SN T 5359-2021 出口动物源食品中阿奇霉素残留量的测定 液相色谱-质谱 质谱法.pdf

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1、I C S 6 7. 0 5 0 C C S C 5 3 中 华 人 民 共 和 国 出 入 境 检 验 检 疫 行 业 标 准 S N / T 5 3 5 9 2 0 2 1 出 口 动 物 源 食 品 中 阿 奇 霉 素 残 留 量 的 测 定 液 相 色 谱 - 质 谱 / 质 谱 法 D e t e r m i n a t i o n o f a z i t h r o m y c i n r e s i d u e i n f o o d s t u f f s o f a n i m a l o r i g i n f o r e x p o r t L C - M S / M S

2、 m e t h o d 2 0 2 1 - 1 1 - 2 2 发 布 2 0 2 2 - 0 6 - 0 1 实 施 中 华 人 民 共 和 国 海 关 总 署 发 布 以正式出版文本为准以正式出版文本为准前 言 本 文 件 按 照 GB / T 1. 1 2020 标 准 化 工 作 导 则 第 1 部 分: 标 准 化 文 件 的 结 构 和 起 草 规 则 的 规 定 起 草。 本 文 件 由 中 华 人 民 共 和 国 海 关 总 署 提 出 并 归 口。 本 文 件 起 草 单 位: 伊 宁 海 关 技 术 中 心、 伊 犁 师 范 大 学、 天 津 海 关 工 业 产 品 安

3、全 技 术 中 心、 天 津 海 关 动 植 物 与 食 品 检 测 中 心、 成 都 海 关 技 术 中 心。 本 文 件 主 要 起 草 人: 粟 有 志、 李 艳 美、 雷 红 琴、 周 均、 李 紫 薇、 周 磊 肖 亚 兵、 刘 俊、 王 兴 磊、 李 芳。 S N / T 5 3 5 9 2 0 2 1 以正式出版文本为准以正式出版文本为准出 口 动 物 源 食 品 中 阿 奇 霉 素 残 留 量 的 测 定 液 相 色 谱 - 质 谱 / 质 谱 法 1 范 围 本 文 件 规 定 了 动 物 源 食 品 中 阿 奇 霉 素 残 留 量 的 液 相 色 谱 - 质 谱/ 质 谱

4、检 测 和 确 证 方 法。 本 文 件 适 用 于 鸡 肉、 牛 肉、 羊 肉、 猪 肉、 猪 肝、 鲤 鱼、 蜂 蜜、 蜂 王 浆、 牛 奶、 奶 粉、 肠 衣 等 动 物 源 食 品 中 阿 奇 霉 素 残 留 量 的 测 定。 2 规 范 性 引 用 文 件 下 列 文 件 中 的 内 容 通 过 文 中 的 规 范 性 引 用 而 构 成 本 文 件 必 不 可 少 的 条 款。 其 中, 注 日 期 的 引 用 文 件, 仅 该 日 期 对 应 的 版 本 适 用 于 本 文 件; 不 注 日 期 的 引 用 文 件, 其 最 新 版 本( 包 括 所 有 的 修 改 单) 适 用

5、 于 本 文 件。 GB / T 6682 分 析 实 验 室 用 水 规 格 和 试 验 方 法。 3 术 语 和 定 义 本 文 件 没 有 需 要 界 定 的 术 语 和 定 义。 4 方 法 摘 要 试 样 经 加 水 涡 旋 分 散 均 匀, 用 乙 腈 震 荡 提 取 其 中 的 阿 奇 霉 素, 经 N- 丙 基 乙 二 胺( PSA ) 净 化, 正 己 烷 脱 脂, 采 用 高 效 液 相 色 谱 - 质 谱/ 质 谱 测 定, 内 标 法 定 量。 5 试 剂 与 材 料 除 非 另 有 说 明, 本 方 法 所 用 试 剂 均 为 分 析 纯, 水 为 GB / T 66

