DB11 T 1805-2020 实验动物 病理学诊断规范.pdf
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1、ICS 65.020.30 CCS B 44 DB11 北京市地方标准 DB11/T 18052020 代替DB11/T 828.42011,DB11/T 1053.42013,DB11/T 1462.12017,DB11/T 1462.22017, DB11/T 1462.32017,DB11/T 1462.42018,DB11/T 1462.52018 实验动物 病理学诊断规范 Laboratory animalSpecification of pathological diagnosis 2020 - 12 - 24发布 2021 - 04 - 01实施 北京市市场监督管理局 发布 DB
2、11/T 18052020 I 目 次 前言. II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 缩略语 . 1 5 检查规则 . 2 6 检查程序 . 3 7 兽医临床病理学诊断 . 3 8 兽医解剖病理学诊断 . 4 9 病理学诊断报告 . 6 附录A(资料性) 实验动物大体检查 . 8 附录B(资料性) 实验动物血液学指标正常值参考范围 . 17 附录C(资料性) 实验动物血清生物化学指标正常值参考范围 . 21 附录D(资料性) 实验动物组织取材要求 . 24 参考文献 . 29 DB11/T 18052020 II 前 言 本文件按照GB/T 1.120
3、20标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起 草。 本文件代替DB11/T 828.42011实验用小型猪 第4部分:病理学诊断规范、DB11/T 1053.4 2013实验用鱼 第4部分:病理学诊断规范、DB11/T 1462.12017实验动物 病理学诊断规范 第 1部分:实验用猪、DB11/T 1462.22017实验动物 病理学诊断规范 第2部分:实验用牛、DB11/T 1462.32017实验动物 病理学诊断规范 第3部分:实验用羊、DB11/T 1462.42018实验动物 病 理学诊断规范 第4部分:实验用狨猴、DB11/T 1462.52018实验动物 病理
4、学诊断规范 第5部分: 实验用长爪沙鼠,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下: a) 增加了“实验雪貂、实验猫、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽病理学诊断”相关内容(见5、 6、7、8、9、附录A、附录B、附录C、附录D)。 本文件由北京市科学技术委员会提出并归口。 本文件由北京市科学技术委员会组织实施。 本文件起草单位:中国农业大学,北京市实验动物管理办公室,国家卫生健康委科学技术研究所, 中国人民解放军总医院,北京市标准化研究院,中国科学院生物物理研究所,中国科学院水生生物研究 所,中国食品药品检定研究院,北京实验动物研究中心,北京大学,中国人民解放军第309医院,中国 动物疾病预防控
5、制中心。 本文件主要起草人:杨利峰,赵德明,李根平,孙德明,陈华,郝俊峰,赖梦雨,崔宗斌,岳秉飞, 王锡乐,刘文菊,樊子风,胡建武,贾云晓,张博,王天奇,孙荣泽,周向梅,黎立,遇秀玲,史想, 田勇。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为: 首次发布分别为DB11/T 828.42011、DB11/T 1053.42013、DB11/T 1462.12017、DB11/T 1462.22017、DB11/T 1462.32017、DB11/T 1462.42018、DB11/T 1462.52018; 本次为第一次修订。 DB11/T 18052020 1 实验动物 病理学诊断规范 1 范围
