DB32 T 3544-2019 临床级人体组织来源间充质干细胞 质量控制管理规范.pdf

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1、1 ICS 07.080C 04 DB32江 苏 省 地 方 标 准DB32/T 3544-2019临 床 级 人 体 组 织 来 源 间 充 质 干 细 胞质 量 控 制 管 理 规 范 Quality control and technical specifications of clinical grade mesenchymal stem cellsfrom human tissues 2019-2-28发 布 2019-3-30实 施江 苏 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB32/T 3544-2019 1 目 次前 言 .II1 范 围 .12 规 范 性 引 用 文 件

2、 .13 术 语 和 定 义 .14 基 本 要 求 .35 操 作 规 范 .46 质 量 控 制 .9附 录 A（ 资 料 性 附 录 ） 样 本 捐 献 供 者 知 情 同 意 书 .12 附 录 B（ 资 料 性 附 录 ） 干 细 胞 供 者 健 康 信 息 采 集 表 .13附 录 C（ 资 料 性 附 录 ） 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 质 量 控 制 检 测 表 .14 DB32/T 3544-2019 2 前 言本 标 准 按 照 GB/T1.1-2009给 出 的 规 则 起 草 。本 标 准 由 江 苏 省 卫 生 和 计 划 生 育 委 员 会 提 出 。本

3、 标 准 由 江 苏 省 卫 生 标 准 化 技 术 委 员 会 归 口 。本 标 准 起 草 单 位 ： 苏 州 大 学 附 属 第 一 医 院 、 中 国 科 学 院 上 海 营 养 与 健 康 研 究 院 、 常 州 市 第 一 人 民 医院 、 南 京 市 鼓 楼 医 院 、 无 锡 市 第 三 人 民 医 院 。本 标 准 主 要 起 草 人 ： 时 玉 舫 、 侯 健 全 、 王 莹 、 陈 晓 栋 、 陈 永 井 、 蒋 敬 庭 、 孙 凌 云 、 吕 国 忠 。 DB32/T 3544-2019 3 临 床 级 人 体 组 织 来 源 间 充 质 干 细 胞 质 量 控 制 管

4、 理 规 范1 范 围本 标 准 规 定 了 临 床 级 人 体 组 织 来 源 间 充 质 干 细 胞 制 备 的 基 本 要 求 、 操 作 规 范 和 质 量 控 制 。本 标 准 适 用 于 临 床 级 人 体 组 织 来 源 间 充 质 干 细 胞 的 样 本 采 集 、 制 备 、 冻 存 、 复 苏 与 质 量 控 制 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 所 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最

5、 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 GB 3095 环 境 空 气 质 量 标 准GB 19489-2008 实 验 室 生 物 安 全 通 用 要 求GB 50073-2001洁 净 厂 房 设 计 规 范GB 50346 实 验 室 建 筑 技 术 规 范GB 50591 洁 净 室 施 工 及 验 收 规 范WHO实 验 室 生 物 安 全 手 册 （ 第 三 版 ）药 品 生 产 质 量 管 理 规 范 （ 卫 生 部 令 第 79 号 ）中 华 人 民 共 和 国 药 典 （ 2015年 版 ）干 细 胞 制 剂 质 量 控 制 及 临

6、床 前 研 究 指 导 原 则 (试 行 )（ 国 卫 办 科 教 发 2015 46号 ）T11/CSSCR 001-2017 干 细 胞 通 用 要 求 （ 中 国 细 胞 生 物 学 学 会 -干 细 胞 生 物 学 分 会 团 体 标 准 ）3 术 语 和 定 义 下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 标 准 。3.1 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 clinical grade human mesenchymal stem cells符 合 质 量 要 求 ， 可 用 于 临 床 研 究 和 应 用 的 人 多 种 组 织 来 源 （ 脐 带 血 、 脐 带 、 胎 盘

7、 、 子 宫 内 膜 、 脂 肪 、牙 齿 、 骨 髓 等 组 织 ） 间 充 质 干 细 胞 。3.2 伦 理 审 查 委 员 会 ethical review committee负 责 对 科 学 研 究 中 涉 及 的 伦 理 道 德 问 题 进 行 评 估 和 审 查 的 专 门 组 织 。3.3 科 学 审 查 委 员 会 scientific review committee DB32/T 3544-2019 4 负 责 对 生 物 样 本 采 集 和 使 用 的 方 案 进 行 科 学 性 审 查 的 专 门 组 织 。3.4 生 物 安 全 委 员 会 institutiona

