GB T 31402-2015 塑料 塑料表面抗菌性能试验方法.pdf

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1、遥望ICS 83.080.01 G 31 共和国国家标准中华人民GB/T 31402-2015/ISO 22196 :2007 塑料塑料表面抗菌性能试验方法、Plastics-Measurement of antibacterial activity on plastics surfaces CISO 22196: 2007 , IDT) 2015-10-01实施2015-05-15发布发布中华人民共和国国家质量监督检验检菇总局中国国家标准化管理委员会lae，响h飞吃喝hqRFi M鸣叫-uu-MJJCE HTZ事dMVJ?毡Z的锐气疗、王d G/T 31402-20 15/ISO 22196

2、:2007 目次、皿1112445788903求要量性质现的再料和材性物复. 即生重际mT、，、，件制性录录划菌现附附用义和再性性引定菌骤果i告范料性和灭步结性报规资验(酣围范语料器器测验复气试AB文录录考古范规术材仪仪检试重4前123456789四附附参I 4 GB/T 31402-2015/18022196:2007 前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准使用翻译法等同采用IS022196:2007(塑料塑料表面抗菌性能试验方法。为了便于使用，本标准还做了下列编辑性修改z一-4.1中用注的形式说明了与测试菌种等同的国内菌株号。本标准由中国石油和化学工业联合会提出。本标

3、准由全国塑料标准化技术委员会老化方法分技术委员会CSAC/TC15/SC 5)归口。本标准起草单位z广东省微生物研究所、广州合成材料研究院有限公司、北京崇高纳米科技有限公司、海信容声(广东冰箱有限公司、松下家电研究开发(杭州有限公司、晋大纳米科技(厦门)有限公司、成都交大晶宇科技有限公司、海尔科化工程塑料国家工程研究中心股份有限公司、全国卫生产业企业管理协会抗菌产业分会。本标准主要起草人z谢小保、欧阳友生、王浩江、李毕忠、吴继贤、李维义、周样万、胡哲、李文东、贾春耕。而出G/T 31402-2015/180 22196: 2007 塑料塑料表面抗菌性能试验方法曹告z处理和操作具有潜在危险的微生

4、物需要很高的技术能力，必须遵守现行国家法律和条例。只有经过微生物学技术培训的人员才能进行这些检测工作。并应严格执行相关的消毒、灭菌和个人卫生规范程序。1 范围本标准规定了经抗菌处理的塑料制品(包括半成品的抗菌性能的评价方法。注:本标准也适用于经抗菌处理的其他元孔材料的抗菌性能检测。本方法不适用于未经抗菌处理塑料上细菌作用和繁殖的评价。ISO846描述了不同于本标准所覆盖方法的一些评价塑料上细菌作用及其繁殖的试验方法。感兴趣者可以参阅ISO846: 1997方法c.本标准不涉及因抗菌处理而带来的次生效应，如预防塑料的生物腐蚀和异睐，也不适用于评价塑料的生物降解性能。生物降解试验可参考ISO148

5、51、ISO14852、ISO14855(见参考文献)及其他相关标准。本标准并不涉及建筑用塑料，如PVC或复合材料，除非将其以相同方式进行抗菌处理a根据本标准所得到的任何结果均需参照本标准及其试验条件。利用本标准所得到的结果是在本标准的实验条件下得到的抗菌性能，而不代表在其他温度、湿度、菌种和营养等条件下的抗菌性能。利用本方法进行抗菌试验需要最低剂量的抗菌剂化学品)溶入到接种菌液中。建议试验人员查阅ISO7218进行微生物操作。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本

6、文件。ISO 7218食品和动物饲料的微生物学微生物检验通用要求和指南(Microbiologyof food and animal feeding stuffs-General requirements and guidance for microbiological examinations)。3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1 抗菌antibacterial 制品表面抑制细菌生长的状态或药剂抑制制品表面细菌生长的效果。3.2 抗菌荆antibacterial agent 通过表面抗菌处理或添加到制品而抑制细菌在制品表面生长的药剂。GB/T 31402-20 15/ISO 2

