DB11 T 1462.3-2017 实验动物 病理学诊断规范 第3部分 实验用羊.pdf
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1、ICS 65.020.30 B 44 备案号:56004-2017 DB11 北京市地方标准 DB11/T 1462.32017 实验 动物 病理 学诊 断规 范 第 3 部分 :实 验用 羊 Laboratory animalSpecification of pathological diagnosis Part3: Experimental sheep and goat 2017 - 09 - 14 发布 2018 - 01 - 01 实施 北京市质量技术监督局 发布DB11/T 1462.32017 目 次 前言 II 1 范围 1 2 术语和定 义 1 3 缩略语 1 4 检查规则 2
2、 5 检查程序 2 6 临床病理 学检查 3 7 解剖病理 学检查 4 8 结果判定 5 9 检查结论 6 附录 A (资料 性附录) 实验用羊大体检查细则 7 附录 B (资料 性附录) 实验用羊血液学指标正常值参考范围 . 11 附录 C (资料 性附录) 实验用羊血液生物化学指标正常值参考范围 . 12 附录 D (资料 性附录) 实验用羊组织取材要求 . 13 参考文献 18 I DB11/T 1462.32017 前 言 DB11/T 1462实验动物 病理学诊断规范拟分为以下部分: 第1 部 分:实验用猪; 第2 部 分:实验用牛; 第3 部 分:实验用羊; 本部分为DB11/T
3、1462的第3 部分。 本部分按照GB/T 1.12009 给出的规 则起草。 本部分由北京市科学技术委员会提出并归口。 本部分由北京市科学技术委员会组织实施。 本部分起草单位: 中国农业大学、 北京市实验动物管理办公室、 解放军总医院、 国家卫生计生委科 学技术研究所。 本部分主要起草人: 杨利峰、 李根平、 赵德明、 赖梦雨、 周向梅、 王锡乐、 刘文菊、 陈华、 孙德明 。 II DB11/T 1462.32017 实验动 物 病理 学诊断 规范 第3 部分 :实验 用羊 1 范围 本部分规定了实验用羊病理学检查的内容和方法, 包括检查规则、 检查程序、 临床病理学检查、 解 剖病理学检
4、查、结果判定和检查结论等。 本部分适用于实验用羊病理学病理学检查和诊断。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 实验用羊 experimental sheep and goat 经人工饲育, 对其携带的病原微生物和寄生虫实行控制, 遗传背景明确或者来源清楚, 用于科学研 究、教学、生产和检定以及其他科学实验的羊。 2.2 兽医临床病理学 veterinary clinical pathology 用化学、 微生物学、 血液学及分子生物学等方法对患病动物的体液 (血液和尿液) 和组织等进行实 验室分析,从而对疾病进行诊断的学科。 2.3 兽医解剖病理学 veterinary an
5、atomical pathology 通过肉眼、 显微镜、 免疫学等方法对患病动物的机体、 器官和组织的形态学进行检查, 并对疾病做 出诊断的学科。 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 ALT :丙 氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase ) B :嗜碱 性粒细胞(basophil ) BUN :血 清尿素氮(blood urea nitrogen ) CRE :肌 酐(creatinine ) DC:白 细胞分类(differential count ) E :嗜酸 性粒细胞(eosinophil ) GLU :葡 萄糖(glucose ) HGB :血 红蛋白(