8、l biosafety committee负 责 制 定 生 物 安 全 政 策 和 安 全 操 作 规 范 的 专 门 组 织 。3.5 知 情 同 意 informed consent具 有 完 全 民 事 行 为 能 力 的 自 然 人 在 重 复 获 取 信 息 并 准 确 理 解 其 内 容 后 ， 作 出 接 受 或 不 接 受 样 本 采 集的 决 定 ， 此 决 定 不 受 恐 吓 、 利 诱 或 其 他 不 当 行 为 的 影 响 。3.6 样 本 specimen在 特 定 时 间 从 受 试 者 或 捐 献 者 中 采 集 的 器 官 、 组 织 、 细 胞 等 标 本

9、。3.7 样 本 采 集 harvest从 供 体 获 得 组 织 、 细 胞 等 生 物 样 本 的 过 程 。3.8 人 间 充 质 干 细 胞 分 离 isolation of human mesenchymal stem cells从 供 者 器 官 或 组 织 中 分 离 出 间 充 质 干 细 胞 的 过 程 。3.9 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 preparation of human mesenchymal stem cells人 间 充 质 干 细 胞 从 新 鲜 组 织 样 品 分 离 ， 经 过 一 系 列 规 范 处 理 达 到 入 库 标 准 的 过 程 。3

10、.10人 间 充 质 干 细 胞 扩 增 amplificaiton of human mesenchymal stem cells人 间 充 质 干 细 胞 经 培 养 后 ， 数 量 得 到 增 加 的 过 程 。3.11人 间 充 质 干 细 胞 分 化 differentiation of human mesenchymal stem cells同 一 来 源 的 人 间 充 质 干 细 胞 逐 渐 产 生 出 形 态 结 构 、 功 能 特 征 各 不 相 同 的 细 胞 类 型 的 过 程 。3.12 人 间 充 质 干 细 胞 冻 存 cryopreservation of hu

11、man mesenchymal stem cells使 人 间 充 质 干 细 胞 暂 时 脱 离 生 长 状 态 而 保 存 其 干 细 胞 特 性 的 低 温 冷 冻 过 程 。 DB32/T 3544-2019 5 3.13人 间 充 质 干 细 胞 复 苏 thawing human mesenchymal stem cells使 人 间 充 质 干 细 胞 从 脱 离 生 长 状 态 重 新 获 得 生 长 活 力 的 过 程 。3.14人 间 充 质 干 细 胞 传 代 培 养 subculture of human mesenchymal stem cells当 原 代 培 养

12、成 功 后 ， 随 着 培 养 时 间 的 延 长 和 细 胞 不 断 分 裂 ， 为 避 免 发 生 接 触 性 抑 制 ， 将 培 养 中 的人 间 充 质 干 细 胞 分 割 成 小 的 部 分 ， 重 新 接 种 到 新 的 培 养 皿 （ 瓶 ） 的 培 养 基 中 进 行 培 养 的 过 程 。3.15干 细 胞 制 剂 stem cell-based medicinal products 用 于 治 疗 疾 病 或 改 善 健 康 状 况 的 、 以 某 种 类 型 干 细 胞 为 主 要 成 分 、 符 合 相 应 质 量 及 安 全 标 准 ， 且 具有 明 确 生 物 学

13、效 应 的 干 细 胞 制 品 。3.16干 细 胞 质 量 控 制 stem cell quality control为 达 到 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 入 库 质 量 要 求 所 采 取 的 操 作 技 术 和 管 理 程 序 。4 基 本 要 求4.1 场 地 与 设 施4.1.1 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 机 构 选 址 应 符 合 GMP要 求 ， 空 气 质 量 标 准 应 符 合 GB 3095 标 准 分 级二 级 标 准 。 4.1.2 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 机 构 实 验 室 或 厂 房 应 由 具 有 洁 净

