DB23 T 2544—2019 黑穗醋栗组织培养育苗技术规程.pdf

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1、ICS 65.020.20B 05 DB23黑 龙 江 省 地 方 标 准DB 23/T 2544 2019黑 穗 醋 栗 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程 2019 - 12 - 25 发 布 2020 - 01 - 24 实 施黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB23/T 25442019 1 前 言本 标 准 依 据 GB/T 1.1-2009 的 编 写 规 则 起 草 。本 标 准 由 黑 龙 江 省 市 场 监 督 管 理 局 提 出 。本 标 准 起 草 单 位 ： 黑 龙 江 省 农 业 科 学 院 乡 村 振 兴 科 技 研 究 所 。本 标 准 主

2、 要 起 草 人 ： 张 鹍 、 宋 德 禄 、 李 施 扬 、 段 亚 东 、 宋 鹏 慧 、 刘 海 军 、 刘 凤 芝 、 秦 栋 、 杨 春 梅 、梁 文 卫 、 杨 光 、 周 双 、 李 鹏 举 、 武 新 娟 、 杨 大 志 、 纪 志 贤 。 DB23/T 25442019 2 黑 穗 醋 栗 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程1 范 围本 标 准 规 定 了 黑 穗 醋 栗 （ Ribes nigrum L.） 组 织 培 养 育 苗 技 术 的 培 养 基 的 制 备 、 消 毒 灭 菌 、 材 料的 选 择 与 处 理 、 初 代 培 养 、 继 代 培 养 、 生

3、根 培 养 、 炼 苗 和 移 栽 及 生 产 档 案 。本 标 准 适 用 于 黑 穗 醋 栗 组 织 培 养 育 苗 技 术 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 注 日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。 GB/T8321（ 所 有 部 分 ） 农 药 合 理 使 用 准 则NY/T1276 农 药 安 全 使 用 规 范 总 则L

4、Y/T 1882-2010 林 木 组 织 培 养 育 苗 技 术 规 程3 培 养 基 的 制 备培 养 基 配 制 按 LY/T 1882-2010中 规 定 执 行3.1 初 代 培 养 基MS + 1.0 mg L -1 6-BA + 0.1 mg L-1 IBA + 0.5 mg L-1 GA3 + 30 g L-1 蔗 糖 ， pH 5.8。3.2 继 代 培 养 基MS + 2.0 mg L-1 6-BA + 0.2 mg L-1IBA+ 30 g L-1 蔗 糖 ， pH 5.8。3.3 生 根 培 养 基1/2 MS+0.1 mg L-1 IBA +20 g L-1 蔗 糖

5、， pH 5.8。3.4 培 养 基 保 存灭 菌 后 的 培 养 基 放 入 接 种 室 ， 常 温 条 件 下 7 d 内 使 用 ， 2 4 条 件 下 14 d 内 使 用 。 培 养 基 应保 存 于 洁 净 环 境 中 ， 注 意 避 光 和 防 尘 。 4 消 毒 灭 菌4.1 材 料 消 毒 灭 菌将 采 取 的 植 条 用 饱 和 洗 衣 粉 水 漂 洗 10 min， 流 水 冲 洗 2 h后 置 超 净 工 作 台 上 用 75 %的 酒 精 消 毒 ， 无菌 水 荡 洗 3次 ， 每 次 3 min， 再 用 0.1 %升 汞 消 毒 ， 无 菌 水 荡 洗 5次 ，

6、每 次 3 min， 最 后 用 无 菌 滤 纸 吸 干 植物 材 料 表 面 的 水 分 。 DB23/T 25442019 3 4.2 培 养 基 灭 菌瓶 装 培 养 基 需 在 12 h 内 完 成 灭 菌 ， 采 用 高 压 蒸 汽 灭 菌 锅 灭 菌 ， 在 压 力 1.1 MPa、 温 度 121 条 件下 灭 菌 20 min。4.3 器 具 的 消 毒 灭 菌剪 子 、 镊 子 、 烧 杯 等 接 种 器 具 用 高 压 灭 菌 锅 在 压 力 1.1 MPa， 温 度 121 以 下 灭 菌 20 min。5 材 料 的 选 择 与 处 理5.1 材 料 的 选 择从 生