6、82 规 定 中 的 一 级 水。 5. 1 乙 腈: 色 谱 纯。 5. 2 乙 腈: 分 析 纯 5. 3 正 己 烷: 色 谱 纯。 5. 4 甲 酸: 色 谱 纯 5. 5 甲 醇: 色 谱 纯 5. 6 0. 1% 甲 酸 水 溶 液( 体 积 分 数): 移 取 甲 酸 1 mL , 用 水 溶 解 并 稀 释 至 1 000 mL 。 5. 7 乙 腈 - 0. 1% 甲 酸 水 溶 液( 2575 , 体 积 比, 其 中 乙 腈 为 色 谱 纯)。 5. 8 氯 化 钠。 5. 9 微 孔 过 滤 膜: 0. 22 m , 尼 龙 膜。 5. 1 0 N- 丙 基 乙 二 胺

7、 粉( PSA ) 吸 附 剂 5. 1 1 阿 奇 霉 素( Az i t hr omyc i n , CAS : 83905 - 01 - 5 ) 标 准 物 质。 5. 1 2 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标( 阿 奇 霉 素 -D5 )( Az i t hr omyc i n -D5 ) 标 准 物 质。 5. 1 3 阿 奇 霉 素 标 准 储 备 液: 准 确 称 取 折 算 纯 度 后 的 阿 奇 霉 素 标 准 物 质( 5. 11 )( 精 确 到 0. 1 mg ) 适 量, 1 S N / T 5 3 5 9 2 0 2 1 以正式出版文本为准用 甲 醇 配 制 成 1

8、000 g / mL 的 标 准 储 备 液( 避 光 4 保 存, 有 效 期 12 个 月)。 5. 1 4 阿 奇 霉 素 标 准 中 间 溶 液: 移 取 阿 奇 霉 素 标 准 储 备 液( 5. 13 ) 适 量, 用 甲 醇 稀 释 成 50 g / mL ( 避 光 4 保 存, 有 效 期 3 个 月)。 5. 1 5 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标( 阿 奇 霉 素 -D5 ) 储 备 液: 准 确 称 取 折 算 纯 度 后 的 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标( 阿 奇 霉 素 - D5 ) 标 准 物 质( 5. 12 ) 适 量, 用 甲 醇 配 制 成 1 000

9、g / mL 的 标 准 储 备 液( 避 光 4 保 存, 有 效 期 12 个 月)。 5. 1 6 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标( 阿 奇 霉 素 -D5 ) 中 间 溶 液: 移 取 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标( 阿 奇 霉 素 -D5 ) 储 备 液 ( 5. 15 ) 适 量, 用 甲 醇 稀 释 成 50 g / mL ( 避 光 4 保 存, 有 效 期 3 个 月)。 5. 1 7 标 准 工 作 溶 液: 分 别 移 取 阿 奇 霉 素 标 准 中 间 溶 液( 5. 14 ) 适 量 和 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标( 阿 奇 霉 素 - D5 ) 中 间 溶 液

10、( 5. 16 ) 用 乙 腈 - 0. 1% 甲 酸 水 溶 液( 2575 , 体 积 比)( 5. 7 ) 稀 释 成 合 适 的 标 准 工 作 溶 液, 每 毫 升 标 准 溶 液 中 含 有 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标 10 ng 。 5. 1 8 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标( 阿 奇 霉 素 -D5 ) 工 作 液: 移 取 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标( 阿 奇 霉 素 -D5 ) 中 间 溶 液 ( 5. 16 ) 适 量, 用 乙 腈 - 0. 1% 甲 酸 水 溶 液( 2575 , 体 积 比)( 5. 7 ) 稀 释 成 100 ng / mL 。 6 仪

11、器 和 设 备 6. 1 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 仪: 配 有 电 喷 雾 离 子 源( ES I )。 6. 2 分 析 天 平: 感 量 为 0. 1 mg 和 0. 01 g 。 6. 3 组 织 捣 碎 机。 6. 4 氮 吹 仪。 6. 5 振 动 器。 6. 6 离 心 机: 10 000 r / mi n 。 6. 7 离 心 管: 15 mL 和 50 mL 。 6. 8 涡 旋 器。 7 试 样 制 备 与 保 存 7. 1 动 物 组 织、 内 脏 鸡 肉、 牛 肉、 羊 肉、 猪 肉、 猪 肝、 鲤 鱼、 肠 衣( 需 预 先 置 于 -18 冰 箱 放 置

