JJG 964-2001 毛细管电泳仪检定规程.pdf

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1、ZTZTG 中华人民共和国国家计量检定规程JJG 964-2001 毛细管电泳仪Capillary Electrophoresis Instrument 2001-07一06发布2001- 10-01实施国家质量监督检验检疫总局发布JJG 964- 2001 毛细管电泳仪检定规程Verification Regulation of JJG964-2001 : Capillary Electrophoresis Instrument 本规程经国家质量监督检验检疫总局于2001年07月06日批准，并自2001年10月01日起施行。归口单位:全国物理化学计量技术委员会主要起草单位:河北省计量测试研究

2、所参加起草单位:福建省计量科学技术研究所保定高新区天惠分离科学研究所北京市新技术应用研究所本规程委托全国物理化学计量技术委员会负责解释本规程主要起草人:刘增明方静郑吉鹏参加起草人:罗峰丁天惠王雅芬JJG 964- 2001 (河北省计量测试研究所)(河北省计量测试研究所)(河北省计量测试研究所)(福建省计量科学技术研究所)(保定高新区天惠分离科学研究所)(北京市新技术应用研究所)JJG 964-2001 目录11122678 式格制面配背式的(格求求制液书录要要控溶证记能术具准定定性技器布检检围述量用量ABC范概计通十、1录录录12345附附附JJG 964- 2001 毛细管电泳仪检定规程1

3、 范围本规程适用于带有紫外检测器的毛细管电泳仪的首次检定、后续检定和使用中检验。2 概述毛细管电泳仪(以下简称仪器)是根据在电解质溶液中，带电粒子在高压电场作用下，以不同的速度定向迁移的现象来达到组分分离的目的。各组分分离后通过检测器进行检测，并根据各组分的迁移时间和响应值进行定性、定量分析。电泳的支持物是弹性石英毛细管。仪器主要由高压电源、进样器、毛细管柱、检测器、数据处理系统等几部分构成，工作原理见图1。毛细岱检测器数据处理系统缓冲浓池l旬以tl:!.源图1毛细管电泳仪工作原理3 计量性能要求3.1 中心波长误差:土2nm;滤光片半宽度:15 nm (固定波长紫外检测器)。3.2 波长示值

4、误差:!:2日m;波长重复性:1 nm (连续可调波长紫外检测器)。3.3 基线漂移:0.002 AUIh。3.4 基线噪声:0.0005 AU。3.5 检测限:1 X 10 -6 g/ml (维生素B6)03.6 高压电源JJG 964-2001 3 .6.1 电压范围:030 kV，示值误差为:t2.0%。3 .6.2 电流范围:0300A，示值误差为:t3.0%。3.6.3 稳定性观察3min内电压稳定性1.5%。3.7 定性、定量测量重复性3.7.1 定性测量重复性误差(8次测量)定性1.5%。3.7.2 定量测量重复性误差(8次测量)8定值3.0%。4 通用技术要求4 . 1 仪器外

5、观4. 1.1 仪器应有下列标志:名称、型号、制造厂名、生产日期、产品编号、标志、电源电压和频率、最大功率。4. 1. 2 仪器应能平稳置于工作台上，各紧固件均应紧固良好，各调节器、按键和开关均能正常工作。4. 1.3 电缆线的接插件均应紧密配合，接触良好。4.2气路系统:气路处于正常工作条件下，将气路末端堵住，用皂膜液涂抹各接头，应元气泡产生。4.3 绝缘电阻:绝缘电阻应大于10MO。5 计量器具控制计量器具控制包括:首次检定、后续检定和使用中检验。5.1 检定条件5. 1.1 检定环境条件5. 1.1.1 环境温度:(20 :t 5) c 5.1.1.2 环境湿度:相对温度运85%RH5.

