DB13 T 2754-2018 山楂叶螨检疫鉴定方法.pdf
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1、ICS 65.020 B 16 DB13 河北省 地方标准 DB 13/T 2754 2018 山楂叶螨检疫鉴定方法 2018 - 07 - 16 发布 2018 - 08 - 16 实施 河北省质量技术监督局 发布 DB13/T 2754 2018 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由河北出入境检验检疫局提出。 本标准起草单位:河北出入境检验检疫局检验检疫技术中 心,河北省森林病虫害防治检疫站 , 北 京市海淀区农业执法大队 。 本标准主要起草人:娄巧哲、李静、王建昌、孙晓霞、任卫红、 周长青、 项佳 林 、胡连霞、崔佳 玉 、谷青。 DB13/T 2
2、754 2018 1 山楂叶螨检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了山楂叶螨 Amphitetranychus viennensis (Zacher)的检疫鉴定方法 。 本标准适用于植物 及其产品 中山楂叶螨的检疫和鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅 注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 28069-2011 根螨检疫鉴定方法 SN/T 1148-2002 植物检疫 木薯单爪螨检疫鉴定方法 3 术语和定义 GB/T 28069和 SN/T 1148界定的 术语和定义适用于
3、本文件。 3.1 双毛 duplex setae 为叶螨科多数种类足 I、 II跗节具有的特殊结构,由两根基部紧靠在一起的刚毛组成,一般端侧的 一根为感毛,粗而长,也称为大毛( macrochaeta),基侧的一根为触毛,细小,也称为小毛( microchaeta)。 足 I跗节一般具 2对双毛,端侧的一对称为前双毛或端侧双毛,基侧的一对称为后双毛或基侧双毛。 3.2 感毛 sensory seta 分布在须肢跗节或各足的跗节和胫节,为化学物质的受纳器。细长或粗短,或特化成柱 形、纺锤 形、刺状等,末端圆钝,壁薄,光滑无毛。须肢跗节基部的 1根感毛多呈梭形或小枝状,称为背感器, 亚端部的 2根
4、呈刺状,端部的感毛通常发达,呈柱形、锥形等,称为端感器。 3.3 骶毛 sacral seta 末体前部按横向排列的二对刚毛,外侧的一对称为外骶毛,内侧的称为内骶毛。 3.4 肛侧毛 para-anal seta 肛门两侧着生的肛毛外侧的 1 2对毛。 3.5 DB13/T 2754 2018 2 生殖盖 genital flap 叶螨科生殖孔四周具有放射状的、深刻的表皮皱褶,其前部呈半圆形的、比较光滑的为生殖盖。 3.6 阳具 aedeagus 为 叶螨的雄性外 生殖器,一般是比较坚硬的、高度几丁质化的构造,其形状多种多样。当螨体侧 面封固时,阳具的形状才可表现完整。结构分为柄部( shaf
5、t)和钩部( hook),钩部有时膨大形成端 锤( terminal knob)。 4 山楂叶螨 的基本信息 学名: Amphitetranychus viennensis (Zacher) 中文名: 山楂叶螨 ,又名山楂双叶螨 英文名: hawthorn spider mite 分类地位: 蛛形纲( Arachnida)、蜱螨亚纲( Acari)、真螨目( Acariformes)、叶螨科 ( Tetranychidae)、双叶螨属( Amphitetranychus)。 山楂叶螨 主要危害 寄主植物 的叶片, 在叶片反面吐丝结网,在丝网下取食,发生数 量大时也 在叶 片正面 为 害,叶片受
6、害部位呈灰黄色斑点,严重时逐渐扩大,致使叶片枯焦,造成早期落叶,严重影 响果实的产量和质量。山楂叶螨主要分布在 包含 中国(东北、西北、华北、华南等地) 在内的亚洲、 欧洲、北美洲、大洋洲 的多个国家和地区 ,是危害苹果、梨、桃、山楂、 海棠、杨树、 木槿 等多种 植 物 的重要害虫 。 ( 参 见附录 A) 5 方法原理 根据 山楂叶螨 的分布、寄主及危害状、生物学特性进行寄主检查,依据成 螨的形态特征进行种类 鉴定。 6 器材 和 试剂 6.1 器材 与用具 放大镜、体视显微镜、生物显微镜、测微尺、离心管、自封袋、酒精灯、镊子、滤纸、解剖针、 吸管、小毛笔、载玻片、盖玻片、标签 、烘箱 。