6、 本文件规定了实验动物病理学检查和诊断的检查规则、检查程序、兽医临床病理学诊断、兽医解剖 病理学诊断、病理学诊断报告。 本文件适用于实验小型猪、实验猪、实验牛、实验羊、实验狨猴、实验长爪沙鼠、实验雪貂、实验 猫、实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽、实验鱼(斑马鱼和剑尾鱼)的病理学检查和诊断。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 实验动物 laboratory animal 经人工饲育,对其携带的微生物和寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,用于科学研究、 教学、生产、检定以及其他科学实验的动物。 来源:GB 149252010,
7、3.1 3.2 兽医临床病理学诊断 veterinary clinicopathologic diagnosis 用生物化学、微生物学、血液学、细胞学及分子生物学等方法,分析动物的体液和组织等,对动物 健康状况进行判断。 3.3 兽医解剖病理学诊断 veterinary anatomicopathologic diagnosis 通过肉眼、显微镜、免疫学等方法对动物的机体、器官和组织进行形态学检查,对动物健康状况进 行判断。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 RBC:红细胞(Red Blood Cell) HGB:血红蛋白(Hemoglobin) HCT:红细胞比积 (Hematocrit
8、) DB11/T 18052020 2 MCV:平均红细胞体积(Mean Corpuscular Volume) MCH:平均红细胞血红蛋白含量(Mean Corpuscular Hemoglobin) MCHC:平均红细胞血红蛋白浓度(Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration) RDW:红细胞分布宽度(Red Cell Distribution Width) PLT:血小板(Platelet) PCT:血小板压积(Thrombocytocrit) PDW:血小板分布宽度(Platelet Distribution Width) MPV:平均血小板体积
9、(Mean Platelet Volume) WBC:白细胞(White Blood Cell) BAS:嗜碱性粒细胞(Basophile Granulocyte) NEUT:中性粒细胞(Neutrophile Granulocyte) LYM:淋巴细胞(Lymphocyte) MON:单核细胞(Monocyte) EOS:嗜酸性粒细胞(Eosinophile Granulocyte) TP:总蛋白(Total Protein) ALT:丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase) ALB:白蛋白(Albumin) AST:天门冬氨酸氨基转移酶(Asparagus Am
10、inotransferase) ALP:碱性磷酸酶(Alkalin Phosphatase) CK:肌酸激酶(Creatine Kinase) LDH:乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase) CRE:肌酐(Creatinine) BUN:尿素氮(Blood Urea Nitrogen) GLU:葡萄糖(Glucose) T-CHO:总胆固醇(Total Cholesterol) T-BIL:总胆红素(Total Bilirubina) TG:甘油三酯(Triglyceride) 5 检查规则 5.1 检查频率 每3个月至少应检查1次。 5.2 抽样要求 根据群体大小,选择适宜
11、年龄的实验动物用于检测,随机抽样。抽样年龄、抽样数量按照表1的规 定执行。 表1 抽样方式 分类 抽样年龄(月龄) 群体大小及抽样数量(只/头/羽/尾) 小型猪 6 群体数量100,抽样数量5; 群体数量100500,抽样数量10; 群体数量500,抽样数量15。 猪 2 牛 6 DB11/T 18052020 3 表 1 抽样方式(续) 分类 抽样年龄(月龄) 群体大小及抽样数量(只/头/羽/尾) 羊 2 群体数量100,抽样数量5; 群体数量100500,抽样数量10; 群体数量500,抽样数量15。 狨猴 6 长爪沙鼠 2 雪貂 6 猫 6 鸡 1 鸭 1 鹅 1 鸽 1 斑马鱼 3 同