7、2196:2007 3.3 抗菌性能antibacterial activity 经过抗菌处理后的制品和未经抗菌处理后的制品在接种细菌培养后，得到的活菌数的对数的差值。3.4 抗菌效果antibacterial effectiveness 使用抗菌剂的制品表面抑制细菌生长繁殖的能力，由计算得到的抗菌性能值决定。4 材料4.1 试验细菌采用以下两种细菌za) 金黄色葡萄球菌(Stahylococcusaureus) ; b) 大肠杆菌(scherichiacoli)。根据需要也可采用其他菌种。使用其他菌种时，应在检测报告中注明并说明理由。试验所用菌株如表1所示。如从表1以外的机构获取菌株，则该机

8、构应是世界菌种保藏联合会(WFCC)的成员或日本菌种保藏协会(JSCC)的成员，并且菌株应和表1相同，根据供应商的使用说明制备菌种。表1试验所用菌株菌种名称菌株号ATCC 6538P CIP 53.156 金黄色葡萄球茵DSM 346 NBRC 12732 NCIB 8625 ATCC 873 CIP 53.126 大肠杆菌DSM 1576 NBRC 3972 NCIB 8545 注z中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)是WFCC成员，与金黄色葡萄球菌ATCC6538P等同的闺内菌株号为CGMCC1.2910，与大肠杆菌ATCC8739等同的国内菌株号为CGMCC1.2463. 4.2

9、 试剂、培养基与溶液所使用的水都应是蒸锢水或去离子水，电导率小于1SI阻。所有试剂都应是分析纯或微生物实验试剂。4.2.1 非离子表面活性剂一一聚氧乙烯山梨醇配单油酸醋(吐温80)。2 4.2.2 生物材料以下是需要的生物材料z一一卵磷脂p-D-葡萄糖;酵母膏z牛肉膏(见附录A);-蛋白臆(见附录A)，醋蛋白腺;大显蛋白臆;膜蛋白膜。4.2.3 培养基4.2.3.1 概述GB/T 31402-20 15/ISO 22196:2007 应用下述专用培养基。如采用商品培养基，应按照制造商的说明书制备。4.2.3.2 悬浮液一1/500营养肉汤(1/500NB) 将3.0g牛肉膏、10.0g蛋白陈和

10、5.0g氯化铀溶人1000mL蒸铺水或去离子水中。用蒸馆水或去离子水稀释至500倍体积，并用氢氧化铀潜液或盐酸将pH值调整至6.87.2.用高压蒸汽灭菌(见6.2)。如不立即使用，于5.C-10 .C保藏.不得使用存放一个星期或以上的1/500营养肉汤。4.2.3.3 营养琼脂将5.0g牛肉膏、10.0g蛋白脏、5.0g氧化锅、15.0g琼脂粉加入1000 mL蒸馆水或去离子水中。将容器放在电炉上或浸人沸水水浴锅中加热搅拌，直到琼脂需解。用氢氧化铀溶液或盐酸将pH值调整至7.0-7.2(25C).用高压蒸汽灭菌(见6.2)。如不立即使用，于5C-10C保藏。不得使用存放一个月或以上的营养琼脂。

11、4.2.3.4 平撮计数琼脂将2.5g酵母膏、5.0g膜蛋白陈、1.0g葡萄糖、15.0g琼脂粉加人1000mL蒸锢水或去离子水中。将容器放在电炉上或浸人沸水水浴锅中加热搅拌，直到琼脂溶解。用氢氧化铀溶液或盐酸将pH值调整至7.0-7.2(25C)。用高压蒸汽灭菌(见6.2)。如不立即使用，于5C-10C保藏。不得使用存放一个月或以上的平板计数琼脂。4.2.3.5 斜面培养基将6mL10 mL加热溶解的营养琼脂加人旋盖的试管中，用高压蒸汽灭菌见6.2)。灭菌后将试管置于倾角约15。的位置，让培养基凝固。如不立即使用，于5C -10 c保藏。不得使用存放一个月或以上的斜面培养基。4.2.3.6

12、卵磷脂吐温大豆醋蛋白培养液(SCDLP培养液将17.0g醋蛋白陈、3.0g大豆蛋白陈、5.0g氯化铀、2.5g磷酸氢二铀、2.5g葡萄糖与1.0g卵磷脂潜入1000mL蒸锢水或去离子水中。搅拌均匀后加入7.0g非离子型表面活性剂吐温80，用氢氧化铀榕液或盐酸将pH值调整至6.87.2(25C)，高压蒸汽灭菌(见6.2)。如不立即使用，于5C10 c保3 GB/T 31402-2015/ISO 22196:2007 藏。不得使用存放一个月或以上的SCDLP培养滚。注2在大多数的情况下SCDLP是默认的中和剂，在AST.ME 1054和EN1040中规定了替代的中和剂选择和评价方法。4.2.3.7

