DB33 T 748.1-2009 北冬虫夏草栽培技术规程 第1部分 菌种.pdf

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1、 ICS 65.020 B 39 备案号： 25655-2009 DB33 浙江省 地方标准 DB 33/T 748.1 2009 北冬虫夏草栽培技术规程 第 1 部分：菌种 Cordyceps militaris（ L.） Link Practice specification for cultivation technology Part 1: Spawn 2009 - 05 - 13 发布 2009 - 06 - 13 实施 浙江省质量技术监督局 发布 DB33/748.1 2009I前 言DB33/748 2009北 冬虫 夏草 栽培 技术 规程 按 部分 发布 ，分 为三 个部 分：

2、 第 1部分 菌种 ； 第 2部分 栽培 技术 规程 ； 第 3部分 质量 安全 要求 。本部 分为 DB33/748 2009的第 1部分 。本部 分的 4.4、 7.2为强 制性 条款 ，附 录 A为规 范性 附录 。本部 分由 浙江 省农 业厅 提出 并归 口。 本部 分起 草单 位： 浙 江 博士 园生 物技 术有 限公 司、 景 宁 畲族 自治 县农 业局 、 景 宁 畲族 自治 县质 量 技术监 督局 。 本部 分主 要起 草人 ：刘 卿、 吴邦 仁、 林多 聪、 刘宁 、汤 慧、 刘宇 、梅 旭东 。DB33/748.1 20091北冬虫夏草栽培技术规程 第 1部分：菌种1范围

3、本部 分规 定了 北冬 虫夏 草菌 种的 术语 和定 义、 要 求、 试 验方 法、 检 验规 则、 标 识、 包 装、 贮 存、 保质期 、运 输。 本部 分适 用于 北冬 虫夏 草菌 种生 产。2规范 性引 用文 件下列 文件 中的 条款 通过 本标 准的 引用 而成 为本 标准 的条 款。凡 是 注日 期的 引用 文件 ，其 随 后所 有 的修改 单 （ 不 包括 勘误 的内 容） 或 修 订版 均不 适用 于本 标准 ， 然 而 ， 鼓 励 根据 本标 准达 成协 议的 各方 研 究是否 可使 用这 些文 件的 最新 版本 。凡 是不 注日 期的 引用 文件 ，其 最新 版本 适用 于

4、本 标准 。 GB/T191包装 储运 图示 标志/6388运输 包装 收发 货标 志GB/T12728食用 菌术 语食 用菌 菌种 管理 办法 （ 中华 人民 共和 国农 业部 第 62号令 发布 ）3术语 和定 义 GB/T12728食用 菌术 语中 确定 的术 语和 定义 适用 于本 部分 。3.1北冬 虫夏 草又名 北虫 草、 蛹虫 草， 属于 子囊 菌纲 ，球 壳目 ，麦 角菌 科， 虫草 属真 菌。 北虫 草的 寄主 昆虫 豆天 蛾 (Clanisbilneatawalker)属鳞 翅目 ，天 蛾科 。只 发生 在豆 天蛾 的幼 虫上。 3.2菌丝 （球 ） 自溶菌龄 过长 、高

5、温影 响、 导致 生理 老化 、菌 丝（ 球） 解体 而产 生黄 色代 谢水 的现 象。3.3分生 孢子 生于 分生 孢子 梗上 ，一 种无 性孢 子。3.4豆天 娥粉 把 豆 天 蛾 (一 种 属 天 蛾 科 、 鳞 翅 目 的 天 蛾 )干 燥 后 碾 制 成 粉 末 。4菌种 制作 要求4.1品种 选用应选 用种 性好 、抗 逆性 强， 对当 地自 然环 境适 应的 种源 。4.2容器DB33/748.1 200924.2.1母种 采用 玻璃 试管 。4.2.2原种 采用 常规 玻璃 三角瓶 250m L1000m L，栽 培种 采用 发酵 罐。4.2.3各级 菌种 采用 棉塞 或其 他

6、能 满足 正常 发菌 要求 的材 料进 行容 器封 口。4.3母种 制作4.3.1培养 基采用 PDA培养 基或 改良 PDA培养 基。4.3.2PDA培养 基配 方马铃 薯 200g、葡 萄糖 20g、琼 脂 18g 20g、水 1000m L。4.3.3改良 PAD培养 基配 方马铃 薯 200g、葡 萄糖 20g、磷 酸二 氢钾 2g、硫 酸镁 1.5g，琼 脂 18g 20g，水 1000m L。4.3.4制作 方法将去 皮马 铃薯 切片 置容 器内 加水 1000m L，煮 沸 15m in，过 滤， 加入 葡萄 糖和 琼脂 ，补 足水 至 1000m L， 加 热 溶解 ； 琼 脂