12、一水环境内:群体数量100,抽样数量为5; 群体数量100,按5%比例抽样,最大抽样量为30。 剑尾鱼 6 检查程序 检查程序见图1。程序I适用于小型猪,猪,牛,羊,狨猴,雪貂,猫;程序II适用于长爪沙鼠,鸡, 鸭,鹅,鸽,斑马鱼,剑尾鱼。 a 指结合临床病理学和微生物学、寄生虫学等检查结果及实验目的,如发现异常则进行大体解剖和组织病理学诊断。 图1 检查程序 7 兽医临床病理学诊断 7.1 大体检查 大体检查内容见附录A。 7.2 血液学及血液生物化学检查 DB11/T 18052020 4 7.2.1 采样满足以下要求: 采血时间:采血前应禁食8 h20 h,从动物福利角度出发,宜缩短禁食
13、时间。 采血量:采血量满足检查需求即可。 用于血液学检查的样品采用相应规格的抗凝管采集,室温条件下储存不超过4 h,4 条件下 不超过12 h。 用于血液生物化学检查的样品室温静置30 min60 min,之后3 000 rpm 离心5 min,取血 清用于检测;若静置后不能及时处理,则应确保冷链运输直至离心。 用于血液生物化学检查的血清样品密封、避光储存,室温条件下不超过 12 h,4 条件下不 超过24 h。 7.2.2 血液学项目及指标正常值参考范围见附录B。 7.2.3 血液生物化学项目及指标正常值参考范围见附录C。 8 兽医解剖病理学诊断 8.1 处死 综合考虑实验动物福利,按照表2
14、的规定执行。 表2 常用安死术 动物种类 安死术 注意事项 小型猪、猪、牛、羊 电击 采用电击作为安死术时,应确保足够大的电流通过大脑诱导动 物意识丧失以及癫痫性肌肉痉挛。应避免接受电击的动物出现 意识恢复的迹象,如有节奏的呼吸,翻正反射,发出声音,眨 眼或捕捉移动的物体等 长爪沙鼠 二氧化碳 二氧化碳最佳的流速为每分钟置换密闭盒1030%的体积;暴露于二氧化碳后需确保动物死亡 狨猴、雪貂、猫、鸡、 鸭、鹅、鸽 静脉注射巴比妥类药物或巴 比妥酸衍生物等麻醉剂 致死剂量一般为麻醉剂量的三倍,未建立静脉通路时也可进行 腹腔注射 斑马鱼、剑尾鱼 2 4 水中快速冷却 成年鱼浸泡约10 min直至鳃动
15、停止 8.2 大体解剖 8.2.1 解剖程序 8.2.1.1 实验小型猪、实验猪、实验牛、实验羊、实验狨猴、实验长爪沙鼠、实验雪貂、实验猫解剖 程序如下: a) 体表检查; b) 皮下检查; c) 剖开腹腔做一般视检; d) 取出腹腔脏器并检查; e) 取出骨盆腔脏器并检查; f) 剖开胸腔作一般视检; g) 取出胸腔脏器并检查; DB11/T 18052020 5 h) 取出口腔和颈部器官并检查; i) 剖开颅腔,取出头部器官并检查; j) 剖开脊椎管,取出脊髓并检查; k) 肌肉、关节和淋巴结检查; l) 骨和骨髓检查。 8.2.1.2 实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽解剖程序如下: a)
16、体表检查; b) 剥离腹部皮肤及胸肌,进行胸肌和皮下检查; c) 脱臼髋关节,检查股骨头; d) 打开胸腹腔作一般视检; e) 取出胸腹腔脏器并检查; f) 自眼部前方剪开上喙,检查鼻腔; g) 取出口腔和颈部器官并检查; h) 剖开颅腔,取出头部器官并检查; i) 检查骨骼与膝关节; j) 检查腿肌和坐骨神经。 8.2.1.3 实验斑马鱼、实验剑尾鱼解剖程序如下: a) 体表检查; b) 自泄殖孔向背侧剪至脊柱,沿侧线下方剪至鳃盖后缘,再由鳃盖后缘剪至下颚; c) 揭起体壁肌肉暴露胸腹腔后,剪开鳃盖,作一般视检; d) 取出胸腹腔内脏器,并检查; e) 打开围心腔,摘除心脏,并检查; f)
17、取出鱼鳔,并检查; g) 取出肾脏,并检查; h) 检查眼; i) 检查脊髓; j) 检查肌肉和骨骼。 8.2.2 检查内容 8.2.2.1 实验小型猪、实验猪、实验牛、实验羊、实验狨猴、实验长爪沙鼠、实验雪貂、实验猫检查 内容如下: 被皮系统:被毛、皮肤、皮下脂肪; 呼吸系统:鼻腔、肺、气管和支气管; 循环系统:心包、心包液和心脏、主动脉、肝门部位的血管; 消化系统:口腔、食管、胃(牛、羊需检查瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃)、肠道(十二指肠、空 肠、回肠、盲肠、结肠、直肠)、肝脏、胆管、胆囊、胰腺; 泌尿系统:肾脏、膀胱; 生殖系统:睾丸、附睾、前列腺、精囊腺、卵巢、输卵管、子宫、阴道、乳腺; 免
