DIN 10161-2016 Microbiological analysis of meat and meat products - Aerobic count at 30 C - Drop plating method《肉和肉制品的微生物分析 30℃时需氧细菌的计数 滴板法》.pdf
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1、Dezember 2016DEUTSCHE NORM Preisgruppe 7DIN Deutsches Institut fr Normung e. V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e. V., Berlin, gestattet.ICS 07.100.30!%R-“2584710www.din.deDIN 10161Mikrobiologische Untersuchung von Fleisch un
2、d Fleischerzeugnissen Bestimmung der aeroben Keimzahl bei 30 C TropfplattenverfahrenMicrobiological analysis of meat and meat products Aerobic count at 30 C Drop plating methodAnalyse microbiologique de la viande et des produits base de viande Dnombrement des germes arobies 30 C Mthode des plaques d
3、e gouttesAlleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 BerlinErsatz frDIN 10161-2:1984-02www.beuth.deGesamtumfang 10 SeitenDDIN-Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL)DIN 10161:2016-12 2 Inhalt Seite Vorwort 3 1 Anwendungsbereich . 4 2 Normative Verweisungen . 4
4、 3 Begriffe 4 4 Kurzbeschreibung . 4 5 Bezeichnung 5 6 Chemikalien und Nhrboden 5 6.1 Allgemeines . 5 6.2 Nhrmedium 5 6.3 Verdnnungslsungen . 6 6.4 Leistungsprfung zur Qualittssicherung der Nhrmedien 6 7 Gerte . 7 8 Probenahme 7 9 Durchfhrung 8 9.1 Vorbereitung der Verdnnungsrhrchen und -kolben . 8
5、9.2 Vorbereitung der Probe 8 9.3 Herstellung der Erstverdnnung . 8 9.4 Herstellung weiterer Dezimalverdnnungen . 8 9.5 Beimpfung 8 9.6 Bebrtung . 8 10 Auswertung 9 10.1 Zhlen der Kolonien . 9 10.2 Berechnung der Keimzahl 9 11 Untersuchungsbericht . 10 DIN 10161:2016-12 3 Vorwort Diese Norm wurde vom
6、 DIN-Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte“, Arbeitsausschuss NA 057-01-06 AA Mikrobiologie der Lebensmittelkette“ erarbeitet. Es wird auf die Mglichkeit hingewiesen, dass einige Elemente dieses Dokuments Patentrechte berhren knnen. DIN ist nicht dafr verantwortlich, einige o
7、der alle diesbezglichen Patentrechte zu identifizieren. nderungen Gegenber DIN 10161-2:1984-02 wurden folgende nderungen vorgenommen: a) Umbenennung in DIN 10161, weil 2015-09 DIN 10161-1:1984-02 ersatzlos zurckgezogen wurde; b) Aufnahme von Abschnitt 2 Normative Verweisungen“; c) Aufnahme von Absch
8、nitt 3 Begriffe“; d) Aufnahme des neuen Unterabschnitts 6.4 Leistungsprfung zur Qualittssicherung der Nhrmedien“; e) technische und redaktionelle berarbeitung sowie Ergnzungen zwecks Anpassung an die derzeit gltigen Gestaltungsregeln. Frhere Ausgaben DIN 10161-2: 1984-02 DIN 10161:2016-12 4 1 Anwend
9、ungsbereich Diese Norm legt ein Verfahren zur Bestimmung der Anzahl vegetativer, aerober Mikroorganismen nach der Tropfplatten-Technik fest. Das Verfahren ist anwendbar bei Fleisch und Fleischerzeugnissen sowie Erzeugnissen mit einem Zusatz von Fleisch und Fleischerzeugnissen. 2 Normative Verweisung
10、en Die folgenden Dokumente, die in diesem Dokument teilweise oder als Ganzes zitiert werden, sind fr die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments
11、 (einschlielich aller nderungen). DIN EN ISO 6887-1, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungs-proben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnnungen fr mikrobiologische Untersuchungen Teil 1: Allgemeine Regeln fr die Herstellung von Erstverdnnun
12、gen und Dezimal-verdnnungen DIN EN ISO 6887-2, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungs-proben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnnungen fr mikrobiologische Untersuchungen Teil 2: Spezifische Regeln fr die Herstellung von Vorbereitung von
