DB44 T 2388-2022 水稻品种(系)稻瘟病室内和田间抗性鉴定与评价技术规范.pdf
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1、 ICS 65.020 CCS B 15 44 广东省 地方标准 DB44/T 23882022 水稻品种(系)稻瘟 病室内和 田间抗性 鉴定与评价技 术规范 Technical Specification for Identification and Evaluation of Rice Blast Resistance in Greenhouse and Field 2022-08-15 发布 2022-11-15 实施 广东省市 场监督 管 理局 发 布 DB44/T 23882022 I 目 次 前言.II 1 范围.1 2 规范性 引用 文件.1 3 术语和 定义.1 3.1 病原
2、物(稻瘟 病菌).1 3.2 寄主 植物(水 稻).1 3.3 鉴定 方法.2 4 鉴定方 法.2 4.1 室内 苗期 叶瘟 抗性 鉴定.2 4.2 田间 成株 期穗 瘟抗 性鉴定.4 5 抗性综 合评 价.5 5.1 抗性 综合 评价 依据.5 5.2 抗性 综合 评价 标准.6 5.3 抗性 鉴定 数据 有效 性判别.6 6 鉴定材 料的 处理.6 6.1 室内 人工 接种 材料 的处理.6 6.2 田间 自然 诱发 病圃 材料的处 理.6 7 汇总报 告格 式.6 7.1 试验 概况.6 7.2 结果 与分 析.7 附录A(规 范性)稻瘟 病田间 病圃 水稻 材料 插植布局.8 附录B(
3、规 范性)水稻 品种(系)稻瘟 病抗 性鉴 定与评 价数 据汇 总格 式.9 附录C(资 料性)稻瘟 病病情 调查 记录 与田 间病 圃管理 记录.10 参考文 献.12 DB44/T 23882022 II 前 言 本文件 按照GB/T 1.12020 标准 化工 作导则 第1 部分:标准化 文件 的结构 和起草 规则 的规 定起草。本文件 由广 东省 农业 农村 厅提出 并组 织实 施。本文件 由广 东省 种植 业标 准化技 术委 员会(GD/TC 48)归口。本文件 起草 单位:广 东省 农业科 学院 植物 保护 研究 所。本文件 主要 起草 人:杨健 源、汪 文娟、朱 小源、苏 菁、李
4、 传瑛、韦 小燕、陈 凯玲、封金 琦、陈炳。DB44/T 23882022 1 水 稻品种(系)稻 瘟病室 内和田间 抗性鉴 定与评价 技术规 范 1 范围 本文件 规定 了水 稻品 种(系)稻瘟病 室内 和田 间抗 性鉴定 与评 价方 法的 术语 和定义、鉴定方 法、内容及时 期、调查 方法、抗 性综合 评价 和汇 总报 告格 式。本文件 适用 于我 省省 级水 稻品种 稻瘟 病抗 病性 鉴定 与评价 试验,包 括在 属于 华南早 籼类 型区、华 南感光晚 籼类 型区 的水 稻品 种同一 适宜 生态 区进 行的 区试、绿色 通道、联 合体 及 引种等 试验。水 稻品 种(系)的抗病 性比 较
5、、主导 品种 的抗病 性监 测及 抗病 资源 的筛选 等试 验可 参照 执行。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中,注日 期的 引用 文件,仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件;不注 日期 的引 用文件,其 最新 版本(包 括所有 的修 改单)适 用 于 本文件。NY/T 2646-2014 水 稻品 种试验 稻瘟 病抗 性鉴 定与 评价技 术规 程 3 术语和 定义 下列术 语和 定义 适用 于本 文件。3.1 病原物(稻 瘟病 菌)3.1.1 稻瘟病 rice blast 由无性 型真 菌稻 梨孢(无