6、hemoglobin ) 1 DB11/T 1462.32017 L :淋巴 细胞(lymphocyte ) M :单核 细胞(monocyte ) N :嗜中 性粒细胞性(neutrophil ) PLT :血 小板(platelet ) RBC :红 细胞(red blood cell ) TG:甘 油三酯(triglyceride ) T CHO:总胆固醇(Total cholesterol) WBC :白 细胞(white blood cell) 4 检查规则 4.1 检查频率 普通级和SPF 级实验用羊 每6 个月至少 检查1 次。对 疑似患病动 物,结合临 床病理学、 微生物或寄生
7、 虫检测结果,必要时进行采样和组织病理学检查。 4.2 抽样要求 4.2.1 方式 选择成年实验用羊用于检测,随机抽样。 4.2.2 数量 根据群体大小,抽样数量见表 1 。 表 1 抽样数量 群体大小(头) 抽样数量 小于100 不少于5头 100500 不少于10头 大于500 不少于15头 5 检查程序 检查程序 如图1 所示。 2 DB11/T 1462.32017 图1 检查程序 6 临床病理学检查 检查项目参见附录A 。 6.1 血液学检查 6.1.1 采样要求 采血时 间:采血前禁食12h 。 采血部位:颈静脉。 采血量:不少于2.0 mL ,采用相应规格的EDTA K2抗凝管
8、。 标本储存条件:室温条件下不超过8 h 。 6.1.2 检测项目 RBC ,WBC ,HGB ,PLT ,DC。 6.1.3 正常参考值 实验用羊血液学指标正常参考值参见附录B 。 6.2 血液生物化学检查 3 DB11/T 1462.32017 6.2.1 采样要求 采血时间:采血前禁食12h 。 采血部位:颈静脉。 采血量:不少于2.0mL 。 标本处理:室温放置30min 60min ,3000rpm 离心5min,取 血清用于检测。 标本储存条件:血清标本密封、避光保存,室温条件下不超过12h ,4 条件下不超过24h 。 6.2.2 检测项目 ALT ,CRE ,BUN ,GLU
9、,TG,T CHO 。 6.2.3 正常参考值 实验用羊血液生物化学指标正常参考值参见附录C 。 7 解剖病理学检查 7.1 检查原则 结合临 床病理学、微生物或寄生虫检查结果,必要时进行解剖病理学检查。 7.2 大体解剖 7.2.1 解剖程序 体表检查 皮下检查 剖开腹腔 做 一般视检 摘出腹腔 脏 器并检查 摘出骨盆 腔 脏器并检 查剖 开胸腔作一般视检摘出胸腔脏器并检查摘出口腔和颈部器官并检查剖开颅腔, 摘出头部器官并检 查剖开脊椎管,摘出脊髓并检查肌肉、关节和淋巴结检查骨和骨髓检查。 7.2.2 检查内容 体表:被毛、皮肤、天然孔、营养状况。 皮下: 脂肪 、 乳腺、 淋巴结 (颌下淋
10、巴结、 颈浅淋巴结、 腋下淋巴结、 腘淋巴结) 、 睾丸、 附睾。 头颈部:口腔、鼻腔、大脑、小脑、脑干、垂体、甲状腺、甲状旁腺。 胸腔:胸腔液、胸腺、心包、心包液和心脏、主动脉、肺和肺门淋巴结、气管和支气管。 腹腔:腹腔液、脾脏和脾门淋巴结、肝脏、胆囊、肝门部位的血管、胆管和淋巴结、胰腺、肾脏、 肾上腺、 胃 (瘤胃、 网 胃、 瓣胃、 皱胃) 、 肠 道 (十二指肠、 空肠、 回肠、 盲肠、 结肠、 直 肠) 、 肠系 膜淋巴结。 盆腔:膀胱、前列腺、精囊腺、卵巢、输卵管、子宫、阴道。 7.3 组织病理学检查 7.3.1 检查内容 对心、肝、 脾、肺、肾 、胃、肠、 淋巴结、睾 丸/ 卵巢