14、 实 验 室 设 计 建 设 资 质 的 工 程 公 司 设计 与 建 造 ， 并 应 符 合 GB 19489、 GB 50073、 GB 50346、 GB 50591 规 定 。 建 设 完 成 后 ， 各 功 能 区 域 的 洁净 级 别 应 由 专 业 机 构 进 行 检 测 并 出 具 合 格 证 明 。4.1.3 干 细 胞 制 备 功 能 区 应 按 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 工 艺 进 行 各 区 域 设 计 ,符 合 GMP和 干 细 胞 制剂 质 量 控 制 及 临 床 前 研 究 指 导 原 则 要 求 。 干 细 胞 制 备 机 构 应 配 备

15、独 立 质 量 检 测 实 验 室 ， 并 符 合 GB19489GB和 GB 50346规 定 。4.2 设 备 和 耗 材4.2.1 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 的 制 备 机 构 应 优 先 选 用 符 合 GMP、 干 细 胞 通 用 要 求 和 干 细 胞 制 剂质 量 控 制 及 临 床 前 研 究 指 导 原 则 要 求 ， 获 得 国 家 资 质 认 证 的 设 备 、 仪 器 、 耗 材 和 试 剂 。4.2.2 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 的 制 备 机 构 应 对 设 备 、 仪 器 、 耗 材 和 试 剂 供 应 商 进 行 资 质 审 核 认

16、证 ， 要求 供 应 商 提 供 产 品 质 量 报 告 和 批 次 检 验 报 告 ， 并 对 耗 材 及 试 剂 进 行 质 量 抽 检 ， 避 免 采 购 质 量 不 合 格 的 产 品 。4.2.3 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 的 制 备 机 构 设 备 和 仪 器 正 式 使 用 前 应 做 安 装 确 认 （ IQ） 、 运 行 确 认 （ OQ）和 性 能 确 认 （ PQ） ， 并 定 期 进 行 第 三 方 校 准 ， 不 得 使 用 有 安 全 隐 患 的 仪 器 操 作 样 本 及 细 胞 制 品 。 DB32/T 3544-2019 6 4.2.4 临 床

17、级 人 间 充 质 干 细 胞 的 制 备 机 构 应 对 设 备 与 仪 器 应 进 行 编 号 建 档 ， 并 建 立 标 准 操 作 流 程 （ SOP） ，确 保 使 用 、 运 行 、 保 养 、 维 修 记 录 完 整 可 追 溯 ， 对 于 关 键 工 艺 相 关 设 备 参 数 应 进 行 实 时 监 测 ， 及 时 对 状态 异 常 的 设 备 进 行 校 对 和 维 修 。4.3 人 员 管 理4.3.1 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 机 构 应 分 别 设 立 干 细 胞 制 备 负 责 人 、 质 量 管 理 负 责 人 和 质 量 授 权 人岗 位

18、。 由 法 人 授 权 任 命 ， 任 职 资 质 应 符 合 GMP 和 干 细 胞 制 剂 质 量 控 制 及 临 床 前 研 究 指 导 原 则 要 求 ，定 期 接 受 岗 位 专 业 培 训 ， 制 备 技 术 负 责 人 与 质 量 管 理 负 责 人 、 质 量 授 权 人 不 得 相 互 兼 任 。4.3.2 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 和 质 控 技 术 人 员 应 具 备 的 健 康 要 求 ： HBsAg和 针 对 HAV、 HCV、 HIV及 梅 毒 的 抗 体 检 测 应 为 阴 性 ， 并 且 （ 矫 正 ） 视 力 正 常 ， 无 色 盲 、

19、色 弱 。4.3.3 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 和 质 控 技 术 人 员 须 半 年 接 受 体 检 一 次 ， 有 呼 吸 道 感 染 或 发 热 等 疾 病状 态 下 不 得 进 入 洁 净 操 作 区 ， 需 完 全 康 复 后 方 可 恢 复 岗 位 操 作 。 4.3.4 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 和 质 控 技 术 人 员 上 岗 前 应 经 过 专 业 培 训 ， 内 容 包 括 但 不 限 于 干 细 胞理 论 与 实 践 、 生 命 伦 理 、 干 细 胞 法 律 法 规 、 GMP管 理 、 GCP资 质 、 制 剂 基 本 知