18、疫系统:胸腺、体表淋巴结、肺门淋巴结、脾脏和脾门淋巴结、肠系膜淋巴结; 神经内分泌系统:大脑、小脑、脑干、垂体、肾上腺、甲状腺、甲状旁腺; 骨骼与肌肉系统:肌肉、关节、骨、骨髓。 8.2.2.2 实验鸡、实验鸭、实验鹅、实验鸽检查内容如下: 被皮系统:羽毛、皮肤; DB11/T 18052020 6 呼吸系统:鼻腔、喉头、气管、气囊、肺脏; 循环系统:心脏; 消化系统:口腔、食管黏膜、嗉囊(鸡、鸽)、腺胃、肌胃、肠道、泄殖腔、肝脏、胆囊(鸡、 鸭、鹅)、胰腺; 泌尿系统:肾脏、输尿管; 生殖系统:卵巢、输卵管、睾丸; 免疫系统:脾脏、胸腺、腔上囊; 神经系统:坐骨神经、臂神经、迷走神经、脑;
19、骨骼与肌肉系统:胸肌、腿肌、肋骨软骨交界处、长骨骨骺、胫跗骨及趾坚硬度、骨髓、关节。 8.2.2.3 实验斑马鱼、实验剑尾鱼检查内容如下: 被皮系统:鳞片、侧线、皮肤; 呼吸系统:鳃、鳔; 循环系统:心脏; 消化系统:口腔、胃肠道、肝胰脏、胆囊; 泌尿系统:肾脏; 生殖系统:精巢、卵巢; 免疫系统:脾脏; 神经系统:脊髓; 感官系统:眼球。 骨骼与肌肉系统:肌肉、骨骼。 8.3 兽医组织病理学诊断 8.3.1 检查内容 对心、肝(鱼的肝胰脏)、脾、肺(鱼的鳃和鳔)、肾、胃、肠、睾丸/卵巢及输卵管(鱼的精巢/ 卵巢)等主要器官,大体解剖检查发现异常的组织器官,以及根据实验目的需要检查的组织器官进
20、行兽 医组织病理学检查。 8.3.2 组织取材 取材要求见附录D。 8.3.3 病理组织制片 常规石蜡切片,伊红-苏木精染色,必要时应用免疫组织化学或特殊染色等方法进行染色。 8.3.4 阅片及诊断 由兽医病理师或兽医病理学专业技术人员完成。 9 病理学诊断报告 9.1 诊断报告书要求 病理学诊断报告书应使用规范的病理学术语及诊断标准,表述准确,条理清晰,具有时效性、真实 性、科学性。 DB11/T 18052020 7 9.2 诊断报告内容 诊断报告内容包括: a) 背景信息:送检单位、动物来源、动物编号、品种/品系、性别、年龄、体重、标本取材部位、 固定方法等; b) 兽医临床病理学诊断:
21、检查所用仪器,外观检查描述(未进行解剖病理学检查时),血液学及 血液生物化学检测指标、检测结果及正常值参考范围,兽医临床病理学诊断结果等。如外观发 现有异常变化,应附有相应的图片; c) 兽医解剖病理学诊断:检查所用仪器,外观检查描述,大体解剖病理变化描述,组织切片病理 变化描述,兽医解剖病理学诊断结果等。如发现有异常变化,应附有相应的图片; d) 结论与讨论:给出病理诊断结论,若出现病变则需对可能的原因进行分析讨论,必要时附参考 文献。 9.3 诊断报告确认 诊断报告应由兽医病理师或兽医病理学专业技术人员出具并签字。诊断结果如有争议则可进行同行 评议。 DB11/T 18052020 8 A
22、 A 附 录 A (资料性) 实验动物大体检查 A.1 实验小型猪、实验猪、实验牛、实验羊大体检查 A.1.1 精神状态检查 健康动物通常表现为两眼有神,耳、尾活动灵活,对外界刺激反应迅速,行动敏捷,动作协调,对 检查人员的行为有正常反应。精神状态异常表现为精神兴奋、精神抑制、精神沉郁、嗜睡和昏迷等,具 体如下: 精神兴奋:表现亢奋、躁动不安,竖耳、刨地、嚎叫,严重者乱冲乱撞、狂奔乱跑,对人类活 动反应过激,踢咬; 精神抑制:表现为离群呆立,萎靡不振,低头耷耳、双目半闭,对外界刺激反应迟钝,行动迟 缓,严重者卧地不起; 精神沉郁:为轻度抑制现象,动物表现为对周围事物注意力减弱,反应迟钝,离群呆
23、立,低头 耷耳,双目半闭或全闭,行动无力,躲于角落,对饲养员召唤无反应; 嗜睡:为中度抑制现象,患病动物重度萎靡,闭眼似睡,只在受到强烈刺激时,才能产生迟钝 的和暂时的反应,但很快又陷入沉睡状态; 昏迷:为高度抑制现象,患病动物意识完全丧失,卧地不起,呼唤不应,全身肌肉松弛,反射 消失,甚至出现瞳孔散大,粪尿失禁;对外界刺激无反应,仅保留自主神经系统活动,心搏和 呼吸虽仍然存在,但多变慢而节律不齐。 A.1.2 体格与发育检查 体格与发育检查包括: 发育良好:动物结构匀称,肌肉丰满,体格强壮有力; 发育不良:动物多表现为躯体矮小,结构不匀称,关节粗大,胸廓狭窄,肢体扭曲变形,体格 纤弱无力。
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