1、ICS 65.020 B 16 DB13 河北省 地方标准 DB 13/T 2754 2018 山楂叶螨检疫鉴定方法 2018 - 07 - 16 发布 2018 - 08 - 16 实施 河北省质量技术监督局 发布 DB13/T 2754 2018 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由河北出入境检验检疫局提出。 本标准起草单位:河北出入境检验检疫局检验检疫技术中 心,河北省森林病虫害防治检疫站 , 北 京市海淀区农业执法大队 。 本标准主要起草人:娄巧哲、李静、王建昌、孙晓霞、任卫红、 周长青、 项佳 林 、胡连霞、崔佳 玉 、谷青。 DB13/T 2
2、754 2018 1 山楂叶螨检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了山楂叶螨 Amphitetranychus viennensis (Zacher)的检疫鉴定方法 。 本标准适用于植物 及其产品 中山楂叶螨的检疫和鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅 注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 28069-2011 根螨检疫鉴定方法 SN/T 1148-2002 植物检疫 木薯单爪螨检疫鉴定方法 3 术语和定义 GB/T 28069和 SN/T 1148界定的 术语和定义适用于
3、本文件。 3.1 双毛 duplex setae 为叶螨科多数种类足 I、 II跗节具有的特殊结构,由两根基部紧靠在一起的刚毛组成,一般端侧的 一根为感毛,粗而长,也称为大毛( macrochaeta),基侧的一根为触毛,细小,也称为小毛( microchaeta)。 足 I跗节一般具 2对双毛,端侧的一对称为前双毛或端侧双毛,基侧的一对称为后双毛或基侧双毛。 3.2 感毛 sensory seta 分布在须肢跗节或各足的跗节和胫节,为化学物质的受纳器。细长或粗短,或特化成柱 形、纺锤 形、刺状等,末端圆钝,壁薄,光滑无毛。须肢跗节基部的 1根感毛多呈梭形或小枝状,称为背感器, 亚端部的 2根
4、呈刺状,端部的感毛通常发达,呈柱形、锥形等,称为端感器。 3.3 骶毛 sacral seta 末体前部按横向排列的二对刚毛,外侧的一对称为外骶毛,内侧的称为内骶毛。 3.4 肛侧毛 para-anal seta 肛门两侧着生的肛毛外侧的 1 2对毛。 3.5 DB13/T 2754 2018 2 生殖盖 genital flap 叶螨科生殖孔四周具有放射状的、深刻的表皮皱褶,其前部呈半圆形的、比较光滑的为生殖盖。 3.6 阳具 aedeagus 为 叶螨的雄性外 生殖器,一般是比较坚硬的、高度几丁质化的构造,其形状多种多样。当螨体侧 面封固时,阳具的形状才可表现完整。结构分为柄部( shaf
5、t)和钩部( hook),钩部有时膨大形成端 锤( terminal knob)。 4 山楂叶螨 的基本信息 学名: Amphitetranychus viennensis (Zacher) 中文名: 山楂叶螨 ,又名山楂双叶螨 英文名: hawthorn spider mite 分类地位: 蛛形纲( Arachnida)、蜱螨亚纲( Acari)、真螨目( Acariformes)、叶螨科 ( Tetranychidae)、双叶螨属( Amphitetranychus)。 山楂叶螨 主要危害 寄主植物 的叶片, 在叶片反面吐丝结网,在丝网下取食,发生数 量大时也 在叶 片正面 为 害,叶片受