13、Fleisch und FleischerzeugnissenDIN EN ISO 11133, Mikrobiologie von Lebensmitteln, Futtermitteln und Wasser Vorbereitung, Herstellung, Lagerung und Leistungsprfung von Nhrmedien 3 Begriffe Fr die Anwendung dieses Dokuments gelten die folgenden Begriffe. 3.1 aerobe Mikroorganismen Mikroorganismen, die
14、 unter den in dieser Norm festgelegten aeroben Bedingungen wachsen 3.2 aerobe Keimzahl Anzahl der koloniebildenden Einheiten, die unter den in dieser Norm festgelegten aeroben Bedingungen wachsen 4 Kurzbeschreibung Agarplatten mit einem nicht selektiven Nhrboden werden in Sektoren aufgeteilt, die mi
15、t Teilmengen von jeweils 0,05 ml der unverdnnten, homogenisierten Probe oder der Erstverdnnung und der weiteren Ver-dnnungen tropfenweise beimpft werden. Bei einer Temperatur von 30 C wird unter aeroben Bedingungen 72 h bebrtet. Die Kolonien je Plattenausschnitt werden gezhlt (aerobe Koloniezahl) un
16、d auf die Anzahl der kolonie-bildenden Einheiten je g oder ml der Probe umgerechnet (aerobe Keimzahl). DIN 10161:2016-12 5 5 Bezeichnung Bezeichnung des Verfahrens zur Bestimmung der aeroben Keimzahl bei 30 C nach dieser Norm (B1): Prfung DIN 10161 B1 6 Chemikalien und Nhrboden 6.1 Allgemeines Die N
17、hrbodenbestandteile und Chemikalien mssen fr mikrobiologische Zwecke geeignet sein. Um vergleichbare Ergebnisse zu erhalten, wird empfohlen, eindeutig deklarierte Nhrbodenbestandteile und analysenreine Chemikalien oder Trockennhrbden zu verwenden. Den Anweisungen des Herstellers ist strikt zu folgen
18、. Das verwendete Wasser muss entweder destilliert oder entmineralisiert und mindestens von entsprechender Reinheit sein. Es darf keine Bestandteile enthalten, die das Wachstum von Mikroorganismen beeinflussen. 6.2 Nhrmedium 6.2.1 Keimzhlagar (en: Plate Count Agar, PCA) 6.2.2 Zusammensetzung Peptona5
19、,0 g Hefeextrakt 2,5 g Glucose, wasserfrei (C6H12O6) 1,0 g Agarb9 g bis 18 g Wasser 1 000 ml aZum Beispiel Casein, tryptisch verdaut. bAbhngig von der Gelfestigkeit des Agars. 6.2.3 Herstellung Die Nhrbodenbestandteile oder der Trockennhrboden werden in Wasser gelst. Der pH-Wert ist so einzustellen,
20、 dass er nach dem Sterilisieren bei 7,0 0,2 liegt, gemessen bei einer Temperatur von 25 C. Der Nhrboden wird in Kulturkolben bergefhrt und 15 min bei 121 C 1 C sterilisiert. 6.2.4 Herstellung der Agarplatten Teilmengen von etwa 15 ml des geschmolzenen Nhrbodens werden in sterile Petrischalen bergefh
21、rt und zum Verfestigen stehengelassen. Die Platten drfen fr bis zu 4 Wochen bei 5 C 3 C aufbewahrt werden. Unmittelbar vor der Verwendung werden die Platten mit der Agaroberflche nach unten, schrg auf dem abgenommenen Deckel liegend, in einem Brutschrank getrocknet, der auf eine Temperatur zwischen
22、25 C und 50 C eingestellt ist oder in einer Sicherheitswerkbank mit Laminarstrombelftung so lange, bis die Wassertrpfchen von der Oberflche des Mediums verschwunden sind. DIN 10161:2016-12 6 6.3 Verdnnungslsungen 6.3.1 Verdnnungslsung fr die Erstverdnnung Nach DIN EN ISO 6887-1. 6.3.2 Verdnnungslsun
23、g fr weitere Dezimalverdnnungen 6.3.2.1 Zusammensetzung Peptona1,0 g Natriumchlorid, NaCl 8,5 g Agar 0,75 g Wasser 1 000 ml aZum Beispiel Casein, tryptisch verdaut. 6.3.2.2 Herstellung Die einzelnen Bestandteile werden in Wasser gelst. Der pH-Wert ist so einzustellen, dass er nach dem Sterilisieren
24、bei 7,0 0,1 liegt. Wenn die Verdnnungslsung nicht unmittelbar nach der Herstellung ver-wendet wird, ist sie im Dunkeln und bei einer Temperatur zwischen 2 C und 8 C so aufzubewahren, dass keine Vernderungen des Volumens oder der Zusammensetzung eintreten knnen. Die Verdnnungslsung darf nicht lnger a
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