20、 识 、 细 胞 培 养 基 础 、 生 物安 全 、 仪 器 设 备 使 用 与 维 护 方 法 、 物 料 管 理 与 清 洁 卫 生 、 岗 位 职 责 、 操 作 规 范 等 内 容 。4.4 生 命 伦 理4.4.1 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 机 构 应 成 立 伦 理 审 查 委 员 会 ， 伦 理 审 查 委 员 会 由 医 药 学 、 伦 理 学 、法 学 等 专 家 以 及 无 利 害 关 系 的 社 区 代 表 等 人 员 组 成 ， 负 责 相 关 伦 理 问 题 的 审 查 和 评 价 。 同 时 应 按 照 国 家法 律 法 规 和 行 业 要

21、求 ， 建 立 干 细 胞 伦 理 准 则 和 相 应 的 伦 理 操 作 规 范 ， 以 保 护 样 本 提 供 者 的 权 益 和 安 全 。4.4.2 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 机 构 应 设 有 科 学 审 查 委 员 会 。 科 学 审 查 委 员 会 应 由 生 物 和 医 学 领 域的 专 家 组 成 ， 负 责 对 生 物 样 本 采 集 和 使 用 的 方 案 进 行 科 学 性 审 查 。4.4.3 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 机 构 应 设 有 生 物 安 全 评 审 委 员 会 。 生 物 安 全 评 审 委 员 会 应 由 生

22、 物 学家 、 医 务 人 员 、 技 术 人 员 和 实 验 室 管 理 人 员 等 各 方 面 的 专 家 或 工 作 人 员 组 成 ， 制 定 符 合 WHO生 物 安 全 手 册 和 GB 19489 规 定 的 生 物 危 害 评 估 方 案 、 生 物 安 全 事 故 应 急 预 案 等 安 全 管 理 措 施 。 负 责 人 间 充 质干 细 胞 制 备 的 生 物 安 全 政 策 和 安 全 操 作 规 范 的 审 查 ， 避 免 不 必 要 的 操 作 ， 保 护 供 者 及 样 本 安 全 。4.4.4 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 制 备 机 构 的 工 作

23、人 员 应 当 对 风 险 及 收 益 进 行 有 效 评 估 ， 确 保 样 本 提 供 者或 其 近 亲 属 对 项 目 信 息 在 当 时 科 学 技 术 条 件 下 充 分 知 情 、 形 成 全 面 和 准 确 的 认 识 ， 自 愿 做 出 是 否 同 意 采集 样 本 的 决 定 ， 并 签 署 知 情 同 意 书 。 样 本 捐 献 供 者 知 情 同 意 书 参 见 附 录 A。4.4.5 采 集 人 员 、 医 务 人 员 、 制 备 质 控 操 作 人 员 和 管 理 人 员 应 当 对 样 本 提 供 者 的 个 人 信 息 采 取 保 密 措施 ， 防 止 有 意 或

24、 意 外 泄 露 ， 若 确 需 提 供 信 息 ， 需 要 经 有 关 申 请 程 序 并 提 交 伦 理 委 员 会 批 准 同 意 方 可 实 施 。违 反 法 律 规 定 的 ， 应 依 法 追 究 民 事 责 任 、 行 政 责 任 和 刑 事 责 任 。5 操 作 规 范5.1 样 本 采 集 5.1.1 供 者 健 康5.1.1.1 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 采 集 制 备 方 应 对 干 细 胞 供 者 的 基 本 信 息 与 健 康 信 息 进 行 详 细 采 集 与 记录 ， 同 时 做 好 对 供 者 的 隐 私 保 护 ， 相 关 记 录 入 档 保 留

25、至 少 30 年 。 DB32/T 3544-2019 7 5.1.1.2 干 细 胞 供 者 应 无 血 液 系 统 疾 病 、 内 分 泌 系 统 疾 病 、 恶 性 肿 瘤 史 、 性 传 播 疾 病 及 高 危 人 群 史 、吸 毒 史 、 一 般 传 染 性 疾 病 或 其 他 遗 传 疾 病 ； HIV、 HBV、 HCV、 TP、 HTLV、 EBV与 CMV抗 体 与 核 酸 检 测 应为 阴 性 。 供 者 健 康 调 查 和 采 集 登 记 表 参 见 附 录 B。5.1.2 采 集 场 所5.1.2.1 人 体 组 织 样 本 的 采 集 场 所 或 环 境 一 般 为