6、害部位呈灰黄色斑点,严重时逐渐扩大,致使叶片枯焦,造成早期落叶,严重影 响果实的产量和质量。山楂叶螨主要分布在 包含 中国(东北、西北、华北、华南等地) 在内的亚洲、 欧洲、北美洲、大洋洲 的多个国家和地区 ,是危害苹果、梨、桃、山楂、 海棠、杨树、 木槿 等多种 植 物 的重要害虫 。 ( 参 见附录 A) 5 方法原理 根据 山楂叶螨 的分布、寄主及危害状、生物学特性进行寄主检查,依据成 螨的形态特征进行种类 鉴定。 6 器材 和 试剂 6.1 器材 与用具 放大镜、体视显微镜、生物显微镜、测微尺、离心管、自封袋、酒精灯、镊子、滤纸、解剖针、 吸管、小毛笔、载玻片、盖玻片、标签 、烘箱 。
7、 6.2 试剂 及配置 6.2.1 乙醇 -甘油保存液 70 %乙醇和甘油以 50: 1的 体积比 配置而成。 6.2.2 霍氏封固液 30 g 阿拉伯胶, 200g 水合三氯乙醛, 20g 甘油, 50m l蒸馏水;配制时,按上述比例使阿拉伯胶 溶于蒸馏水中,至完全溶解后,置 40 50的水浴加热,加 入 水合三氯乙醛,搅拌至溶解,加人甘 油,最后用抽气漏斗过滤。 DB13/T 2754 2018 3 6.2.3 埃蔡氏封固液 在 10 g聚乙烯醇中加 入 40 mL 60 mL蒸馏水,置 100水浴上加热,搅拌至完全溶解。再加 入 85% 92%的乳酸 35 mL和 10 mL甘油,搅拌均
8、匀。冷却至微温后,加 入 1.5%的苯 酚水溶液 25 mL和 20 g水合三 氯乙醛,最后过滤。 7 寄主检查 对可能 感染 山楂叶螨的 植物及其产品 进行检查, 重点检查茎干粗翘皮下、芽、幼茎、幼叶、老叶、 果洼等处 , 在现场用放大镜仔细查找,特别检查结有丝网造成卷曲、有 黄色斑点、褪绿、变形、变黑 等症状 的植物器官,如发现疑似虫体 ,用小毛笔挑起放入装有 乙醇 -甘油保存液 的离心管中,或连同寄 主 植物 或部分器官、组织 一起置于自封袋中,贴好信息标签,带回实验室 镜 检。 8 标本制作 先在洁净的载玻片中央滴一滴霍氏封固液或埃蔡氏封固液(二者可任选一种),用吸管从 乙醇 - 甘油
9、 保存液中吸取成螨至滤纸上,用蘸有封固液的解剖针从滤纸上迅速粘取螨虫标本至封固液中,也 可直接取活螨于封固液中,盖上盖玻片;用镊子夹取载玻片放于酒精灯外焰上加热,至胶液沸腾后立 刻离开,让螨虫虫体完全伸展,玻片置 40 50烘箱干燥,玻片制成后置生物显微镜观察鉴定,并 在盖玻片左侧粘贴记录标签 ,注明标本号、寄主植物、采集(截获)时间、采集地点(原产 地)、采 集人等信息 。 9 形态鉴定 9.1 鉴定方法 使用生物显微镜观察 玻片标本的 形态特征,使用目镜测微尺或摄像软件 中 的测量工具测量 长、宽 等 。 9.2 双叶螨属形态鉴定特征 双叶螨属具有以下形态特征 ( 参 见附录 B) : 背
10、毛细长,共 26根,不着生于突起上,其长度超过横列间距; 气门沟末端呈网状; 足 I跗节具 2对双毛,彼此远离。爪间突缺少背中毛; 生殖盖表皮纹横向,生殖盖前区表皮纹纵向; 末体具肛侧毛 1对; 雄螨阳具弯向背面。 9.3 山楂叶螨形态鉴定特征 9.3.1 雌螨 山楂叶螨雌螨具有以下形态特征 ( 参 见附录 B和 附录 C): 体长(含喙) 0.54 0.59 mm,体宽 0.28 0.36mm, 椭圆形,深红色,足及颚体部分桔黄色 , 越冬雌螨桔红色 ; DB13/T 2754 2018 4 须肢端感器短锥形,其长度与基部宽度略等 , 背感器小枝状,其长略短于端感器 ; 气门沟末端呈网状 ;