6、 1.2 供电电源:(220士22)V , (50士5)Hz。5. 1. 3 检定用设备5.1.3.1 秒表:分度值0.1s。5. 1.3.2 分析天平:最大称量200g，最小分度为0.1mg。5.1.3.3 电流表:0500A， 1.0级。5. 1.3 .4 静电电压表:0 30 k V , 0.5级。5. 1.3.5 绝缘电阻表:500 V , 0 500 MO, 1. 0级。5. 1.3.6 电阻:22 MO , 1.0级。5. 1.4 标准物质和试剂5. 1.4.1 维生素B6(分析纯)。5. 1.4 . 2 磷酸氢二铀(分析纯)。5. 1.4.3 紫外吸收标准溶液GBW(E) 130

7、066。2 JJG 964- 2001 5.2 检定项目和检定方法5.2.1 外观检查按4.1-4.2条说明进行外观及初步检查。5.2.2 高压电源的检定5.2.2.1 电压示值误差的检定将静电电压表接人高压电源的输出端，在全量程范围内均匀选取6个点(其中包括最大标称输出电压)，测量各点输出电压，按公式(1)计算各点的示值误差，取其最大值作为电压示值误差。% nu nu 咱BA V一二v标-V一一一示V 、。、/咱EAJ6、式中:c3V示一一电压示值误差，(%); Vi一一各点测量电压值，kV: V标一一各点标称电压值，kV。5.2.2.2 电流示值误差的检定将22M!1电阻和电流表串人高压电

8、源的输出端，调整仪器到最大标称输出电流，读取电流表的显示值，按公式(2)计算输出电流的示值误差。I据一II示=了一x100% (2) 式中:c3弘一一电流示值误差，(%); I一一测量电流值，A;I标一一仪器最大标称输出电流值，A。5.2.2.3 电源稳定性仪器预热30min后，设定输出电压为20kV，接静电电压表于高压电游、电压输出端，连续观察3min，记录电压表显示的最大值和最小值。最大值与最小值的差与设定输出电压值之比为电源的稳定性。5.2.3 紫外检测器性能的检定5.2.3.1 波长示值误差及重复性的检定5.2 .3. 1. 1 固定波长紫外检测器的中心波长及半宽度检定将仪器配置的滤光

9、片取出，按照JJG812-1993 干涉滤光片检定规程检定中心波长(峰值波长)及半宽度，其误差及半宽度应符合9.1条的要求。5.2.3. 1.2 连续可调波长紫外检测器的波长示值误差及重复性检定采用紫外吸收标准溶液分别在235，257 , 313 nm和350nm 4点检定波长示值误差。将检测器波长设在比校准波长低5nm处(如检定257nm时，检测器波长先调到252 nm)，以1nm的问隔改变波长，得到波长特征曲线，曲线波峰、波谷处对应的波长为该点测量波长，重复测量3次，取其平均值。测量波长平均值与标准波长之差为波JJG 964-2001 长示值误差。用同样的方法检定其它3点，其最大值与最小值

10、之差为波长的重复性。5.2 .4 静态基线漂移和基线噪声的检定将仪器各部分连接好，选择如下条件进行:波长254nm、毛细管柱为空管，开机稳定30min后，记录1h的基线，计算基线漂移和基线噪声。5.2.5 检测限仪器处于正常工作状态下，将检测器波长调到254nm，用75mX40cm的毛细管柱，柱温25C，电泳电压为15kV。选择气压8kPa，进样时间3s (气压进样);高差20 cm，时间180s (位差进样)。待基线稳定后，用20mmollL的磷酸氢二纳作为缓冲溶液，取质量浓度为2X 10-6 g/ml的维生素B6溶液，连续进样3次，计算其峰高的算术平均值。检测限定义为等于或大于两倍基线噪声

11、峰高所代表的样品的质量浓度，按式(3)计算检测限。D = 2Hp/H 式中:D一一检测限(最小检测质量浓度)，g/ml; HN一一一噪声峰高，mm; 一一-样品的质量浓度，g/ml;H一一一样品峰高，mmo 5.2.6 定性定量测量重复性的检定(3) 将仪器连接好，使之处于正常工作状态，按5.2.5的条件，注入质量浓度为1 X 10 -4 g/ml的维生素B6溶液，记录迁移时间和峰面积(峰高)，连续测量8次，按式(4)计算相对标准偏差S定性(定量)。H-f.t) = .1 i Xi一支)2)i定性(定量)-j，士1(n - -1) 支VV 式中:定性(定最)一一定性(定量)重复性;X; _第i