6、 性代:Pyricularia oryzae;有 性代:Magnaporthe oryzae)所 致的 水稻病害。主要 包括 叶瘟、穗 瘟。3.1.1.1 叶瘟 leaf blast 水稻三 叶期 后至 分蘖 盛期,稻苗叶 片上 发生 的稻 瘟病,病菌侵 染叶 片引 起圆 形、椭 圆形或 梭型 病 斑,严重时 使植 株枯 死。3.1.1.2 穗瘟 panicle blast 水稻抽 穗后 至成 熟期,穗 颈、枝 梗和 谷粒 发生 的稻 瘟病,病菌 侵染 稻穗 致白 穗,或 增加 空秕 率,降低千粒 重。3.1.2 接种体 inoculum 接种体 指用 于人 工接 种鉴 定用的 稻瘟 病菌 的
7、分 生孢 子悬浮 液。接种体 适用 范围 为根 据7 个 中国鉴 别品 种划 分的ZA、ZB、ZC、ZD、ZE、ZF、ZG 群 小种。来源:参 见全 国稻 瘟病 生理小种 联合 试验 组论 文 3.2 寄主植 物(水稻)3.2.1 DB44/T 23882022 2 试验品 种(系)testing variety(line)抗病性 鉴定 参试 的水 稻品 种(系)。3.2.2 感病对 照品 种 susceptible control variety 抗病性 鉴定 时选 定的 当地 相应熟 期感 病品 种。3.2.3 诱发品 种 disease spreader variety 在试验 品种(系
8、)和 感病 对照品 种四 周种 植的 用于 诱发稻 瘟病 发生 的当 地相 应熟期 高感 品种。3.2.4 鉴别品 种 differential variety 中国稻 瘟病联 合试 验组筛 选出的7 个品 种:Tetep、珍龙13、四丰43、东农363、关东51、合 江18、和丽江 新团 黑谷。用 于鉴 别与监 测稻 瘟病 菌小 种群 及其变 化的 一组 水稻 品种。来源:参 见全 国稻 瘟病 生理小种 联合 试验 组论 文 3.3 鉴定方 法 3.3.1 抗性鉴 定 resistance identification 在水稻 生长 发育 阶段,通 过室内 人工 接种、田间 病 圃自然 诱发
9、 等方 法感 染稻 瘟病菌,以确 定水 稻试验品种(系)对 稻瘟 病菌 的抗感 反应 类型。3.3.1.1 室内人 工接 种 greenhouse artificial inoculation 通过人工控 制适 宜的 发病 条件,在温 室内 用接 种体 进行水 稻苗 期叶 片人 工喷 雾接种。可不受 田间条件和季 节的 限制,常 年进 行试验。3.3.1.2 田间自 然诱 发病 圃 natural blast nursery 在稻瘟 病常 发、重发 区设 立 的通过 田间 自然 诱发 方式 进行水 稻苗 期和 成株 期稻 瘟病抗 病性 评价 的 鉴定圃。与病 圃当 地水 稻生 产同期 进行。鉴
10、定结 果能 较准确 反映 当地 当时 的实 际情况,但对气 候、季节依赖性强。3.3.2 鉴定年 限 years of evaluation 根据试 验目 的应 达到 的最 低生产 周期 要求。3.3.2.1 省级品 种(系)试验 年限 years of provincial testing variety(line)应为与 区域 试验 同步 进行 的两个 正季 生产 周期。3.3.2.2 其它品 种(系)试验 年限 years of non-provincial testing variety(line)不做具 体要 求,可根 据抗 性鉴定 目的 参照 进行 试验。4 鉴定方 法 4.1 室
11、内苗 期叶 瘟抗 性鉴 定 4.1.1 采用室 内人工 接种 方法对 参试材 料进行 水稻 苗期叶 瘟接种,创造 并保 持适宜 的发病 条件待 其 充分发病,然 后据 其对 接种 菌株的 抗性 频率 确定 品种(系)的抗 性强 弱,简称 抗谱鉴 定。DB44/T 23882022 3 4.1.1.1 对收集 的稻 瘟病 菌单 孢进 行小种 鉴定 及归 类。4.1.1.2 根据广 东稻 作区 稻瘟 病菌 小种发 生比 例,选用 不少 于60 个有 代表 性的 单孢 分离菌株 作为 接种体进行 试验。4.1.1.3 年度间 接种 的菌 株与 小种 比例,应根 据田 间小 种群 体变化 情况 作动
