狅狉犽：犃犾犾狋犺犲狑犲犾犾狊狊犺狅狌犾犱犫犲狑犪狊犺犲犱狋犻犿犲狊犫狔狋犺犲狑犪狊犺犿犪犮犺犻狀犲犜犺犲狑狅狉犽犮狅狀犱犻狋犻狅狀狅犳犿犻犮狉狅狆犾犪狋犲狉犲犪犱犲狉犜犺犲犿犻犮狉狅狆犾犪狋犲狉犲犪犱犲狉狊犺狅狌犾犱犫犲狌

23、狊犲犱犪狋犪狀犿犳犻犾狋犲狉犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犘狉犲犱犲狋犲狉犿犻狀犲犪狀犪狊狊犪狔犾犪狔狅狌狋，狉犲犮狅狉犱犻狀犵犫犾犪狀犽，狊狋犪狀犱犪狉犱犪狀犱狊犪犿狆犾犲狆狅狊犻狋犻狅狀狊，狋犪犽犻狀犵犻狀狋狅犪犮犮狅狌狀狋狋犺犪狋犪犾犾犺犪狏犲狋狅犫犲狉狌狀犻狀犱狌狆犾犻犮犪狋犲犃犱犱犔狅犳狊犪犿狆犾犲犱犻犾狌狋犻狅狀犫狌犳犳犲狉犻狀狋狅狋犺犲犕犪狓犻犿狌犿犅犻狀犱犻狀犵狑犲犾犾狊；犃犱犱犔狅犳犲犪犮犺狊狋犪狀犱犪狉犱（、狀犵犿犔）犻狀狋狅狋犺犲犪狊狊犻犵狀犲犱狊狋犪狀犱犪狉犱狑犲犾犾狊（犃、犃犎、犎）；犃犱犱犔狅犳犲犪犮犺狊犪犿狆犾犲犻狀狋狅狋犺犲狊犪犿狆犾犲狑犲犾犾狊犛犖犜犃犱犱犔狅犳犮

24、狅狀犼狌犵犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀犻狀犪犾犾狑犲犾犾狊，狌狊犻狀犵狋犺犲犿狌犾狋犻犮犺犪狀狀犲犾犿犻犮狉狅狆犻狆犲狋狋犲犛犲犪犾狋犺犲犿犻犮狉狅狋犻狋狉犲狆犾犪狋犲犪狀犱狊犺犪犽犲狋犺犲狆犾犪狋犲犵犲狀狋犾狔狑犻狋犺狉狅狋犪狋犻狀犵犿狅狋犻狅狀犳狅狉犳犲狑狊犲犮狅狀犱狊狅狉狋犪狆狋犺犲狊犻犱犲狅犳狋犺犲犿犻犮狉狅狆犾犪狋犲犳狉犪犿犲狅狉狋犻犿犲狊狋狅犿犻狓犐狀犮狌犫犪狋犲犿犻狀犪狋狉狅狅犿狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲（）犜犪狆狆犻狀犵狋犺犲狆犾犪狋犲狋狅犿犻狓狊犺狅狌犾犱犫犲狆犲狉犳狅狉犿犲犱狋狅狋犻犿犲狊狑犻狋犺犻狀狋犺犲犻狀犮狌犫犪狋犻狅狀犘狅狌狉狋犺犲犾犻狇狌犻犱狅狌狋狅犳狋犺犲狑犲犾犾狊；狉犲