12、6 h 以 上) 等 取 有 代 表 性 样 品 约 500 g , 经 高 速 组 织 捣 碎 机 捣 碎, 均 分 成 两 份, 装 入 干 净 容 器 中, 加 封 后 做 出 标 记, 一 份 作 为 试 样, 一 份 作 为 留 样。 将 试 样 置 于 -18 条 件 下 保 存。 7. 2 蜂 王 浆、 牛 奶、 奶 粉 取 适 量 新 鲜 或 者 冷 藏 的 样 品 约 500 g , 充 分 混 匀 分 成 两 份, 装 入 干 净 容 器 中, 加 封 后 做 出 标 记, 一 份 作 为 试 样, 一 份 作 为 留 样。 将 试 样 置 于 0 4 条 件 下 保 存。

13、 7. 3 蜂 蜜 蜂 蜜 从 全 部 样 品 中 取 出 有 代 表 性 样 品 约 500 g , 对 无 结 晶 样 品 的 将 其 搅 拌 均 匀, 均 分 成 两 份, 装 入 干 净 容 器 中, 加 封 后 做 出 标 记; 对 有 结 晶 的 蜂 蜜 样 品, 在 密 闭 情 况 下, 将 样 品 置 于 不 超 过 60 水 浴 中 温 热, 振 荡 待 样 品 完 全 融 化 后 搅 匀, 迅 速 冷 却 至 室 温, 均 分 成 两 份, 装 入 干 净 容 器 中, 加 封 后 做 出 标 记。 将 试 样 置 于 0 4 条 件 下 保 存。 2 S N / T 5

14、3 5 9 2 0 2 1 以正式出版文本为准8 测 定 步 骤 8. 1 提 取 8. 1. 1 鸡 肉、 猪 肝、 肠 衣 等 固 态 样 品 称 取 样 品 2 g ( 精 确 到 0. 01 g ) 于 50 mL 具 塞 离 心 管 中, 加 入 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标( 阿 奇 霉 素 -D5 ) 工 作 液( 5. 18 ) 200 L , 加 入 8 mL 水, 涡 旋 30 s , 将 样 品 充 分 分 散; 依 次 加 入 3 g 氯 化 钠 和 10 mL 乙 腈( 5. 2 ), 水 平 振 荡 10 mi n , 8 000 r / mi n 离 心 1 m

15、i n ; 取 6 mL 上 清 液 至 15 mL 具 塞 离 心 管 中, 待 净 化。 8. 1. 2 蜂 蜜 和 牛 奶 等 液 体 样 品 牛 奶 等 含 水 量 较 高 的 液 体 样 品, 称 取 5 g ( 精 确 到 0. 01 g ) 于 50 mL 具 塞 离 心 管 中; 若 是 蜂 蜜 等 粘 性 液 体 样 品 称 取 5 g ( 精 确 到 0. 01 g ) 于 50 mL 具 塞 离 心 管 中, 再 加 入 5 mL 水。 加 入 阿 奇 霉 素 氘 代 内 标 ( 阿 奇 霉 素 -D5 ) 工 作 液( 5. 18 ) 200 L , 涡 旋 30 s

16、, 将 样 品 充 分 分 散; 依 次 加 入 3 g 氯 化 钠 和 10 mL 乙 腈 ( 5. 2 ), 水 平 振 荡 10 mi n , 8 000 r / mi n 离 心 1 mi n ; 取 6 mL 上 清 液 至 15 mL 具 塞 离 心 管 中, 待 净 化。 8. 2 净 化 向 6 mL 上 清 液 中 加 入 100 mg PSA , 涡 旋 30 s , 以 8 000 r / mi n 的 速 度 离 心 1 mi n ; 取 5 mL 上 清 液 至 15 mL 试 管 中, 于 40 水 浴 氮 吹 至 干, 用 1. 0 mL 乙 腈 - 0. 1%

17、甲 酸 水 溶 液( 2575 , 体 积 比, 乙 腈 为 色 谱 纯) 溶 解 残 渣, 加 入 2 mL 正 己 烷, 涡 旋 10 s , 将 溶 液 转 移 至 15 mL 离 心 管 中, 以 10 000 r / mi n 的 速 度 离 心 5 mi n ; 取 下 层 溶 液 过 0. 22 m 尼 龙 滤 膜, 滤 液 待 测。 8. 3 测 定 8. 3. 1 液 相 色 谱 条 件 液 相 色 谱 参 考 条 件 如 下: a ) 色 谱 柱: C 18 柱, 2. 1 mm100 mm , 3 m 或 相 当; b ) 流 动 相 A : 含 0. 1% 甲 酸 水