12、态调 整。4.1.1.4 每个菌 株应 按均 一孢 子量 进行单 独接 种。4.1.2 接种体 制备 4.1.2.1 将单孢 分离 菌株 在酵 母淀 粉培养 基(酵母 浸 膏 2 g,可溶 性淀 粉 10 g,琼脂 15 g20 g,蒸馏水 1000 ml)试管 里培 养 7 d 10 d,挑取 直径 为 2 mm 的菌丝 块,转接 到玉米 粒培 养基 上扩大培养10 d13 d,待菌 丝长满 玉米粒,用无 菌水 洗去玉 米粒表 面的菌 丝,将玉米 粒薄铺 于消毒 的搪 瓷盘 中,上面覆 盖 1 层湿 纱布,在 日光灯 下光 照培 养 3 d4 d。用 无菌 水洗 下附 在玉 米粒上 的孢 子
13、,用 2 层塑料细纱 网隔 去玉 米残 渣,即 为分生 孢子 悬浮 液接 种体。以上菌 株培 养及 产孢 均 在26 28 下 进行。4.1.2.2 在光学 显微镜 下观 察产孢 情况,用血球 计数 板测定 孢子浓 度,用 无菌 水将孢 子悬浮 液浓 度 调节至 约 2105 个孢 子/ml,作为 苗期 喷雾 接种 的接 种体。4.1.2.3 接种体 应现 配现 用。4.1.3 水稻苗 准备 4.1.3.1 参试材 料经 浸种、催 芽后,每个 材料 选取 发芽 良好 的种子 15 粒20 粒,按顺序分 别穴 播于盛有肥 沃土 壤的 育苗 盆内,穴间 距 为 3 cm 左右;浇水盖土,保 证正
14、常出 苗生 长。幼 苗应 生长 健壮、一致。接 种前 3 d 5 d 酌施氮肥,保持 稻苗 嫩绿 以利 于发病。4.1.3.2 试验 设 2 次重 复,均为 随 机排列。每 盆中 分别 设抗 感对照 各1 个,通 常感 病对照品 种是 广陆矮4 号,抗 病对 照品 种是 三黄 占 2 号。4.1.3.3 同时播 种相应 接种 菌株数 量的鉴 别品种 一套,供每 个接种 菌株同 时接 种,作 为本次 接种 菌 株小种号 的验 证试 验。4.1.4 稻苗喷 雾接 种 4.1.4.1 用单菌 株接 种。4.1.4.2 参试材 料生 长至 3 叶4 叶期时 移至 25 28 温室 0.5 d 后进行
15、接菌。按 0.8%的体积 比浓度在 接种 体中 加入 吐温20(Tween20),混 匀后 进行 喷雾 接种。用 高压 弥雾(压力:2.0 Pa,雾滴 的体积中 值直径 50 m100 m)喷雾 器将 接种体 喷洒于 稻苗上,接 种量以 所有叶 片上布 满孢 子液 为限。4.1.4.3 接种后 置于 25 28 的温室 内,保持 相对 湿度95%以上遮 光保 湿 24 h;然后去除 遮光 条件,每 天定 时喷 雾清 水3 次4 次保 湿,让稻 苗充 分发病。4.1.5 叶瘟病 情调 查 4.1.5.1 调查时 间、部位 4.1.5.1.1 调查时 间。接种 后 7 d 10 d。当感 病对 照
16、品 种的 发病程度 大于 等于 7 级 时进 行调查,共调查1 次。4.1.5.1.2 调查部 位。参试 材料 水稻 叶片。4.1.5.2 调查方 法 4.1.5.2.1 参试材 料以 发病 最重 的稻 株的叶 片作 为其 抗性 级别。4.1.5.2.2 每个参 试材 料、每个 菌株 记录1 个抗 性级 别数 值。DB44/T 23882022 4 叶瘟病 情调 查分 级标 准见 表1。调查 数据 记载 参见 附录 C 表 C.1。来源:NY/T 2646-2014 水稻品 种试 验稻 瘟病 抗性 鉴定与 评价 技术 规程 的内 容,有 修改 表1 水稻叶 瘟病 情调 查分 级标 准 叶瘟病级
17、 病情 抗性类型 0 无任何症状 抗病 1 针头状大小褐点 2 褐点较大,直径小于1 mm 3 圆形至椭圆形的灰色病斑,边缘褐色,直径1 mm 2 mm 4 典型纺锤形病斑,直径大于2 mm,通常局限在两叶脉之间,为害面积小于叶面积的2.0%感病 5 典型纺锤形病斑,为害面积占叶面积的2.1%10.0%6 典型纺锤形病斑,为害面积占叶面积的10.1%25.0%7 典型纺锤形病斑,为害面积占叶面积的25.1%50.0%8 典型纺锤形病斑,为害面积占叶面积的50.1%75.0%9 典型纺锤形病斑,为害面积大于叶面积的75.0%注:叶片上无叶瘟,但有叶枕瘟发生的记作5 级。4.1.6 室内叶 瘟抗
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