25、犿狅狏犲狋犺犲狉犲犿犪犻狀犻狀犵犱狉狅狆犾犲狋狊犫狔狋犪狆狆犻狀犵狋犺犲犿犻犮狉狅狆犾犪狋犲狌狆狊犻犱犲犱狅狑狀狏犻犵狅狉狅狌狊犾狔犪犵犪犻狀狊狋犪犫狊狅狉犫犲狀狋狆犪狆犲狉；狑犪狊犺狋犺犲犿犻犮狉狅狆犾犪狋犲犳狅犾犾狅狑犻狀犵狋犺犲犮狅狀犱犻狋犻狅狀狅犳犝狊犻狀犵狋犺犲犿狌犾狋犻犮犺犪狀狀犲犾犿犻犮狉狅狆犻狆犲狋狋犲，犪犱犱犔狅犳狊狌犫狊狋狉犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀犻狀狋狅犪犾犾狑犲犾犾狊犪狀犱犿犻狓狋犺狅狉狅狌犵犺犾狔狑犻狋犺狉狅狋犪狋犻狀犵犿狅狋犻狅狀犳狅狉犳犲狑狊犲犮狅狀犱狊狅狉狋犪狆狋犺犲狊犻犱犲狅犳狋犺犲犿犻犮狉狅狆犾犪狋犲犳狉犪犿犲狅狉狋犻犿犲狊狋狅犿犻狓；犐狀犮狌犫犪狋犲犳狅狉犿

26、犻狀犪狋狉狅狅犿狋犲犿狆犲狉犪狋狌狉犲（）犃犱犱犔狅犳狊狋狅狆狊狅犾狌狋犻狅狀狋狅犲犪犮犺狑犲犾犾犪狀犱犿犻狓狋犺狅狉狅狌犵犺犾狔狑犻狋犺狉狅狋犪狋狅狉狔犿狅狋犻狅狀犳狅狉犳犲狑狊犲犮狅狀犱狊；犿犲犪狊狌狉犲狋犺犲犪犫狊狅狉犫犪狀犮犲犪狋狀犿犚犲犪犱狑犻狋犺犻狀犿犻狀狌狋犲狊犘犪狉犪犾犾犲犾狋犲狊狋犉狅犾犾狅狑犻狀犵狋犺犲犪犫狅狏犲狊狋犲狆狊，狋犺犲狊犪犿犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊犪狀犱狊犪犿狆犾犲狊狅犾狌狋犻狅狀狊犪犾狊狅狊犺狅狌犾犱犫犲犿犲犪狊狌狉犲犱犪狋狋犺犲狊犪犿犲狋犻犿犲犳狅狉狆犪狉犪犾犾犲犾狋犲狊狋犅犾犪狀犽狋犲狊狋犜犺犲狋犲狊狋狊犺狅狌犾犱犫犲犱狅狀犲犳狅犾犾狅狑犻狀犵狋犺犲犪犫狅狏犲

27、狊狋犲狆狊犲狓犮犲狆狋犳狅狉犪犱犱犻狀犵狊犪犿狆犾犲狊犘狅狊犻狋犻狏犲犿狅狀犻狋狅狉犻狀犵犃狀犪犾狔狕犲犪狉犲犮狅狏犲狉犻犲狊犳狅狉狋犻犳犻犲犱犪狋犿犪狓犻犿狌犿狉犲狊犻犱狌犲犾犻犿犻狋（犕犚犔）犾犲狏犲犾狌狊犻狀犵犫犾犪狀犽狊犪犿狆犾犲犲犪犮犺狋犲狊狋犆犪犾犮狌犾犪狋犻狀犵狋犺犲狉犲狊狌犾狋犜犺犲犗犇狏犪犾狌犲狊狅犳狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狊犪狀犱狋犺犲狊犪犿狆犾犲狊（犿犲犪狀狏犪犾狌犲狊狅犳狋犺犲犱狌狆犾犻犮犪狋犲狊）犪狉犲犱犻狏犻犱犲犱犫狔狋犺犲犿犲犪狀犗犇狏犪犾狌犲狅犳狋犺犲狕犲狉狅狊狋犪狀犱犪狉犱（狑犲犾犾狊犃犪狀犱犃）犪狀犱犿狌犾狋犻狆犾狔犫狔（犅犅）；狋犺犲狕犲狉狅狊狋犪狀犱犪狉犱