11、等主 要器官,以 及大体解剖 检查发现异 常的 组织和器官进行组织病理学检查。 7.3.2 组织取材 4 DB11/T 1462.32017 取材要求参见附录 D 。 7.3.3 病理组织制片 常规石蜡切片,伊红- 苏 木精染色,必要时进行免疫组织化学鉴定。 7.3.4 阅片及诊断 由具有病理诊断经验和资质的病理学专业人员进行。 8 结果判定 8.1 临床病理学检查结果判定 8.1.1 判定标准 临床病理学检查结果分为四个等级, 分别为未见异常、 轻微异常、 中度异常和明显异常, 判定标准 如下: a) 未见异常:动物外观无异常,同时血液化验指标均在正常参考值范围内; b) 轻微异常: 动物外
12、观无明显异常, 但是血液化验指标有 1 2 项异常升 高或降低, 最大变异不 超过正常参考值范围临界值的 20% ; c) 中度异常: 1) 动物外观无 明显异常, 但是超过 2 项血液化验 指标异常升 高或降低, 最大变异达 到正常 参考值范围临界值 20% 50% ; 2) 动物外观轻微或中度异常, 同时超过 2 项血液 化验指标异常升高或降低, 最大变异达到正 常参考值范围临界值 20%50% 。 d) 明显异常: 1) 动物外观无 明显异常, 但是超过 2 项血液化验 指标异常升 高或降低, 最大变异超 过正常 参考值范围临界值的 50%; 2) 动物外观轻微或中度异常, 同时超过 2
13、 项血液 化验指标异常升高或降低, 最大变异超过正 常参考值范围临界值的 50% ; 3) 动物外观明显异常。 8.1.2 结果确认 临床病理学检查结果若出现异常变化需要重复检测一次。 如果两次检测结果不相符, 对于血液学指 标需再以显微镜检测做最终判定, 对于血液生物化学指标则需再做第三次检测, 以其中两次一致的结果 为准。 普通级实验用羊临床病理学检查结果判定为明显异常时; 无特定病原体级实验用羊临床病理学检 查结果判定为中度异常或明显异常时,需结合微生物和寄生虫检测结果,进行解剖病理学检查。 8.2 解剖病理学检查结果判定 8.2.1 判定标准 解剖病理学 检查结果为4 分评定法, 分为
14、五个等 级,分别为 未见异常、 轻微病变、 中度病变、 严重 病变、非常严重病变,判定标准参见表2 。 5 DB11/T 1462.32017 表 2 解剖病理学检查 4 分评定法 得分 描述 定义 0 未见异常 在研究条件下,考虑到年龄、性别和动物的负荷等因素,认为组织正常。 1 轻微病变 表现出的变化程度刚刚超过正常范围。 2 中度病变 通常情况下,病变能被轻易认出,但尚不严重。 3 严重病变 病变显著,但很有发展到更加严重的可能。 4 非常严重病变 组织器官大面积区域发生病变。 8.2.2 结果判定 普通级实验用羊病理学检查结果为未见异常或轻微或中度病变时, 判定合格; 发现严重或非常严
15、重 病变判定为不合格。 无特定病原体级实验用羊病理学检查结果为未见异常或轻微病变时, 判定合格; 发现中度、 严重或 非常严重病变判定为不合格。 临床病病理学与解剖病理学检查结果不一致时,依据解剖病理学检查结果做出结果判定。 8.2.3 结果确认 解剖病 理学检查报告应由具有病理诊断经验和资质的病理学专业人员进行签署, 必要时检查结果需 要同行复核。 9 检查结论 20% 及以 上的抽检实验用羊不合格时,判定该群实验用羊不合格。 6 DB11/T 1462.32017 A 20% 及以上的 抽检实验用羊不合格时,判定该群实验用羊不合格。 A 附 录 A (资料性附录) 实验用羊大体检查细则 A
16、.1 精神状态检查 A.1.1 健康动物通常表现为两眼有神, 耳、 尾活动灵活, 对外界刺激反应迅速, 行动敏捷, 动作协调, 对检查人员的行为有正常反应。 A.1.2 精神状态异常常表现为: 精神兴奋: 表现亢奋、 躁动不安, 竖耳、 刨地、 嚎叫, 严 重者乱冲乱撞、 狂奔乱跑, 对人 类 活 动反应过激,踢咬; 精神抑制: 表现为离群呆立, 萎靡不振, 低头耷耳、 双目半闭, 对外界刺激反应迟钝, 行动迟 缓,严重者卧地不起; 精神沉郁: 为轻度抑制现象, 动物表现为对周围事物注意力减弱, 反应迟钝, 离群呆立, 低头 耷耳,双目半闭或全闭,行动无力,躲于角落,对饲养员召唤无反应; 嗜睡