26、洁 净 手 术 室 ， 无 菌 采 集 。5.1.2.2 人 牙 齿 样 本 的 采 集 场 所 无 洁 净 级 别 要 求 ， 但 需 保 证 个 人 基 本 卫 生 。5.1.2.3 新 生 儿 脐 带 血 、 脐 带 、 胎 盘 、 人 骨 髓 样 本 的 采 集 场 所 应 达 到 级 标 准 洁 净 手 术 室 要 求 。5.1.2.4 人 脂 肪 组 织 和 子 宫 内 膜 组 织 样 本 的 采 集 场 所 须 达 到 级 一 般 洁 净 手 术 室 要 求 。5.1.3 采 集 方 法 5.1.3.1 新 生 儿 脐 带 血5.1.3.1.1 新 生 儿 脐 带 血 采 集 应

27、 由 经 严 格 专 业 培 训 的 护 士 或 助 产 士 职 称 以 上 医 务 人 员 进 行 操 作 。5.1.3.1.2 待 新 生 儿 娩 出 后 ， 断 脐 结 扎 。 用 蘸 有 75%医 用 酒 精 的 消 毒 纱 布 快 速 擦 拭 胎 盘 远 端 脐 带 。5.1.3.1.3 采 血 针 穿 刺 消 毒 部 位 脐 静 脉 ， 引 流 脐 带 血 至 脐 带 血 采 集 袋 ， 待 采 集 的 脐 血 管 塌 陷 、 发 白 后或 脐 带 血 停 止 流 动 时 即 可 结 束 采 集 。5.1.3.1.4 旋 紧 采 血 袋 软 管 旋 塞 ， 或 做 热 合 密 封

28、处 理 ， 并 贴 上 条 形 码 作 为 唯 一 标 识 。5.1.3.2 新 生 儿 脐 带 组 织5.1.3.2.1 新 生 儿 脐 带 组 织 采 集 应 由 经 严 格 专 业 培 训 的 护 士 或 助 产 士 职 称 以 上 医 务 人 员 进 行 操 作 。5.1.3.2.2 胎 儿 娩 出 后 ， 在 距 胎 儿 脐 部 5cm至 8cm 处 ， 用 止 血 钳 分 别 夹 住 脐 带 上 下 两 端 ， 用 蘸 有 75%医 用 酒 精 的 消 毒 纱 布 擦 拭 脐 带 ， 消 毒 剪 刀 于 两 钳 中 间 断 脐 。5.1.3.2.3 胎 盘 端 方 向 取 至 少

29、15cm 无 针 孔 的 脐 带 ， 手 术 线 结 扎 脐 带 样 本 两 端 ， 截 取 脐 带 样 本 置 于 无 菌 采 集 瓶 中 ， 同 时 加 入 样 本 保 存 液 以 浸 没 脐 带 组 织 。5.1.3.2.4 采 集 瓶 密 闭 包 装 ， 并 贴 条 形 码 作 为 唯 一 标 识 。5.1.3.3 新 生 儿 胎 盘 组 织5.1.3.3.1 新 生 儿 胎 盘 组 织 采 集 应 由 经 严 格 专 业 培 训 的 护 士 或 助 产 士 职 称 以 上 医 务 人 员 进 行 操 作 。5.1.3.3.2 胎 儿 娩 出 后 ， 待 胎 盘 与 母 体 完 全 分

30、 离 ， 用 生 理 盐 水 充 分 清 洗 胎 盘 ， 再 用 75%医 用 酒 精 快 速冲 洗 表 面 。5.1.3.3.3 迅 速 将 胎 盘 放 入 胎 盘 采 集 盒 或 采 集 袋 ， 再 加 入 保 存 液 予 以 全 部 浸 没 。5.1.3.3.4 采 集 盒 或 采 集 袋 密 闭 包 装 ， 并 贴 上 条 形 码 作 为 唯 一 标 识 。5.1.3.4 脂 肪 组 织5.1.3.4.1 脂 肪 组 织 采 集 前 应 由 整 形 医 师 制 定 抽 脂 方 案 和 术 前 术 后 的 防 感 染 措 施 。5.1.3.4.2 由 整 形 医 师 行 脂 肪 抽 吸