18、溶 液( 5. 5 ); 流 动 相 B : 乙 腈; 洗 脱 梯 度 参 见 表 1 ; c ) 柱 温: 35 ; d ) 进 样 体 积: 10 L 。 表 1 流 动 相 及 梯 度 洗 脱 条 件 时 间/ mi n 流 速/( mL / mi n ) 流 动 相 A ( 0. 1% 甲 酸 水) / % 流 动 相 B ( 乙 腈) / % 0. 00 0. 25 90. 0 10. 0 1. 00 0. 25 90. 0 10. 0 4. 50 0. 25 5. 0 95. 0 5. 50 0. 25 5. 0 95. 0 5. 51 0. 25 90. 0 10. 0 10.

19、00 0. 25 90. 0 10. 0 8. 3. 2 质 谱 条 件 质 谱 参 考 条 件 如 下: 3 S N / T 5 3 5 9 2 0 2 1 以正式出版文本为准a ) 电 离 方 式: 电 喷 雾 电 离( ES I ); b ) 干 燥 气 温 度: 350 ; c ) 干 燥 气 流 量: 9. 0 L / mi n ; d ) 鞘 气 温 度: 250 ; e ) 鞘 气 流 速: 11. 0 L / mi n , f ) 毛 细 管 电 压: 4 kV ; g ) 扫 描 方 式: 正 离 子 扫 描; h ) 监 测 方 式; 多 重 反 应 监 测( MRM ),

20、 监 测 条 件 参 见 表 2 。 表 2 多 反 应 监 测 条 件 化 合 物 母 离 子( m / z ) 子 离 子( m / z ) 碎 裂 电 压/ v 碰 撞 能 量/ eV 阿 奇 霉 素 749. 5 591. 3 * 190 28 158. 1 190 40 阿 奇 霉 素 -D 5 754. 5 596. 3 * 190 28 * 离 子 用 于 定 量 8. 3. 3 液 相 色 谱 - 串 联 质 谱 测 定 8. 3. 3. 1 定 性 测 定 按 照 上 述 条 件 测 定 样 品 和 标 准 工 作 溶 液, 待 测 样 品 中 化 合 物 色 谱 峰 的 保

21、 留 时 间 与 标 准 溶 液 相 比 变 化 范 围 应 在 2. 5% 之 内。 定 性 离 子 对 的 相 对 丰 度 与 浓 度 相 当 标 准 工 作 液 的 相 对 丰 度 一 致, 相 对 丰 度 偏 差 不 超 过 表 3 的 规 定, 且 每 个 离 子 的 信 噪 比 均 3 , 可 判 断 样 品 中 存 在 相 应 的 被 测 物。 表 3 定 性 时 相 对 离 子 丰 度 的 最 大 允 许 范 围 相 对 离 子 丰 度 范 围/ % 50 2050 ( 含) 1020 ( 含) 10 允 许 的 相 对 偏 差/ % 20 25 30 50 8. 3. 3.

22、2 定 量 测 定 在 仪 器 最 佳 条 件 下, 对 样 液 及 标 准 工 作 溶 液( 阿 奇 霉 素 参 考 线 性 范 围: 0. 5 ng / mL10 ng / mL ) 进 样。 内 标 法 定 量, 样 液 中 待 测 物 的 响 应 值 均 在 仪 器 测 定 的 线 性 范 围 内。 阿 奇 霉 素 及 其 内 标 物 质 的 多 重 反 应 监 测 色 谱 图 参 见 附 录 A 的 图 A. 1 和 图 A. 2 。 8. 3. 4 空 白 试 验 除 不 称 取 试 样 外, 均 按 上 述 步 骤 操 作。 9 结 果 计 算 和 表 述 按 式( 1 ) 计

23、算 阿 奇 霉 素 残 留 量。 计 算 结 果 需 扣 除 空 白 值。 X= C V V11 000 V2 m1 000 ( 1 ) 式 中: 4 S N / T 5 3 5 9 2 0 2 1 以正式出版文本为准 X 试 样 中 阿 奇 霉 素 的 含 量, 单 位 为 微 克 每 千 克( g / kg ); C 从 标 准 工 作 曲 线 得 到 的 被 测 组 分 溶 液 浓 度, 单 位 为 纳 克 每 毫 升( ng / mL ); V 试 样 定 容 体 积, 单 位 为 毫 升( mL ); V1 提 取 液 乙 腈 的 总 体 积, 单 位 为 毫 升( mL ), 即