17、: 为中度抑制现象, 患病动物重度萎靡, 闭眼似睡, 只在给以强烈的刺激才能产生迟钝的 和暂时的反应,但很快又陷入沉睡状态; 昏迷: 为高度抑制现象, 患病动物意识完全丧失, 卧地不起, 呼唤不应, 全身肌肉松弛, 反射 消失, 甚至出现瞳孔散大, 粪尿失禁; 对外界刺激无反应, 仅保留自主神经系统活动, 心搏和 呼吸虽仍然存在,但多变慢而节律不齐。 A.2 体格与发育检查 A.2.1 发育良好:动物结构匀称,肌肉丰满,体格强壮有力。 A.2.2 发育不良: 动物多表现 为躯体矮小 ,结构不匀 称,关节粗 大,胸廓狭 窄,肢体扭 曲变形,体 格 纤弱无力。 A.3 营养状况检查 A.3.1 营
18、养良好: 表现为八九 成膘,肌头 丰满,皮下 脂肪充实, 躯体圆润, 骨骼棱角不 显露,被毛 平 顺有光泽,皮肤富有弹性。 A.3.2 营养不良: 表现为消瘦 ,五成膘以 下,肌肉和 皮下脂肪薄 ,骨骼棱角 显露,肋骨 可数,被毛 蓬 乱、无光泽,皮肤缺乏弹性,常伴有精神不振和乏力。 A.3.3 营养中等:表现为六七成膘,介于营养良好和营养不良之间。 A.3.4 营养过剩:主要指体内中性脂肪蓄积过多,表现为超重。 A.4 姿势与体态检查 动物的姿势与体态,指其在相对静止或运动过程中的空间位置和呈现的姿态。异常情况表现如下: 典型木马样姿态: 出现头颈平伸、 肢体僵硬、 四肢关节不能屈曲、 尾根
19、挺起、 鼻孔张开、 瞬膜 露出、牙关紧闭等表现; 7 DB11/T 1462.32017 站立不稳:呈躯体歪斜、摇晃,四肢叉开或依靠墙壁等支撑物站立的姿态; 持久站立:指动物较长时间(超过数小时)站立而不愿意卧下的现象; 肢蹄避免负重:动物四肢发生疼痛性疾病时,站立时呈不自然的姿势; 其他典型的异常站立姿势有保持前高后低体位、 前肢交叉长时间不改变的站立姿势、 头颈歪斜、 转圈、低头静立、劈叉站立姿态等; 强迫躺卧:当驱赶和吆喝时动物仍卧地不起,不能自行起身和站立; 犬坐姿势:动物呈前肢直立而后肢弯曲,类似犬猫常见坐姿的姿势。 A.5 运动与行为检查 健康动物在运步时,肢体运作协调一致,灵活自
20、然。 A.6 呼吸频率及上呼吸道简单检查 A.6.1 羊的呼吸频率为1220 次/min。 A.6.2 呼出气检查:健康动物两侧鼻孔呼出气的气流强度一致,稍有温热感,无特殊气味。 A.6.3 鼻及鼻液检 查:检查鼻 部外形,观 察鼻粘膜颜 色、有无肿 胀、水疱、 溃疡、结节 合损伤等, 检 查鼻液的量与性质。 A.7 被毛检查 A.7.1 健康动物的被毛整洁,平滑而有光泽。 A.7.2 常见的被毛 异常包括被 毛粗乱、无 光,换毛迟 缓,易脱落 ,局部性脱 毛,尾部及 后肢被毛被 粪 便、尿液及其他分泌物或排泄物污染,毛色异常等。 A.8 皮肤检查 A.8.1 健康动物的 皮肤应呈淡 粉红色;
21、温 度以股内侧 最高,头颈 、躯干次之 ,尾及四肢 最低,且具 有 一定的均匀性;在安静状态下,皮肤具有湿润感;弹性良好,完整无破溃。 A.8.2 常见的皮肤异常表现为: 常见的皮肤颜色异常包括皮肤苍白、皮肤黄染、皮肤发绀和皮肤潮红等; 皮温不整指身体不同部位皮温相差悬殊,对称部位皮温不均匀; 常见的皮肤湿度异常包括出汗减少或无汗,鼻部干燥或龟裂,病理性出汗和出冷汗等; 皮肤疱疹: 应注意疱疹出现和消失的时间、 分布部位、 形态大小、 颜色及变化规律等, 同时注 意有无瘙痒、 脱屑等现象, 根据形态或发生原因可以分为斑疹、 丘疹、 荨麻疹、 饲料疹、 痘疹、 水疱、脓疱、脱磷屑等; 创伤:外力
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