31、术 ， 抽 取 脂 肪 组 织 ， 置 于 无 菌 采 集 袋 或 瓶 中 保 存 。 5.1.3.4.3 采 集 袋 或 瓶 密 封 包 装 ， 并 贴 上 条 形 码 作 为 唯 一 标 识 。5.1.3.5 骨 髓 组 织5.1.3.5.1 骨 髓 采 集 前 应 由 血 液 科 等 有 经 验 的 医 师 或 住 院 医 师 规 范 化 培 训 合 格 者 进 行 制 定 骨 髓 穿 刺 方案 和 术 前 术 后 的 防 感 染 措 施 。 DB32/T 3544-2019 8 5.1.3.5.2 由 血 液 科 等 有 经 验 的 医 师 或 经 住 院 医 师 规 范 化 培 训

32、合 格 的 医 师 行 骨 髓 穿 刺 术 ， 采 取 避 免 骨髓 稀 释 的 措 施 ， 采 集 骨 髓 至 含 抗 凝 剂 的 针 管 内 ， 即 时 转 移 至 无 菌 采 集 瓶 中 保 存 。5.1.3.5.3 采 集 瓶 密 封 包 装 ， 并 贴 上 条 形 码 作 为 唯 一 标 识 。5.1.3.6 子 宫 内 膜 组 织5.1.3.6.1 子 宫 内 膜 组 织 采 集 前 应 由 妇 产 科 医 师 制 定 子 宫 内 膜 诊 刮 方 案 和 术 前 术 后 的 防 感 染 措 施 。5.1.3.6.2 手 术 诊 刮 获 取 成 年 正 常 女 性 子 宫 内 膜 组

33、 织 ， 置 于 无 菌 采 集 瓶 中 ， 加 入 样 本 保 存 液 予 以 全 部浸 没 保 存 。5.1.3.6.3 采 集 瓶 密 封 包 装 ， 并 贴 上 条 形 码 作 为 唯 一 标 识 。5.1.3.7 牙 齿 组 织5.1.3.7.1 收 集 没 有 牙 体 和 牙 髓 病 变 、 自 然 脱 落 的 乳 牙 ， 置 于 无 菌 采 集 瓶 中 ， 加 入 样 本 保 存 液 予 以 全部 浸 没 保 存 。 5.1.3.7.2 采 集 瓶 密 封 包 装 ， 并 贴 上 条 形 码 作 为 唯 一 标 识 。5.2 样 本 运 输5.2.1 样 本 运 输 人 员 应

34、是 经 过 专 业 培 训 合 格 的 人 员 ， 对 样 本 运 输 应 制 定 规 范 及 应 急 预 案 ， 并 对 样 本 运输 全 程 做 记 录 ， 包 括 但 不 限 于 运 输 的 方 式 、 条 件 、 路 径 、 时 间 、 人 员 、 地 址 及 样 本 信 息 ， 相 关 记 录 入 档保 留 至 少 30 年 。5.2.2 样 本 运 输 过 程 中 须 防 渗 漏 、 防 辐 射 、 抗 震 动 、 耐 压 、 耐 热 等 ， 样 本 包 装 需 贴 上 条 形 码 作 为 唯 一标 识 。5.2.3 样 本 运 输 须 采 用 平 稳 、 安 全 、 快 速 的

35、运 输 途 径 。5.2.4 新 生 儿 脐 带 （ 血 ） 或 胎 盘 、 人 脂 肪 、 骨 髓 、 子 宫 内 膜 和 牙 齿 样 本 的 运 输 温 度 为 2 8 ， 运 输时 间 不 超 过 12 小 时 。5.3 样 本 接 收 5.3.1 样 本 接 收 人 员 应 是 经 过 专 业 培 训 合 格 的 人 员 ， 应 遵 从 安 全 与 准 确 的 原 则 对 样 本 接 收 制 定 规 范 及应 急 预 案 ， 并 对 样 本 接 收 过 程 进 行 记 录 ， 相 关 记 录 入 档 保 留 至 少 30 年 。5.3.2 样 本 接 收 时 ， 接 收 人 员 应 做