7、长 健 壮 、 无 病 虫 害 的 母 株 上 选 取 半 木 质 化 枝 条 、 茎 尖 作 为 材 料 。 5.2 接 种取 下 培 养 瓶 的 封 口 膜 ， 将 培 养 瓶 口 和 镊 子 在 酒 精 灯 外 焰 上 旋 转 灼 烧 消 毒 并 冷 却 后 ， 把 茎 段 、 茎 尖 切割 成 0.5 cm 0.8 cm 后 接 种 到 培 养 基 中 ， 每 个 培 养 瓶 放 3 个 5 个 外 植 体 ， 接 种 后 盖 上 封 口 膜 ， 并 标注 日 期 。6 初 代 培 养6.1 培 养 条 件培 养 室 的 温 度 控 制 在 25 3 ， 空 气 相 对 湿 度 70

8、% 80 %， 光 照 强 度 1000 Lx， 光 照 周 期 6 h/d。6.2 培 养 方 法外 植 体 生 长 约 30 d 左 右 ， 高 5 cm后 ， 剪 成 1.0 cm 1.2 cm 的 小 段 接 种 到 初 代 培 养 基 中 。 7 继 代 培 养7.1 培 养 条 件培 养 室 的 温 度 控 制 在 25 3 ， 空 气 相 对 湿 度 70 % 80 %， 光 照 强 度 2000 Lx 3000 Lx， 光 照周 期 6 h/d。7.2 培 养 方 法在 无 菌 操 净 工 作 台 上 ， 将 初 代 培 养 30 d左 右 生 长 健 壮 的 小 苗 的 顶

9、芽 或 腋 芽 萌 发 形 成 的 丛 生 芽 ， 分 割成 带 单 芽 的 茎 段 ， 接 种 于 继 代 培 养 基 中 。 每 隔 25 d 30 d将 继 代 苗 转 接 至 相 同 培 养 基 上 继 续 培 养 。8 生 根 培 养 8.1 培 养 条 件培 养 条 件 按 本 标 准 6.1规 定 执 行8.2 培 养 方 法 DB23/T 25442019 4 待 继 代 培 养 苗 长 至 高 度 2 cm 3 cm时 ， 接 种 于 生 根 培 养 基 中 。9 炼 苗 和 移 栽9.1 炼 苗生 根 20 d左 右 、 根 系 1.0 cm 1.5 cm时 ， 及 时 移

10、 栽 。 移 栽 前 2 d 3 d先 松 开 瓶 口 1 d后 再 打 开 瓶 口 ,置 于 温 度 25 3 、 通 风 、 清 洁 的 地 方 ， 不 应 阳 光 直 射 。9.2 移 栽9.2.1 移 植 准 备选 择 温 度 、 光 照 适 宜 ， 保 温 、 保 湿 的 温 室 或 塑 料 棚 内 进 行 。 选 用 50孔 或 70孔 穴 盘 ， 基 质 为 壤 土 、 草炭 土 和 沙 子 混 合 ， 比 例 2： 1： 1。 也 可 选 用 直 径 5 cm、 高 5cm的 蔬 菜 育 苗 钵 或 塑 料 营 养 钵 ， 用 500倍 800 倍 敌 克 松 溶 液 消 毒

11、， 移 栽 前 浇 透 水 。9.2.2 移 栽将 组 培 苗 从 瓶 中 取 出 ， 放 入 20 左 右 的 水 中 ， 将 附 在 根 上 的 培 养 基 洗 去 ， 勿 伤 根 系 ， 根 系 过 长 的要 适 当 修 剪 。 将 清 洗 后 的 组 培 苗 用 镊 子 将 其 栽 入 准 备 好 的 穴 盘 或 营 养 钵 中 ， 栽 后 及 时 浇 透 水 。9.3 移 栽 后 的 管 理9.3.1 水 份栽 后 2 d 3 d淋 一 次 水 ， 定 植 后 10 d 20 d内 湿 度 控 制 在 80 % 100 %， 当 第 一 片 新 叶 展 开 后 ， 此后 湿 度 一

12、直 控 制 在 70 %左 右 。9.3.2 温 度 温 度 保 持 在 15 30 。9.3.3 光 照移 栽 15 d内 ， 光 照 强 度 控 制 在 2000 Lx 5000 Lx。9.3.4 病 虫 害 防 治主 要 病 虫 害 防 治 方 法 如 下 ：a） 白 粉 病 ： 可 采 用 啶 酰 菌 胺 +醚 菌 脂 防 治 ；b） 蚜 虫 ： 可 采 用 啶 虫 脒 防 治 。农 药 使 用 按 GB/T 8321和 NY/T 1276规 定 执 行 。10 生 产 档 案 应 建 立 生 产 档 案 。 包 括 ： 培 养 基 的 制 备 、 消 毒 灭 菌 、 材 料 的 选 择 与 处 理 、 初 代 培 养 、 继 代 培 养 、 生根 培 养 、 炼 苗 和 移 栽 、 病 虫 害 防 治 等 。