11、 后半体背表皮纹 均为 横向,不构 成菱形图形。背毛正常 ; 足 I跗节爪间突裂开为 3对 针状毛。足 I跗节双毛近基侧有 4根触 毛和 1根感毛,其中 1根感毛位 于基侧双毛的同一水平线,端侧双毛的腹面有 2根触毛;胫节有 9根触毛和 1根感毛。足 II跗节双毛近基 侧有 2根触毛和 1根感毛,另 1触毛在双毛近旁,双 毛腹面有 2根触毛;胫节有 6根触毛。足 III、 IV跗节 各有 9根触毛和 1根感毛;胫节各有 6根和 7根触毛。 9.3.2 雄螨 山楂叶螨雄螨具有以下形态特征 ( 参 见附录 B和 附录 C): 体长 (含喙)约 0.43 mm,体宽 约 0.20 mm。体色桔黄 ;
12、 须肢端感器短锥形,但较雌螨细小 , 背感器略长于端感器 ; 足 I跗节爪间突呈 1对粗壮的刺毛,其背腹面各具 1对纤细的针状毛。足 II IV爪间突同雌螨。 足 I跗节双毛近基侧有 4根触毛和 3根感毛,其中 1根感毛与基侧双毛位于 同一水平,端侧双 毛的腹面有 2 根触毛;胫节有 9根触毛和 4根感毛。足 II跗节双毛近基侧有 3根触毛和 1根感毛,双毛腹面有 2根触毛; 胫节有 6根触毛。足 III、 IV跗节和胫节毛数同雌螨 ; 阳具末端与柄部呈直角弯向背面,形成与柄部垂直的端锤,其近侧突起短小,尖利,远侧突 起向背面延伸,其端部逐渐尖细。 9.3.3 卵 直径 0.16 mm。圆球形
13、,春季产卵呈橙黄色,夏季产的卵呈黄白色。 9.3.4 幼螨 3对足。初孵幼螨体长 0.16 mm,体圆形、黄白色,取食后卵圆形浅绿色,体背两侧出现深绿长斑。 9.3.5 若螨 4对足。前期若螨体背开始出现刚毛,两侧有明显墨绿色斑,后期若螨体较大,体形似成螨,但无 生殖孔可与成螨区 别。 10 结果 判定 以成螨鉴定特征为依据,其他特征作参考,符合 9.3.1或 9.3.2的描述 即可 鉴定 为山楂叶螨。 11 标本保存 玻片右侧粘贴定名标签,注明鉴定结果( 学名、中文名、鉴定人和鉴定日期),移入标本柜中保 存,以备复检。 DB13/T 2754 2018 5 A A 附 录 A (资料性附录)
14、 山楂叶螨的地理分布、寄主和生物学特性 A.1 地理分布 黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、陕西、宁夏、甘肃、青海、新疆、西藏、北京、山东、山西、河 北、河南、江苏、安徽、 浙江、福建、 湖北、 湖南、 江西、 广东、 广西、 四川、云南、香港、 台湾; 日本,朝鲜,韩国,乌兹别 克斯坦,巴基斯坦,伊朗,土耳其,阿塞拜疆,格鲁吉亚,奥地利,保加 利亚,波兰,德国,罗马尼亚,葡萄牙,瑞典,乌克兰,西班牙,英国,俄罗斯,美国,澳大利亚。 A.2 寄主 科 属或种 蔷薇科 Rosaceae 加拿大唐棣 Amelanchier canadensis,山桃 Amygdalus davidiana,木瓜属 Ch
15、aenomeles sp., Crataegus azarolus, Crataegus monogyna,山楂 Crataegus pinnatifida,草莓属 Fragaria sp.,草莓 Fragaria ananassa, Malus fomestica,楸子 Malus prunifolia,苹果 Malus pumila,变叶海棠 Malus toringo,欧揸属 Mespilus sp.,杏 Prunus armeniaca,欧洲甜 樱桃 Prunus avium,钟花樱桃 Prunus campanulata,樱桃李 Prunus cerasifera,欧洲酸 樱桃 Pr