24、提 取 液 10 mL V2 40 水 浴 氮 吹 至 干 的 提 取 液 体 积, 单 位 为 毫 升( mL ), 即 上 清 液 5 mL 。 m 样 品 称 样 量, 单 位 为 克( g )。 1 000 换 算 系 数 计 算 结 果 保 留 三 位 有 效 数 字。 1 0 方 法 定 量 限 本 方 法 的 检 出 限 和 定 量 限 均 为 1. 0 g / kg 。 1 1 回 收 率 和 精 密 度 本 方 法 对 鸡 肉、 牛 肉、 羊 肉、 猪 肉、 猪 肝、 鲤 鱼、 蜂 蜜、 蜂 王 浆、 牛 奶、 奶 粉、 肠 衣 等 基 质 进 行 添 加 回 收 率 试 验

25、, 不 同 基 质 中 不 同 添 加 水 平 下 的 回 收 率 数 据 参 见 表 4 。 表 4 不 同 基 质 中 不 同 添 加 水 平 下 阿 奇 霉 素 的 回 收 率 和 相 对 标 准 偏 差( R S D ) 样 品 添 加 水 平 添 加 浓 度 1. 0 g / kg 添 加 浓 度 2. 0 g / kg 添 加 浓 度 10. 0 g / kg 回 收 率/ % RSD / % 回 收 率/ % RSD / % 回 收 率/ % RSD / % 鸡 肉 95. 7 7. 0 102. 7 12. 6 106. 1 9. 5 牛 肉 109. 0 8. 7 102.

26、3 8. 1 105. 1 5. 0 羊 肉 85. 4 11. 6 85. 1 9. 4 95. 7 11. 6 猪 肉 102. 5 14. 6 100. 0 11. 0 95. 0 12. 6 猪 肝 91. 5 6. 9 89. 4 10. 7 94. 8 9. 8 鲤 鱼 98. 4 4. 5 105. 5 6. 8 91. 9 5. 5 蜂 蜜 103. 3 12. 6 94. 7 13. 6 85. 7 3. 6 蜂 王 浆 96. 3 9. 3 93. 0 13. 6 95. 7 6. 2 牛 奶 99. 5 9. 1 92. 4 8. 1 95. 4 14. 2 奶 粉 10

27、3. 4 4. 7 101. 9 9. 1 107. 1 9. 0 肠 衣 104. 2 8. 5 91. 2 6. 2 108. 7 7. 1 5 S N / T 5 3 5 9 2 0 2 1 以正式出版文本为准附 录 A ( 资 料 性) 阿 奇 霉 素 及 其 内 标 物 色 谱 图 图 A. 1 阿 奇 霉 素 标 准 溶 液 的 提 取 离 子 色 谱 图( 1 . 0 n g / m L ) 图 A. 2 阿 奇 霉 素 - D 5 内 标 物 质 的 提 取 离 子 色 谱 图( 1 0 . 0 n g / m L ) 6 S N / T 5 3 5 9 2 0 2 1 以正式

28、出版文本为准F o r e w o r d T h i s s t a n d a r d w a s d r a f t e d o n t h e b a s e o f t h e r e q u i r e m e n t o f G B / T 1 . 1 2 0 2 0 . T h i s s t a n d a r d w a s p r o p o s e d b y a n d w a s u n d e r t h e c h a r g e o f G e n e r a l A d m i n i s t r a t i o n o f C u s t o m s o

29、f t h e P e o p l e s R e p u b l i c o f C h i n a . T h i s s t a n d a r d w a s d r a f t e d b y Y i n i n g C u s t o m s T e c h n i c a l C e n t e r , Y i l i N o r m a l U n i v e r s i t y , T i a n j i n C u s - t o m s I n d u s t r i a l P r o d u c t S a f e t y T e c h n i c a l C e

30、n t e r , T i a n j i n C u s t o m s A n i m a l a n d p l a n t a n d F o o d I n s p e c - t i o n C e n t e r , C h e n g d u C u s t o m s T e c h n i c a l C e n t e r . T h e m a i n d r a f t e r s o f t h i s s t a n d a r d a r e S u Y o u z h i , L i Y a n m e i , L e i H o n g q i n , Z

