DIN 10135-2013 Microbiology of food and animal feeding stuffs - Polymerase chain reaction (PCR) for the detection of food-borne pathogens - Method for the detection of salmonella《食.pdf
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1、Mai 2013DEUTSCHE NORM Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL) im DINPreisgruppe 13DIN Deutsches Institut fr Normung e. V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e. V., Berlin, gestattet.ICS 07.100.30!$r#“
2、1957900www.din.deDDIN 10135Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zum Nachweis von pathogenenMikroorganismen in Lebensmitteln Verfahren zum Nachweis von SalmonellenMicrobiology of food and animal feeding stuffs Polymerase chain reaction (PCR) for the detect
3、ion of food-borne pathogens Method for the detection of salmonellaMicrobiologie des aliments Raction de polymrisation en chane (PCR) pour la dtection des micro-organismespathognes dans les aliments Mthode de recherche des salmonellaAlleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 BerlinErsatz
4、 frDIN 10135:1999-11www.beuth.deGesamtumfang 27 SeitenDIN 10135:2013-05 2 Inhalt Seite Vorwort . 3 1 Anwendungsbereich 4 2 Normative Verweisungen . 4 3 Begriffe 5 4 Symbole und Abkrzungen . 6 5 Kurzbeschreibung 7 6 Chemikalien und Reagenzien 8 7 Gerte . 9 8 Durchfhrung 10 9 Untersuchungsbericht . 11
5、 Anhang A (informativ) Thermischer Zellaufschluss . 12 Anhang B (informativ) Amplifikationskontrollen 13 Anhang C (informativ) PCR-ELISA zum Nachweis von Salmonellen 16 Anhang D (informativ) Real-time-PCR-Assay zum Nachweis von Salmonellen 21 Anhang E (informativ) Ringversuchsergebnisse 26 Literatur
6、hinweise . 27 DIN 10135:2013-05 3 Vorwort Diese Norm wurde vom Normenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte, Arbeitskreis NA 057-01-06-01 AK Polymerase-Kettenreaktion zum Nachweis von Mikroorganismen“, erarbeitet. Es wird auf die Mglichkeit hingewiesen, dass einige Texte dieses Doku
7、ments Patentrechte berhren knnen. Das DIN ist nicht dafr verantwortlich, einige oder alle diesbezglichen Patentrechte zu identifizieren. nderungen Gegenber DIN 10135:1999-11 wurden folgende nderungen vorgenommen: a) die Norm wurde in der Struktur gendert und enthlt neu die Anhnge A bis E; b) als wei
8、teres Verfahren wurde ein Real-time-PCR-Assay zum Nachweis von Salmonellen aufgenommen. Frhere Ausgaben DIN 10135: 1999-11 DIN 10135:2013-05 4 1 Anwendungsbereich Diese Norm legt ein Verfahren zum Nachweis von Salmonellen in Lebensmitteln und Futtermitteln und aus diesen gewonnenen Isolaten mit der
9、Polymerase-Kettenreaktion einschlielich der Real-time-PCR fest. Diese Norm gilt fr Erzeugnisse, die fr den menschlichen Verzehr oder als Futtermittel bestimmt sind, und fr Umgebungsproben im Bereich der Herstellung und der Behandlung von Lebensmitteln. 2 Normative Verweisungen Die folgenden Dokument
10、e, die in diesem Dokument teilweise oder als Ganzes zitiert werden, sind fr die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschlielich aller nde
11、rungen). DIN EN ISO 6579, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Horizontales Verfahren zum Nachweis von Salmonella spp. DIN EN ISO 6887-1, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungsproben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnnungen
12、 fr mikrobiologische Untersuchungen Teil 1: Allgemeine Regeln fr die Herstellung von Erstverdnnungen und Dezimalverdnnungen DIN EN ISO 6887-2, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungsproben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnnungen fr mikr
13、obiologische Untersuchungen Teil 2: Spezifische Regeln fr die Vorbereitung von Fleisch und Fleischerzeugnissen DIN EN ISO 6887-3, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungsproben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnnungen fr mikrobiologische
14、Untersuchungen Teil 3: Spezifische Regeln fr die Vorbereitung von Fisch und Fischerzeugnissen DIN EN ISO 6887-4, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungsproben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnnungen fr mikrobiologische Untersuchungen Te
15、il 4: Spezifische Regeln fr die Vorbereitung von anderen Erzeugnissen als Milch und Milcherzeugnissen, Fleisch und Fleischerzeugnissen, Fisch und Fischerzeugnissen DIN EN ISO 6887-5, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungsproben und Herstellung von Erstverdnn
16、ungen und von Dezimalverdnnungen fr mikrobiologische Untersuchungen Teil 5: Spezifische Regeln fr die Vorbereitung von Milch und Milcherzeugnissen DIN EN ISO 7218, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Allgemeine Anforderungen und Leitlinien fr mikrobiologische Untersuchungen DIN EN ISO
17、20837:2006-08, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zum Nachweis von pathogenen Mikroorganismen in Lebensmitteln Anforderungen an die Probenvorbereitung fr den qualitativen Nachweis (ISO 20837:2006); Deutsche Fassung EN ISO 20837:2006 DIN EN ISO 20838, Mi
18、krobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zum Nachweis von pathogenen Mikroorganismen in Lebensmitteln Anforderungen an Amplifikation und Nachweis bei qualitativen Verfahren DIN 10135:2013-05 5 DIN EN ISO 22118, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln
19、Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zum Nachweis und zur quantitativen Bestimmung von pathogenen Mikroorganismen in Lebensmitteln Leistungsmerkmale DIN EN ISO 22119, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Real-time-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zum Nachweis von pathogenen Mikroorganismen in
20、 Lebensmitteln Allgemeine Anforderungen und Begriffe DIN EN ISO 22174, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Polymerase-Kettenreaktion (PCR) zum Nachweis von pathogenen Mikroorganismen in Lebensmitteln Allgemeine Anforderungen und Begriffe 3 Begriffe Fr die Anwendung dieses Dokuments gel
21、ten die Begriffe nach DIN EN ISO 22174, DIN EN ISO 22119 und die folgenden Begriffe. 3.1 Salmonellen Gram-negative Bakterien aus der Familie der Enterobacteriaceae Anmerkung 1 zum Begriff: Die Gattung Salmonella umfasst die beiden Arten Salmonella enterica, mit sechs bekannten Unterarten, und Salmon
22、ella bongori. 3.2 Salmonellen-spezifische DNS-Sequenzen Genombereiche, die fr den spezifischen Nachweis von Salmonellen im Rahmen dieser Norm geeignet sind 3.3 PCR-ELISA PCR-Enzyme-Linked-Immuno-Sorbent-Assay Nachweisverfahren, bei dem Amplifikate an einer Festphase (z. B. in Mikrotiterplatten) durc
23、h immunochemische Detektion nachgewiesen werden 3.4 Real-time-Polymerase-Kettenreaktion Real-time-PCR enzymatisches Verfahren, bei dem die In-vitro-Amplifikation bestimmter DNS-Abschnitte durch einen Prozess der Denaturierung, Anlagerung (Annealing) spezifischer Primer und DNS-Synthese mit dem Nachw
24、eis spezifischer PCR-Produkte (Amplifikate) whrend des Amplifikationsprozesses kombiniert wird Anmerkung 1 zum Begriff: Im Allgemeinen enthlt das Reaktionsgemisch fr die Amplifikation eine oder mehrere spezifische DNS-Sonden, die mit einem oder mehreren Fluoreszenzfarbstoffen gekoppelt sind. Bei der
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