36、 好 自 我 防 护 工 作 ， 接 触 样 本 之 前 应 佩 戴 手 套 与 口 罩 ， 并 对 接 收 场 所进 行 消 毒 。5.3.3 接 收 样 本 后 应 先 观 察 样 本 容 器 外 包 装 的 外 观 ， 检 查 有 无 破 损 。5.3.4 检 查 外 观 后 ， 工 作 人 员 应 检 查 样 本 采 集 信 息 记 录 表 是 否 齐 全 ， 同 时 确 认 记 录 表 上 信 息 是 否 填 写完 整 ， 检 查 信 息 记 录 表 信 息 是 否 与 样 本 信 息 一 一 对 应 ， 样 本 及 记 录 表 上 应 贴 有 一 致 对 应 的 条 形 码 ， 做

37、 到样 本 与 供 者 信 息 相 对 应 ， 确 认 无 误 后 进 行 接 收 。5.3.5 样 本 接 收 后 ， 使 用 75%医 用 酒 精 消 毒 清 理 容 器 外 表 面 ， 如 不 能 及 时 对 样 本 进 行 处 理 ， 需 把 样 本保 存 在 2 8 条 件 下 ， 最 长 时 间 不 超 过 12小 时 。5.3.6 样 本 量 应 能 够 满 足 制 备 和 检 测 的 最 低 要 求 。5.3.7 样 本 接 收 后 应 及 时 将 信 息 反 馈 给 样 本 发 送 方 。 5.3.8 间 充 质 干 细 胞 制 备 方 应 制 定 样 本 拒 收 标 准 ，

38、 按 照 样 本 拒 收 标 准 处 理 样 本 ， 并 及 时 通 知 有 关 部 门或 负 责 人 ， 同 时 做 好 相 应 记 录 。5.4 人 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 培 养 DB32/T 3544-2019 9 5.4.1 基 本 要 求5.4.1.1 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 培 养 应 在 符 合 GMP、 干 细 胞 通 用 要 求 和 干 细 胞 制 剂 质 量控 制 及 临 床 前 研 究 指 导 原 则 要 求 的 车 间 内 进 行 。5.4.1.2 所 有 操 作 需 事 先 制 定 标 准 规 范 ， 由 经 专 业 培 训

39、的 技 术 人 员 严 格 遵 照 执 行 ， 并 进 行 记 录 登 记 ，相 关 记 录 入 档 保 留 至 少 30 年 。5.4.1.3 分 离 与 培 养 过 程 中 应 标 识 干 细 胞 的 名 称 、 代 次 、 批 次 、 操 作 日 期 、 培 养 条 件 、 操 作 人 员 姓 名等 信 息 。5.4.1.4 所 使 用 试 剂 应 尽 量 采 用 符 合 国 家 GMP、 中 华 人 民 共 和 国 药 典 、 干 细 胞 通 用 要 求 和 干细 胞 制 剂 质 量 控 制 及 临 床 前 研 究 指 导 原 则 要 求 的 药 品 辅 料 或 已 获 批 的 药 品

40、 ， 应 出 具 产 品 质 检 合 格 报 告 ，并 对 各 批 次 试 剂 进 行 质 量 抽 检 。 5.4.1.5 尽 可 能 避 免 人 源 或 动 物 源 性 血 清 及 蛋 白 ， 不 得 使 用 同 种 异 体 人 血 清 或 血 浆 。 如 必 须 使 用 动 物血 清 ， 应 确 保 其 无 特 定 动 物 源 性 病 毒 污 染 。 严 禁 使 用 海 绵 体 状 脑 病 流 行 区 来 源 的 牛 血 清 。5.4.2 分 离 与 培 养 方 法5.4.2.1 新 生 儿 脐 带 间 充 质 干 细 胞新 生 儿 脐 带 组 织 剥 取 华 通 氏 胶 ， 以 组 织