7、 溶解 后， 用 分装 器装 入试 管中 ， 装 量 为试 管长 的 1/5， 塞 上 棉塞 。 置 灭 菌锅 中， 在0.1Mpa压力 下灭 菌 0.5h，自 然落 磅； 将试 管趁 热排 放在 斜面 板上 冷却 。4.3.5转管 扩繁经出草鉴定合格的母种。以 1:20 1： 30进行转管，在 22 25 环境中培养，菌丝长满试管斜面即 可使 用。 4.3.6贮存母种 一般 在冰 箱中 保藏 ，保 藏温 度为 4 5 。4.4原种 、栽 培种 制作4.4.1培养 基配 方 一 （ %） ： 玉 米 粉 2%、 葡 萄 糖 2%、 蛋 白 胨 1%、 酵 母 粉 0.5%、 KH2PO40.1

8、%、 MgSO40.05%、 pH6.5配 方 二（ ）：马 铃 薯 20%玉米 粉 3%、葡 萄 糖 2%、蛋 白 胨 0.3%、 、240.15%、 gS40.05%、 6.54.4.2装瓶按比 例将 培养 料均 匀装 入三 角瓶 中， 500m L三角 瓶装 液量 为 100m L 200m L，用 棉塞 封口 。4.4.3灭菌在 0.11Mpa压力 下热 力灭 菌 2h。4.4.4接种培养 料冷 却到 24 以下 ，在 无菌 条件 下接 种， 每支 母种 接 1瓶原 种； 每 300m L原种 接 10L栽 培 种 。4.4.5培养静置 培养 48h后， 置 于 摇床 上进 行振 荡培

9、 养， 140r/m in 160r/m in， 22 25 ， 培 养 4天 6天 。4.4.6贮存原种、栽培种在适温 4 16 、干燥（相对湿度 60% 70%）、通风、清洁、避光的室内整罐保藏 。4.5要求4.5.1感官 要求4.5.1.1母种 感官 要求母种 感官 要求 应符 合表 1的规 定。4.5.1.2原种 、栽 培种 感官 要求原种 、栽 培种 感官 要求 应符 合表 2的规 定。表 1母种 感官 要求DB33/748.1 20093表 2原种 、栽 培种 感官 要求4.5.2质量 要求4.5.2.1母种 质量 要求母种 无角 变、 害虫 、杂 菌、 积水 、菌 丝自 溶、 脱

10、壁 、高 温圈 。4.5.2.2原种 、栽 培种 质量 要求原种 、栽 培种 无杂 质、 原基 ，培 养液 澄清 、色 泽棕 黄、 气味 香甜 。5试验 方法5.1感官 要求菌丝 （球 ）状 态、 原基 、菌 皮、 色泽 、培 养液 、发 菌程 度采 用目 测鼻 嗅、 镜检 。5.2质量 要求角变 、害 虫、 杂菌 、积 水、 菌丝 （球 ）自 溶、 脱壁 、高 温圈 采用 目测 或观 察镜 、显 微镜 镜检 。6检验 规则6.1组批6.1.1母种 组批以分 离时 间、 方法 、培 养条 件一 致的 母种 为一 个组 批。6.1.2原种 、栽 培种 组批以制 作同 一方 法、 时间 、培 养条

11、 件的 原种 、栽 培种 为一 个组 批。6.2出场 检验每批 菌种 出场 前， 按 4.3要求 制作 的菌 种逐 支（ 瓶、 罐） 检验 ，按 4.5要求 进行 全项 检验 ，检 验合 格后并 附有 合格 证的 菌种 方可 出场 。项目 指标菌丝状态 菌丝色泽洁白，平伏、浓密、均匀，无分生孢子，无角变。原基 无菌皮 发菌程度 菌丝长满料面培养物气味 有北冬虫夏草菌种特有的香味，无酸、臭、霉等异味。培养物镜检 菌丝粗壮，无杂菌菌丝及孢子，无虫及虫卵。项目 指标菌丝状态 絮状菌丝体杂质 无原 基 无培养液 澄清色泽 黄棕色气味 独特北冬虫夏草香味培养物镜检 菌球密集，无杂菌菌丝DB33/748.

12、1 200946.3判定 规则按质 量要 求进 行检 测， 检验 项目 全部 符合 质量 要求 者， 为合 格菌 种 ;其中 任何 一项 不符 合要 求者 要求， 均为 不合 格菌 种。 6.4生产 过程 档案应符 合 食 用菌 菌种 管理 办法 （ 中华 人民 共和 国农 业部 第 62号令 发布 ） 。7标识 、标 签、 保质 期7.1标识 、标 签7.1.1出 售的 菌种 必须 贴有 标签 及标 记。 标 明防 潮、 防 晒、 防压 并应 符合 GB/T191、 GB/T6388的 规定。 7.1.2标签 应清 晰标 明菌 种名 称、 级别 、生 产单 位、 接种 日期 等。7.2保质 期7.2.1母 种在 4.3.6环境 中保 藏期 达到 150d则应 转管 ，转 管扩 繁不 超过 3代。7.2.2原种 、栽 培种 从接 种之 日起 ，在 4.4.6环境中 3d 7d为有 效。8菌种 标签 要求 见附 录 A。DB33/748.1 20095附 录 A（规 范性 附录 ）菌种 标签 （式 样）表 A.1菌种 标签 （式 样）菌种种类 品种 级别接种日期 保藏条件 保质期菌种生产经营许可 证编号执行标准生产者名称 生产地点