12、次测得的迁移时间或峰面积(峰高); 王一-n次测量结果的算术平均值;i一一测量序号;n一一测量次数。5.2.7 绝缘电阻的检定(4) 电源插头不接入电网，用绝缘电阻表在电源进线与仪器外壳之间施加500V直流电压，稳定5s后，测量绝缘电阻应大于10MOo 5.2.8 首次检定的仪器需按照本检定规程的要求全面进行检定，后续检定和使用中检验可不进行4.3和3.6条的检定。5.3 检定结果的处理经检定符合本规程要求的仪器发给检定证书;不符合的发给检定结果通知书，并注明不合格项目。5.4 检定周期JJG 964- 2001 毛细管电泳仪检定周期一般不超过2年。5 JJG 964- 2001 附录A标准溶

13、液的配制A.l 试剂试剂名称分子式级别水H20 二次蒸馆水维生素B6CgHll 03N. HCl 分析纯磷酸氢二锅Na2HP04.12H20 分析纯A.2 仪器和玻璃量器名称规格名称规格Iml分析天平200 g，分度0.1mg 无分度吸管1 容量瓶100 , 250 ml 无分度吸管2 称量瓶20 ml 烧杯50 A.3 2.0 x 10 - 6 g/ml维生素战溶液的配制在分析天平上，准确称取10.0mg的维生素B6固体，放入50ml的烧杯中，加人20 m mollL的磷酸氢二锅缓冲溶液使之完全溶解，将此溶液小心移入100ml容量瓶中，并用20m mollL的磷酸氢二纳缓冲溶液稀释至刻度，摇

14、匀。该溶液的质量浓度为1.0 X 10 -4 g/ml，然后用缓冲溶液逐级稀释配制成2.0X 10-6 g/ml的维生素B6溶液。A .4 20 m mol/L的磷酸氢二锅缓冲溶液的配制在分析天平上称取1.79克磷酸氢二纳固体，放人50ml烧杯中，用蒸馆水稀释，并移人250ml的容量瓶中，用少量蒸馆水冲洗烧杯3次，冲洗液并人容量瓶中，然后用蒸馆水稀释至刻度，摇匀后倒人磨口瓶中备用。6 附录B1 外观2 气路系统3 电压示值误差4 电流示值误差5 稳定性6 中心波长误差7 滤光片半宽度8 波长示值误差9 波长重复性10 基线漂移11 基线噪声12 检测限13 定性测量重复性14 定量测量重复性1

15、5 绝缘电阻备注:JJG 964-2001 检定证书(背面)格式检定结果7 附录C受枪单位仪器型号制造厂1 外观检查2 高压电源2.1 电压范围及示值误差电压示值在V输出电压IkV示值误差/(%) 2.2 电流示值误差最大输出电流/A电流表测量值/A2.3 电源稳定性电源稳定性3 min 5 3 波长示值误差及重复性JJG 964- 2001 检定记录格式证书编号温(湿)度仪器编号检定员检定口期核验员10 15 20 25 示值误差/(%) 电压最大值电压最小值3 .1 固定波长紫外检测器中心波长误差及半宽度中心波长(，o) 标准波长(r)中心波长误差8 30 (max) 稳定性/(%) 半宽

16、度JJC 964-2001 3.2 连续可调波长紫外检测器的波长示值误差及重复性测量放长/nm标准波民/nm一一6?/nm )./nm l ? .1.3 235 一一一-257 313 350 4 静态基线;票移及躁声M线漂移/(八U/h)基线l噪声/AU5 仪器检出限H :-,./mm D/ (g/ml) 6 定性定量重复性测量次数1 2 3 4 5 6 7 8 !平均S 迁移时间峰面积-峰Ef可主r7 绝缘性能9 中华人民共和国国家计量检寇规程毛细管电泳仪JJG 964-2001 国家质量监督检验检班总局颁布* 中国计量出版社出版北京秘平墨西街甲2号麟改编码100013 电话(010)64275360北京市迫鑫印刷厂印刷新华书店北京发行所发行版权所有不得翻印* 880 mm X 1230 mm 16开本印张1字数13千字2001年10月第1版2001年10月第1次印刷印数1-2000统一书号155026- 1422 定价:14.00元