31、h o u J u n , L i Z i w e i , Z h o u L e i , X i a o Y a b i n g , L i u J u n , W a n g X i n l e i , L i F a n g . 7 S N / T 5 3 5 9 2 0 2 1 以正式出版文本为准以正式出版文本为准D e t e r m i n a t i o n o f a z i t h r o m y c i n r e s i d u e i n f o o d s t u f f s o f a n i m a l o r i g i n f o r e x p o r t

32、L C - M S / M S m e t h o d 1 S c o p e T h i s s t a n d a r d s p e c i f i e s t h e m e t h o d o f d e t e r m i n a t i o n a n d c o n f i r m a t i o n o f a z i t h r o m y c i n r e s i d u e i n f o o d s t u f f s o f a n i m a l o r i g i n b y L C - M S / M S m e t h o d f o r e x p o

33、r t . T h i s s t a n d a r d i s a p p l i c a b l e t o t h e d e t e r m i n a t i o n a n d c o n f i r m a t i o n o f a z i t h r o m y c i n i n c h i c k e n , b e e f , m u t t o n , p o r k , p i g l i v e r , c a r p , h o n e y , r o y a l j e l l y , m i l k , m i l k p o w d e r a n d

34、c a s i n g o f a n i m a l s a m p l e s . 2 N o r m a t i v e R e f e r e n c e s T h e f o l l o w i n g d o c u m e n t s i s n e c e s s a r y f o r t h i s s t a n d a r d . F o r d a t e d r e f e r e n c e , o n l y d a t e d e d i t i o n s s h a l l a p p l y t o t h i s s t a n d a r d .

35、F o r u n d a t e d r e f e r e n c e , t h e l a t e s t e d i t i o n o f t h e n o r m a t i v e d o c u m e n t r e - f e r r e d t o a p p l i e s . G B / T 6 6 8 2 W a t e r f o r a n a l y t i c a l l a b o r a t o r y u s e S p e c i f i c a t i o n a n d t e s t m e t h o d s 3 T e r m s a

36、n d d e f i n i t i o n s T h e r e a r e n o t e r m s a n d d e f i n i t i o n s t o b e d e f i n e d i n t h i s d o c u m e n t . 4 P r i n c i p l e T h e t e s t s a m p l e i s d i s p e r s e d b y w a t e r a n d t h e n w h i r l p o o l e d . T h e t e s t s a m p l e w a s e x t r a c

37、t e d b y a c e - t o n i t r i l e a n d p u r i f i e d b y N - p r o p y l e t h y l e n e d i a m i n e ( P S A ), d e f a t t e d b y n - h e x a n e , d e t e r m i n e d b y H P L C / M S a n d q u a n t i f i e d b y i n t e r n a l s t a n d a r d m e t h o d . 5 R e a g e n t s a n d m a t

38、 e r i a l s U n l e s s o t h e r w i s e s p e c i f i e d , a l l r e a g e n t s s h o u l d b e o f a n a l y t i c a l g r a d e . W a t e r i s t h e f i r s t g r a d e w a t e r p r e s c r i b e d b y G B / T 6 6 8 2 . 5 . 1 A c e t o n i t r i l e : H P L C G r a d e . 9 S N / T 5 3 5 9 2

39、 0 2 1 以正式出版文本为准5 . 2 A c e t o n i t r i l e : a n a l y t i c a l G r a d e . 5 . 3 N - h e x a n e : H P L C G r a d e . 5 . 4 F o r m i c a c i d : H P L C G r a d e 5 . 5 M e t h a n o l : H P L C G r a d e 5 . 6 0 . 1 % f o r m i c a c i d s o l u t i o n ( v o l u m e f r a c t i o n ) : D i

40、l u t e 1 m L f o r m i c a c i d ( 5 . 4 ) t o 1 L w i t h w a t e r . 5 . 7 A c e t o n i t r i l e - 0 . 1 % f o r m i c a c i d i n a q u e o u s s o l u t i o n ( 2 5 7 5 , v o l u m e r a t i o , i n w h i c h a c e t o n i t r i l e i s c h r o m a t o g r a p h i c p u r e ) . 5 . 8 S o d i