13、 醋酸盐缓冲撞将34.0g磷酸二氢惆放入1000mL容量瓶中，加入500mL去离子水或蒸锢水，搅拌溶解后，用氢氧化铀溶液调整pH值至6.87.2(25C)。加入去离子水或蒸馆水至1000 mL，高压蒸汽灭菌(见6.2)。不得使用存放一个月或以上的磷酸盐缓冲液。4.2.3.8 磷酸盐缓冲生理盐水将8.5g氧化铀加入1000 mL去离子水或蒸锢水中，搅拌均匀，制成生理盐水。以生理盐水稀释磷酸盐缓冲液(见4.2.3.7)至800倍体积。高压蒸汽灭菌(见6.2)。如不立即使用，于5C10.C保藏。不得使用存放一个月或以上的磷酸盐缓冲生理盐水。5 仪器如无特别说明，使用以下器具和材料z5.1 干热灭菌箱

14、:能保持160.C180 .C的温度，温度波动不超过:!:2 .C。5.2 高压蒸汽灭菌锅z能保持(121士2)c的温度，保持(103士5)kPa压力。5.3 带搅拌的加热电炉或水浴锅，5.4 pH计z精度士0.2。5.5 天平z精度土0.01g。5.6 移液器z带有1000L的枪头，灭菌后使用。5.7 培养箱z在设定温度下，温度精度士1C。5.8 璇涡搅拌器。5.9 超声波清洗器。5.10 接种环z直径4mm，灭菌后使用。5.11 覆盖膜z不影响细菌生长并且不吸水的材料(以聚乙烯、聚丙烯或聚醋如聚对苯二甲酸乙二薛醋制成)。建议膜厚度在0.05mm0.10 mm之间。注2均质袋(Stomach

15、erbags)切下的膜也适用.5.12 带螺盖试管。5.13 培养皿z直径90mm100 mm，灭菌后使用。5.14 纱布或脱脂棉。5.15 1 000 mL容量瓶。5.16 制备培养基用的加塞锥形瓶或兰角瓶。6 仪器灭菌和菌种保藏6.1 干热灭菌将物品放入干热灭菌器，灭菌温度和时间如下z4 温度最短灭菌时间180 c 170 c 160 c 30 min 60 min 120 min GB/T 31402-2015月SO22196 12007 6.2 高压蒸汽灭菌将物品放人高压蒸汽灭菌锅，于(121士2)c灭菌15min或以上。6.3 玻璃器皿的准备以碱性或中性清洁剂清洗，然后用蒸馆水或去离

16、子水冲洗干净。使用前用干热灭菌箱或高压蒸汽灭菌锅灭菌。6.4 菌种的保藏菌种接种于适当的培养基上，存放在50C-10C条件下，每月转种一次。不得使用转种超过5次或转种间隔超过1个月的菌种，应从相关菌种保藏机构获取新的菌种进行试验。7 检测步骤7.1 细菌预培养用无菌接种环将细菌从保藏菌种的培养基上转移到斜面培养基(见4.2.3.5)上并在(35士1)c培养16 h-24 ho再用无菌接种环将此细菌转移至新鲜的斜面培养基上，在(35士1)C培养16h-20 ho 7.2 试样的制备每种经过抗菌处理的材料至少准备3片试样，未经抗菌处理的材料至少准备6片试样。3片未经抗菌处理试样用于接种后立即测量活

17、的细菌数，另3片用于测量接种后24h的活细菌数。注z使用3个以上的经过抗菌处理的试样有助于减少误差，尤其对于抗菌效果较差的材料是这样。在对同一材料进行一系列不同抗菌处理时，若所有抗菌试样都同时采用相同菌液进行检测，则每种抗菌处理只需一组未经抗菌处理的试样作为对照。制备抗菌处理和未经抗菌处理的试样，试样尺寸为(50土2)mmX(50士2)mm，试样厚度不超过10 mmo如果不能切割成这样大小的样片，只耍佯品能够接面积为400mm2 -1 600 mm2薄膜覆盖即可。优先考虑从制品上制备试样。如果不能从制品上制备上述大小的试样，则利用相同原料和工艺单独制备试样。如果试样尺寸不同于50mmX50 m