16、unus cerasus, Prunus divaricata,欧洲李 Prunus domestica,欧洲酸樱桃 Prunus cerasus, Prunus divaricata,欧洲李 Prunus domestica,扁桃 Prunus dulcis,梅 Prunus mume,桃 Prunus persica,樱桃 Prunus pseudocerasus,李 Prunus salicina,黑刺李 Prunus spinosa,东京樱花 Prunus yedoensis,梨属 Pyrus sp.,西洋梨 Pyrus communis,沙梨 Pyrus pyrifolia, Rub
17、us allegheniensis,复盆子 Rubus idaeus,花楸属 Sorbus sp.,欧洲花 楸 Sorbus aucuparia 壳斗科 Fagaceae 栗属 Castanea sp.,栎属 Quercus sp., Quercus mongolica subsp. mongolica,橡树 Quercus rubra 杨柳科 Salicaceae 加杨 Populus canadensis,毛白杨 Populus tomentosa,柳 Salix gymrolepis 桦木科 Betulaceae 榛属 Corylus sp.,欧榛 Corylus avellana,榛子
18、 Corylus heterophylla 豆科 Leguminosae 落花生 Arachis hypogaea,洋槐 Robinia pseudoacacia 锦葵科 Malvaceae 棉属 Gossypium sp.,木槿 Hibiscus syriacus 茄科 Solanaceae 番茄 Lycopersicon esculentum,茄 Solanum melongena 椴树科 Tiliaceae 椴树属 Tilia sp.,椴树 Tilia tuan 紫葳科 Bignoniaceae 榅桲 Cydonia oblonga 虎耳草科 Saxifragaceae 溲疏属 Deut
19、zia sp. 桑科 Moraceae 无花果 Ficus carica 胡桃科 Juglandaceae 山核桃 Carya cathayensis 玄参科 Scrophulariaceae 白花泡桐 Paulownia fortunei 悬铃木科 Platanaceae 三球悬铃木 Platanus orientalis 夹竹桃科 Apocynaceae 鸡蛋花属 Plumeria sp. 禾本科 Gramineae 玉米 Zea mays 槭树科 Aceraceae 槭属 Acer sp. DB13/T 2754 2018 6 A.3 生物学特性 山楂叶螨 在北方果区一年发生 6 13代
20、 ,以受精雌成螨在主干、主枝和侧枝 的翘皮、裂缝、根颈周 围土缝、落叶及杂草根部越冬 。 第二年 4月上旬 开始出蛰危害, 到花芽开放时,大部分转移到花柄、花 萼等幼嫩组织处为害,常使嫩芽枯黄,不能开花展叶。 出蛰后一般多集中于树冠内膛局部危害,以后 逐渐向外堂扩散。 山楂叶螨喜高温干旱, 6月下旬至 7月中旬雨季到来之前一般为每年的 发生 高峰期。 山楂叶螨喜在叶背面隐蔽处 吐丝结网,在丝网下取食 为害 , 发生数量大时也可在叶片正面 为害, 叶片 受害部位呈灰黄色斑点,严重时逐渐扩大,致使叶片枯焦,造成早期落叶。 9 10月开始出现受精雌成 螨越冬。高温干旱条件下发生并危害重。 DB13/
21、T 2754 2018 7 附 录 B (资料性附录) 山楂叶螨成螨形态特征图 图 B.1 山楂叶螨 Amphitetranychus viennensis (Zacher)雌螨背面观(仿王慧芙, 1981) 图 B.2 山楂叶螨 Amphitetranychus viennensis (Zacher)局部特征图(仿王慧 芙, 1981) a.雌螨须肢跗节; b.雄螨须肢跗节; c. 气门沟; d.足 I 跗节爪和爪间突; e.阳具; f.雌螨足 I 跗节和胫节; g.雌螨足 II 跗节和胫节; h.雄螨足 I 跗节和胫节; i.雄螨足 II 跗节和胫节 。 DB13/T 2754 2018