41、块 贴 壁 法 或 胶 原 酶 消 化 法 分 离 新 生 儿 脐 带 间 充 质 干 细 胞 。 采用 贴 壁 法 进 行 新 生 儿 脐 带 间 充 质 干 细 胞 原 代 培 养 。5.4.2.2 新 生 儿 脐 带 血 间 充 质 干 细 胞新 生 儿 脐 带 血 样 本 ， 用 无 菌 磷 酸 盐 缓 冲 液 稀 释 后 ， 以 密 度 梯 度 离 心 法 分 离 单 个 核 细 胞 。 采 用 贴 壁 法进 行 新 生 儿 脐 带 血 间 充 质 干 细 胞 原 代 培 养 。5.4.2.3 新 生 儿 胎 盘 间 充 质 干 细 胞 去 除 胎 盘 羊 膜 、 绒 毛 膜 及 绒

42、 毛 组 织 ， 剪 取 脐 带 近 端 的 胎 盘 组 织 ， 以 酶 消 化 法 分 离 胎 盘 间 充 质 干 细 胞 。采 用 贴 壁 法 进 行 新 生 儿 胎 盘 间 充 质 干 细 胞 原 代 培 养 。5.4.2.4 脂 肪 间 充 质 干 细 胞成 人 脂 肪 组 织 剪 碎 至 糜 状 ， 以 胶 原 酶 消 化 法 分 离 脂 肪 间 充 质 干 细 胞 。 采 用 贴 壁 法 进 行 人 脂 肪 间 充 质干 细 胞 原 代 培 养 。5.4.2.5 骨 髓 间 充 质 干 细 胞人 骨 髓 液 样 本 ， 用 无 菌 磷 酸 盐 缓 冲 液 稀 释 后 ， 以 密 度

43、 梯 度 离 心 法 分 离 单 个 核 细 胞 。 采 用 贴 壁 法 进 行人 骨 髓 间 充 质 干 细 胞 原 代 培 养 。5.4.2.6 子 宫 内 膜 间 充 质 干 细 胞子 宫 内 膜 组 织 样 本 剪 碎 至 糜 状 ， 以 胶 原 酶 消 化 法 分 离 宫 内 膜 间 充 质 干 细 胞 。 采 用 贴 壁 法 进 行 人 子 宫 内 膜 间 充 质 干 细 胞 原 代 培 养 。5.4.2.7 牙 髓 间 充 质 干 细 胞 DB32/T 3544-2019 10 牙 齿 样 本 ， 完 整 剥 离 牙 髓 ， 以 酶 消 化 法 分 离 牙 髓 间 充 质 干 细

44、 胞 。 采 用 贴 壁 法 进 行 人 牙 髓 间 充 质 干 细胞 原 代 培 养 。5.5 人 间 充 质 干 细 胞 换 液5.5.1 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 换 液 操 作 需 严 格 遵 照 GMP、 干 细 胞 通 用 要 求 和 干 细 胞 制 剂 质 量 控制 及 临 床 前 研 究 指 导 原 则 要 求 ， 保 证 无 外 源 微 生 物 污 染 ， 相 关 操 作 均 进 行 记 录 并 入 档 保 存 至 少 30 年 。5.5.2 换 液 时 间 及 频 次 需 根 据 人 间 充 质 干 细 胞 生 长 情 况 及 培 养 基 状 态 进 行 判

45、断 ， 以 保 障 人 间 充 质 干 细胞 生 长 所 需 营 养 物 质 水 平 ， 并 消 除 代 谢 物 毒 害 作 用 。5.5.3 换 液 操 作 时 吸 弃 培 养 瓶 中 原 有 的 部 分 或 全 部 培 养 液 ， 再 加 入 新 鲜 培 养 液 。 首 次 换 液 需 要 在 镜 下观 察 到 原 代 细 胞 完 全 贴 壁 和 延 展 后 方 可 进 行 。5.5.4 培 养 基 成 分 应 符 合 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 分 离 与 培 养 基 本 要 求 ， 尽 量 采 用 已 获 国 家 批 准 的 临 床级 产 品 或 药 品 辅 料 。 5.6 人 间 充 质 干 细 胞 传 代5.6.1 临 床 级 人 间 充 质 干 细 胞 传 代 操 作 应 严 格 遵 照 GMP、 干 细 胞 通 用 要 求 和 干 细 胞 制 剂 质 量 控制 及 临 床 前 研 究 指 导 原 则 要 求 ， 保 证 无 外 源 微 生 物 污 染 ， 相 关 操 作 均 进 行 记 录 并 入 档 保 存