18、m，则应在试验报告中写明实际的试样尺寸。在制样时，注意避免试样被微生物或有机物污染，同时，试样不能互相接触。如果使用金属器具防止交叉污染，应保证该金属不含有抗菌效果。必要时，试样可以在测试前进行清洗、消毒或杀菌如以70%酒精擦洗).清洗试样可能导致表面软化、表面涂层溶解或者组分洗脱等，所以应避免清洗。如果因严重污染需要清洗，清洗方法应在试验报告中注明。7.3 接种液的制备使用无菌的接种环，转移A环预培养好的细菌(见7.1)到少量的1/500B(见4.2.3.2)中。确保细菌分散均匀，并采用显微镜观测及计数板或利用其他合适的方法(如分光光度计法测定细菌数量。用1/500 NB稀释菌悬液，使细菌的

19、浓度在2.5X105 CFU/mL-10X 105 CFU/mL之间，最佳浓度为6.0X105 CFU/mL，用作接种液。如果接种液不立即使用，将其放置于冰块上(0C)并在2h内使用。7.4 试样接种制品的外表面作为测试表面，制品的横切面不需要测试。将试样(见7.2)分别放入无菌的培养皿中，测试面朝上。用移液管吸取0.4mL接种液(见7.3)，滴到每个试样表面。并将制备好的40mmX GB/T 31402-2015月SO22196:2007 40 mm薄膜(见5.11)盖于接种好的菌液上，并向下轻轻按压薄膜使菌液向四周扩散，确保菌液不要从薄膜边缘溢出。在试样接种完并盖上薄膜后，盖上培养皿盖见图

20、1)。说明:1 瞿盖膜52-一接种液(0.4mL); 3一一试佯;4一一培养皿z5一一-培养皿盖。4 单位为毫米50士25 圈1试样接种与瞿盖膜放置除特别说明外，覆盖膜的标准尺寸为(40土2)mmX(40士2)mm，而试样尺寸为50mmX 50 mm. 如果试样不是标准尺寸，则根据试样的大小按比例减小覆盖膜的尺寸，但覆盖膜尺寸不应小于400 mm2，并且覆盖膜边缘距试样边缘2.5mm5.0 mm之间。如果覆盖膜的尺寸不是40mmX 40 mm，应在试验报告中说明其实际尺寸。所使用的接种液体积应按覆盖膜面积变化的比例相应调整并在试验报告中记录。接种液不能从覆盖膜边缘溢出。有些表面(如亲水性非常强

21、的表面很难防止菌被溢出。可采用选项1防止溢出。如果采用选项1仍发生溢出，则选用选项2。如果某选项能抑制溢出，应在试验报告中记录。一选项1:减少菌液体积以适应试样表面。但菌液体积不小于0.1mL。当菌被体积减少时，应增加接种液细菌的浓度，以保证测试时与标准规定的细菌数相同。-选项2.通过增加惰性增稠剂以增加菌液的粘度，如琼脂或其他材料。7.5 接种试样的培养除特别说明外，含有接种试样(包括3片未经抗菌处理制品的接种试样)的培养皿，在(35士1)c、相对湿度不小于90%的条件下培养(24士l)h。根据在培养温度下检测所得到的抗菌性能值来确定制品的抗菌效果。在相关方同意的条件下，也可采用其他培养温度

22、。如使用的不是(35士1)c，应在试验报告中记录。注2若培养温度低于35C，活菌总数将会减少。这将使所测得的抗菌性能值与35c下所测得的结果不同。GB/T 31402-20 15/ISO 22196:2007 7.6 试样上的细菌回收7.6.1 试样接种后即时测试接种后，立即对已接种的3片未做抗菌处理试样进行菌种回收，在各培养皿中加人10mL SCDLP 培养液见4.2.3.6)或其他适宜而有效的中和剂，以此种方法得到试样上细菌的回收率。应对试样进行充分冲洗，即用移液管吸取和释放SCDLP培养液，冲洗试样4次以上。需特别注意的是，需要达到足够的菌液回收量。尤其是如试验中采用了7.4中的选项2，