41、u m c h l o r i d e . 5 . 9 M i c r o p o r o u s f i l t r a t i o n m e m b r a n e : 0 . 2 2 m , n y l o n m e m b r a n e . 5 . 1 0 N - p r o p y l e t h y l e n e d i a m i n e p o w d e r ( P S A ) a d s o r b e n t . 5 . 1 1 A z i t h r o m y c i n , C A S : 8 3 9 0 5 - 0 1 - 5 : s t a n d a

42、r d s u b s t a n c e . 5 . 1 2 A z i t h r o m y c i n D e u t e r i u m i n t e r n a l s t a n d a r d ( A z i t h r o m y c i n - D 5 ): s t a n d a r d s u b s t a n c e . 5 . 1 3 A z i t h r o m y c i n s t a n d a r d r e s e r v e s o l u t i o n : A n a p p r o p r i a t e a m o u n t o f t

43、 h e a z i t h r o m y c i n s t a n d a r d s u b s t a n c e ( 5 . 1 1 ) ( a c c u r a t e t o 0 . 1 m g ) w a s a c c u r a t e l y w e i g h e d a n d p r e p a r e d i n t o 1 0 0 0 g / m L s t a n d a r d r e s e r v e s o l u t i o n w i t h m e t h a n o l ( T h e r e s e r v e s o l u t i o

44、 n s t o r e d a t 4 i n d a r k , c a n u s e f o r 1 2 m o n t h s ) . 5 . 1 4 A z i t h r o m y c i n s t a n d a r d i n t e r m e d i a t e s o l u t i o n : A p p r o p r i a t e a m o u n t o f a z i t h r o m y c i n s t a n d a r d r e s e r v e s o l u t i o n ( 5 . 1 3 ) w a s d i l u t e

45、 d i n t o 5 0 g / m L w i t h m e t h a n o l ( T h e i n t e r m e d i a t e s o l u t i o n s t o r e d a t 4 i n d a r k , c a n u s e f o r 3 m o n t h s ) . 5 . 1 5 A z i t h r o m y c i n - D 5 r e s e r v e s o l u t i o n : A n a p p r o p r i a t e a m o u n t o f t h e a z i t h r o m y c

46、 i n i n t e r n a l s t a n d - a r d ( A z i t h r o m y c i n D 5 ) ( 5 . 1 2 ) w a s a c c u r a t e l y w e i g h e d a n d p r e p a r e d i n t o 1 0 0 0 g / m L s t a n d a r d r e - s e r v e s o l u t i o n w i t h m e t h a n o l ( T h e r e s e r v e s o l u t i o n s t o r e d a t 4 i n

47、 d a r k , c a n u s e f o r 1 2 m o n t h s ) . 5 . 1 6 A z i t h r o m y c i n - D 5 i n t e r n a l s t a n d a r d i n t e r m e d i a t e s o l u t i o n : D i l u t e A z i t h r o m y c i n - D 5 r e s e r v e s o l u - t i o n ( 5 . 1 5 ) t o 5 0 g / m L w i t h m e t h a n o l ( T h e i n t

48、 e r m e d i a t e s o l u t i o n s t o r e d a t 4 i n d a r k , c a n u s e f o r 3 m o n t h s ) . 5 . 1 7 S t a n d a r d w o r k i n g s o l u t i o n : D i l u t e a z i t h r o m y c i n i n t e r m e d i a t e s o l u t i o n ( 5 . 1 4 ) a n d A z i t h r o m y - c i n - D 5 i n t e r n a l

49、 s t a n d a r d i n t e r m e d i a t e s o l u t i o n ( 5 . 1 6 ) t o a n a p p r o p r i a t e s t a n d a r d w o r k i n g s o l u t i o n w i t h w i t h a c e t o n i t r i l e - 0 . 1 % f o r m i c a c i d a q u e o u s s o l u t i o n ( 5 . 7 ), p e r m i l l i l i t e r s t a n d a r d s o l u t i o n c o n - 0 1 S N / T 5 3 5 9 2 0 2 1 以正式出版文本为准t a i n i n g a z i t h r o m y c i n - D 5 1 0 n g . 5 . 1 8 W o r k i n g A z i t h r o m y c i n - D 5 s o l u t i o n : D i l u t e A z i t h r o m y c i n - D 5 i n t e r m e d i a t e s o l