7、 6.2 试剂 及配置 6.2.1 乙醇 -甘油保存液 70 %乙醇和甘油以 50: 1的 体积比 配置而成。 6.2.2 霍氏封固液 30 g 阿拉伯胶, 200g 水合三氯乙醛, 20g 甘油, 50m l蒸馏水;配制时,按上述比例使阿拉伯胶 溶于蒸馏水中,至完全溶解后,置 40 50的水浴加热,加 入 水合三氯乙醛,搅拌至溶解,加人甘 油,最后用抽气漏斗过滤。 DB13/T 2754 2018 3 6.2.3 埃蔡氏封固液 在 10 g聚乙烯醇中加 入 40 mL 60 mL蒸馏水,置 100水浴上加热,搅拌至完全溶解。再加 入 85% 92%的乳酸 35 mL和 10 mL甘油,搅拌均
8、匀。冷却至微温后,加 入 1.5%的苯 酚水溶液 25 mL和 20 g水合三 氯乙醛,最后过滤。 7 寄主检查 对可能 感染 山楂叶螨的 植物及其产品 进行检查, 重点检查茎干粗翘皮下、芽、幼茎、幼叶、老叶、 果洼等处 , 在现场用放大镜仔细查找,特别检查结有丝网造成卷曲、有 黄色斑点、褪绿、变形、变黑 等症状 的植物器官,如发现疑似虫体 ,用小毛笔挑起放入装有 乙醇 -甘油保存液 的离心管中,或连同寄 主 植物 或部分器官、组织 一起置于自封袋中,贴好信息标签,带回实验室 镜 检。 8 标本制作 先在洁净的载玻片中央滴一滴霍氏封固液或埃蔡氏封固液(二者可任选一种),用吸管从 乙醇 - 甘油
9、 保存液中吸取成螨至滤纸上,用蘸有封固液的解剖针从滤纸上迅速粘取螨虫标本至封固液中,也 可直接取活螨于封固液中,盖上盖玻片;用镊子夹取载玻片放于酒精灯外焰上加热,至胶液沸腾后立 刻离开,让螨虫虫体完全伸展,玻片置 40 50烘箱干燥,玻片制成后置生物显微镜观察鉴定,并 在盖玻片左侧粘贴记录标签 ,注明标本号、寄主植物、采集(截获)时间、采集地点(原产 地)、采 集人等信息 。 9 形态鉴定 9.1 鉴定方法 使用生物显微镜观察 玻片标本的 形态特征,使用目镜测微尺或摄像软件 中 的测量工具测量 长、宽 等 。 9.2 双叶螨属形态鉴定特征 双叶螨属具有以下形态特征 ( 参 见附录 B) : 背
10、毛细长,共 26根,不着生于突起上,其长度超过横列间距; 气门沟末端呈网状; 足 I跗节具 2对双毛,彼此远离。爪间突缺少背中毛; 生殖盖表皮纹横向,生殖盖前区表皮纹纵向; 末体具肛侧毛 1对; 雄螨阳具弯向背面。 9.3 山楂叶螨形态鉴定特征 9.3.1 雌螨 山楂叶螨雌螨具有以下形态特征 ( 参 见附录 B和 附录 C): 体长(含喙) 0.54 0.59 mm,体宽 0.28 0.36mm, 椭圆形,深红色,足及颚体部分桔黄色 , 越冬雌螨桔红色 ; DB13/T 2754 2018 4 须肢端感器短锥形,其长度与基部宽度略等 , 背感器小枝状,其长略短于端感器 ; 气门沟末端呈网状 ;
11、 后半体背表皮纹 均为 横向,不构 成菱形图形。背毛正常 ; 足 I跗节爪间突裂开为 3对 针状毛。足 I跗节双毛近基侧有 4根触 毛和 1根感毛,其中 1根感毛位 于基侧双毛的同一水平线,端侧双毛的腹面有 2根触毛;胫节有 9根触毛和 1根感毛。足 II跗节双毛近基 侧有 2根触毛和 1根感毛,另 1触毛在双毛近旁,双 毛腹面有 2根触毛;胫节有 6根触毛。足 III、 IV跗节 各有 9根触毛和 1根感毛;胫节各有 6根和 7根触毛。 9.3.2 雄螨 山楂叶螨雄螨具有以下形态特征 ( 参 见附录 B和 附录 C): 体长 (含喙)约 0.43 mm,体宽 约 0.20 mm。体色桔黄 ;
12、 须肢端感器短锥形,但较雌螨细小 , 背感器略长于端感器 ; 足 I跗节爪间突呈 1对粗壮的刺毛,其背腹面各具 1对纤细的针状毛。足 II IV爪间突同雌螨。 足 I跗节双毛近基侧有 4根触毛和 3根感毛,其中 1根感毛与基侧双毛位于 同一水平,端侧双 毛的腹面有 2 根触毛;胫节有 9根触毛和 4根感毛。足 II跗节双毛近基侧有 3根触毛和 1根感毛,双毛腹面有 2根触毛; 胫节有 6根触毛。足 III、 IV跗节和胫节毛数同雌螨 ; 阳具末端与柄部呈直角弯向背面,形成与柄部垂直的端锤,其近侧突起短小,尖利,远侧突 起向背面延伸,其端部逐渐尖细。 9.3.3 卵 直径 0.16 mm。圆球形
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