28、犻狊狋犺狌狊犿犪犱犲犲狇狌犪犾狋狅（犿犪狓犻犿犪犾犪犫狊狅狉犫犪狀犮犲）犪狀犱狋犺犲狅狋犺犲狉犗犇狏犪犾狌犲狊犪狉犲狇狌狅狋犲犱犻狀狆犲狉犮犲狀狋犪犵犲狊狅犳狋犺犲犿犪狓犻犿犪犾犪犫狊狅狉犫犪狀犮犲犈狀狋犲狉狋犺犲犅犅狏犪犾狌犲狊犮犪犾犮狌犾犪狋犲犱犳狅狉犲犪犮犺狊狋犪狀犱犪狉犱犻狀犪狊犲犿犻犾狅犵犪狉犻狋犺犿犻犮狊狔狊狋犲犿狅犳犮狅狅狉犱犻狀犪狋犲狊犪犵犪犻狀狊狋狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱狋狔犾狅狊犻狀犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀；犱狉犪狑狋犺犲狊狋犪狀犱犪狉犱犮狌狉狏犲；犐狀狋犲狉狆狅犾犪狋犲狋犺犲犮狅狉狉犲狊狆狅狀犱犻狀犵犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀犳狉狅犿狋犺犲犮犪犾犻犫狉犪狋犻狅狀犮狌狉狏犲

29、；犆犪犾犮狌犾犪狋犲狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳狋狔犾狅狊犻狀犻狀狋犺犲狊犪犿狆犾犲狊犪犮犮狅狉犱犻狀犵狋狅犳狅狉犿狌犾犪（）：犡犮犞犿（）犛犖犜狑犺犲狉犲犡狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳狋狔犾狅狊犻狀犻狀狋犺犲狊犪犿狆犾犲狊狌狀犻狋犻狀犵犽犵；犮狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊犵狅狋狋犲狀犳狉狅犿狋犺犲狊犲犿犻犾狅犵犪狉犻狋犺犿犻犮狊狔狊狋犲犿狅犳犮狅狅狉犱犻狀犪狋犲狊狌狀犻狋犻狀狀犵犿犔；犞狋犺犲犳犻狀犪犾狏狅犾狌犿犲狅犳狋犺犲狊犪犿狆犾犲狊狅犾狌狋犻狅狀狌狀犻狋犻狀犿犔；犿狋犺犲犳犻狀犪犾狊犪犿狆犾犲狑犲犻犵犺狋狅犳狋犺犲狊犪犿狆犾犲狊狅犾狌狋犻狅狀狌狀犻狋犻狀犵犗狋

30、犺犲狉犱犪狋犪狆狉狅犮犲狊狊犻狀犵狊狅犳狋狑犪狉犲犮犪狀犪犾狊狅犫犲狌狊犲犱狋狅犮犪犾犮狌犾犪狋犲狋犺犲犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳狋狔犾狅狊犻狀犜犺犲狉犲狊狌犾狋狊犻狀犱犻犮犪狋犲狋狅狅狀犲犱犲犮犻犿犪犾犆狅狀犳犻狉犿犪狋狅狉狔犜犲狊狋犐犳狊犪犿狆犾犲狉犲狊狌犾狋狅狏犲狉犕犚犔，犻狋狊犺狅狌犾犱犫犲犮狅狀犳犻狉犿犲犱狑犻狋犺犮狅狀犳犻狉犿犪狋犻狅狀犿犲狋犺狅犱犔犻犿犻狋狅犳犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犪狀犱狉犲犮狅狏犲狉狔犔犻犿犻狋狅犳犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀犜犺犲犾犻犿犻狋狅犳犱犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狋犺犲犿犲狋犺狅犱犳狅狉狋狔犾狅狊犻狀犻狊犵犽犵狉犲犮狅狏犲狉狔犜犺犲犲狓狆犲狉