22、8 附 录 C (资料性附录) 山楂叶螨及其常见近似种成螨检索表 1 气门沟末端呈网状;足爪间突缺少背中毛 山楂叶螨 Amphitetranychus viennensis (Zacher) 气门沟末端弯曲;足爪间突具有背中毛 叶螨属 Tetranychus 2 2 爪间突裂开为 2对针状毛;阳具不形成端锤 3 爪间突裂开为 3对针状毛;阳具形成端锤 4 3 阳具弯向背面的部分尖细,呈针状 斐济叶螨 Tetranychus fijiensis Hirst 阳具宽阔,弯向背面的部分几乎等宽 台湾叶螨 Tetranychus taiwanicus Ehara 4 足 I跗节基侧双毛和近基侧的触毛在
23、同一水平线上 5 足 I跗节基侧双毛和近基侧的触毛不在同一水平线上 6 5 阳具端锤宽于颈部;具远侧突起 野生叶螨 Tetranychus desertorum Banks 阳具端锤几乎不宽于颈部;不具远侧突起 卢氏叶螨 Tetranychus ludeni Zacher 6 夏型雌螨洋红、锈红或褐红色 7 夏型雌螨绿色或黄绿色 14 7 足 I 跗节基侧双毛的基侧毛为端侧毛长的 1/2 1/3 牡荆叶螨 Tetranychus viticis Ma et Yuan 足 I 跗节基侧双毛的基侧毛不长于端侧毛长的 1/3 8 8 爪间突具微小的背刺毛 9 爪间突无背刺毛 10 9 阳具端锤近侧突
24、起圆钝,远侧突起尖利 绣球叶螨 Tetranychus hydrangeae Pritchard et Baker 阳具端锤近侧突起尖利,远侧突起向背面延伸 豆叶螨 Tetranychus phaselus Ehara 10 阳具端锤卵圆形,两侧无突起 菜叶螨 Tetranychus neocaledonicus Andr 阳具端锤不呈卵圆形,其两侧具突起 11 11 阳具端锤极小,不易观察;远侧突起尖细 皮氏叶螨 Tetranychus piercei McGregor 阳具端锤较大,明显可见 12 12 阳 具 端 锤 的 宽 度 约 为 柄 部 背 缘 的 1/5 ; 呈 截 形 , 其
25、 背 缘 近 端 部 1/3 处 有 一 浅 凹 截形叶螨 Tetranychus truncatus Ehara 阳具端锤宽于柄部背缘的 1/5,其背缘无浅凹 13 13 阳具端锤较大,近侧突起圆钝,远侧突起尖利 神泽氏叶螨 Tetranychus kanzawai Kishida 阳具端锤较小,两侧突起尖利,长度约等 朱砂叶螨 Tetranychus cinnabarinus (Boisduval) 14 后半体背表皮纹均为横向,不构成菱形图形 冰草叶螨 Tetranychus agropyronus Wang 后半体第 3对背中毛之间和内骶毛之间的表皮纹纵向,构成菱形图形 15 15 阳具端锤与柄部呈一定角度;远侧突起较长 敦煌叶螨 Tetranychus dunhuangensis Wang 阳具端锤与柄部平行;两侧突起近于等长 16 16 阳 具 端 锤 大 型 ; 近 侧 突 起 圆 钝 , 远 侧 突 起 尖 利 ; 其 背 缘 近 端 侧 1/3 处 有 一 角 度 土耳其斯坦叶螨 Tetranychus turkestani (Ugarov et Nikolski) 阳具端锤较小;两侧突起尖利,近于等长 二斑叶螨 Tetranychus urticae Koch _