31、犻犿犲狀狋犪犾犱犪狋犪狅犳狋犺犻狊犳狅狉狋犻犳狔犻狀犵犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犻狅狀狊狅犳狋狔犾狅狊犻狀犪狀犱狉犲犮狅狏犲狉犻犲狊犪狉犲犪狊犳狅犾犾狅狑狊：狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔：犃狋犵犽犵，狋犺犲犪狏犲狉犪犵犲狉犲犮狅狏犲狉狔犻狊；犃狋犵犽犵，狋犺犲犪狏犲狉犪犵犲狉犲犮狅狏犲狉狔犻狊；犃狋犵犽犵，狋犺犲犪狏犲狉犪犵犲狉犲犮狅狏犲狉狔犻狊犛犖犜犃狀狀犲狓犃（犐狀犳狅狉犿犪狋犻狏犲犃狀狀犲狓）狋狔犾狅狊犻狀犈犐犃）犃犆狅狀狊狋犻狋狌狋犲狊狅犳犽犻狋）犜犺犲犻狀犳狅狉犿犪狋犻狅狀狊狌狆狆犾狔犻狀犵犺犲狉犲犻狀犻狊犼狌狊狋犳狅狉狋犺犲犮狅狀狏犲狀犻犲狀犮犲狌狊犪犵犲犳狅狉狋犺犲狌狊犲狉狊狅犳狋犺犻狊狊狋犪

32、狀犱犪狉犱犪狀犱狀狅狋犳狅狉狊狅犿犲犮犲狉狋犪犻狀狆狉狅犱狌犮狋狊犪狌狋犺狅狉犻狕犪狋犻狅狀犜犺犲狋犲狊狋犻狀犵狆狉狅犮犲狊狊狅犳犪狀狅狋犺犲狉犲狇狌犻狏犪犾犲狀狋犽犻狋狊犿犪狔犫犲犱犻犳犳犲狉，狊狅犻狋狊犺狅狌犾犱犫犲狌狊犲犱犪犳狋狋犲狊狋犻狀犵，犲狏犪犾狌犪狋犻狅狀犪狀犱狏犲狉犻犳犻犮犪狋犻狅狀犃犛犲犪犾犲犱犿犻犮狉狅狋犻狋狉犲狆犾犪狋犲（狊狋狉犻狆狊，狑犲犾犾狊犲犪犮犺），犮狅犪狋犲犱狑犻狋犺犪狀狋犻犫狅犱犻犲狊犚犲犪犱狔狋狅狌狊犲犃犜狔犾狅狊犻狀狊狋犪狀犱犪狉犱狊狅犾狌狋犻狅狀：狀犵犿犔犃犆狅狀犼狌犵犪狋犲犱犻犾狌狋犻狅狀犫狌犳犳犲狉犃犆狅狀犼狌犵犪狋犲（犐狔狅狆犺犻犾犻狊犲犱）：犐狋

33、犮犪狀犫犲狉犲犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲犱犫狔犮狅狀犼狌犵犪狋犲犱犻犾狌狋犻狅狀犫狌犳犳犲狉狆狉狅狏犻犱犲犱狑犻狋犺狋犺犲犽犻狋犃犛狌犫狊狋狉犪狋犲狊狅犾狌狋犻狅狀犃犛犪犿狆犾犲犱犻犾狌狋犻狅狀犫狌犳犳犲狉（犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犱）犃犚犻狀狊犻狀犵犫狌犳犳犲狉（犮狅狀犮犲狀狋狉犪狋犲犱）犃犛狋狅狆狊狅犾狌狋犻狅狀犚犲犿犪狉犽：犜犺犲犽犻狋狊犺狅狌犾犱犫犲狊狋狅狉犲犱狑犻狋犺犻狀狅狌狋狅犳犳犾犻犵犺狋犜犺犲狉犲犮狅狀狊狋犻狋狌狋犲犱犲狀狕狔犿犲犮狅狀犼狌犵犪狋犲犮犪狀犽犲犲狆犪犮狋犻狏犲犻狀犾狅狀犵狋犲狉犿狅狀犾狔狑犺犲狀狊狋狅狉犲犱犪狋犃犛狋犪狀犱犪狉犱犮狌狉狏犲狅犳狋犺犲犽犻狋犛狋犪狀犱犪狉犱犮狌狉狏犲狊犲犲犳犻犵狌狉犲犃犛犖犜书书书犉犻犵狌狉犲犃犛狋犪狀犱犪狉犱犆狌狉狏犲犛犖犜狔狓犚犜犖犛书号：定价：元