23、导致菌液的粘度增大。在此种情况下就需要采用机械搅拌，如均质、旋动和超声波振动等。若采用这些方法后回收率能达到或超过冲洗法，则可以采用。若变更回收方法，则应在报告中说明。由于试样的尺寸和性质的关系，采用10mL中和剂回收细菌有困难，则可增加中和剂溶掖用量。若中和剂的体积不等于10 mL，则在报告中注明，并在计算抗菌效果时予以考虑。其他冲洗方法将影响所测得的抗菌性能结果，因而应充分证实其有效性才可使用。7.6.2 试样接种培养后的测试根据7.5的程序培养后，按照7.6.1处理试样，然后立即对试样上的活菌进行计数(见7.7)。7.7 平板培养法测定活菌数用磷酸盐生理盐水缓冲液(见4.2.3.的对SC

24、DLP回收液进行10倍梯度稀释，以计算活菌。将试样上的回收液及其10倍稀释液各取1mL，分别放入无菌培养皿中，每个稀释度做2个培养皿。每个培养皿中注入15mL平板计数琼脂见4.2.3.的，轻轻搅拌以分散细菌。倒置培养皿，并于(35士1)C培养40 h48 h。培养后，对培养皿中菌落数在30300之间的菌落进行计数。记下每个稀释度培养皿上的菌落数并保留2位有效数字，记录稀释倍数。若1mL洗脱液中的菌落数小于30，则对该培养皿直接计数。如所有培养皿中均没有菌落，则记录为1.8 试验结果8.1 话菌数副定对于每个试样，都按照式(1)来计算活菌数。N二(100xCxXV)/A . ( 1 ) 式中zN

25、 每个试样每平方厘米的活菌数FC一一两个培养皿的平均菌落数P -一稀释倍数zV 用于洗脱的SCDLP培养液的体积，单位为毫升(mL);A一一覆盖膜的表面积，单位为平方毫米恼的。计算每组试样回收活菌数的几何平均数并记录菌数时取2位有效数字，若某一稀释倍数的所有琼脂平板上都没有菌落，则将活菌计作V(用于洗脱的SCDLP培养液的体积mL)。计算平均数时，如各稀释度均没有菌数，则记录为民例如:V=10mL，计算所得平均菌数为10。8.2 试验有效的条件8.2.1 当8.2.2、8.2.3、8.2.4中给定的3个条件均得到满足时，试验才被认定为有效。反之，则试验无GB/T 31402-20 15/ISO

26、 22196 ,2007 效，应重新进行试验。8.2.2 未经抗菌处理试样接种后即时测得的细菌数的对数值应满足式(2)的要求z(Lm且一Lmin)/(L，.)运0.2式中zLmax一一试样上最大活菌数的对数值zLmin 试样上最小活菌数的对数值;L，.一-试样上几何平均活菌数的对数值。. ( 2 ) 8.2.3 未经抗菌处理的试样接种后即时测得的平均活菌数应在6.2XI03CFU/cm22.5XI04 CFU/cm2 范围内。8.2.4 每个未经抗菌处理试样接种后培养24h的活菌数不应小于62CFU/cm2 注z若7.5中接种温度低于35C，那么未经抗菌处理试样测得的活菌数可能达不到这个标准。

27、8.3 抗菌性能的计算在试验被认为有效的情况下，用式(3)计算抗菌性能值，结果保留到小数点后l位。R =(U, -Uo)一(A，-Uo) =U, -A, ( 3 ) 式中zR 抗菌性能值;Uo二一未经抗菌处理试样接种后即时菌数的对数平均值，单位为细菌数每平方厘米(CFU/cm2); U, 未经抗菌处理试样接种后24h的菌数的对数平均值，单位为细菌数每平方厘米(CFU/cm2); A一一经抗菌处理试样接种后24h的菌数的对数平均值，单位为细菌数每平方厘米(CFU/cm2)。8.4 抗菌剂的效果抗菌性能值可以用于描述抗菌效果。9 重复性与再现性重复性和再现性在附录B中进行了定量讨论。10 试验报告

28、8 试验报告应包括以下信息za) 注明采用本标准zb) 经抗菌处理和未经抗菌处理试样所用的塑料材质、尺寸、形状和厚度zc) 覆盖膜的聚合物类型、尺寸、形状和厚度zd) 试验用菌种和菌株号，如果用其他菌种需说明原因zd 接种菌液的体积3) 接种菌液中的活菌数Fg) 8.3中Uo、U，和A，值zh) 抗菌性能值Fi) 若采用了不同于本标准的一些操作，如试样清洗方法的变更、惰性增稠剂的使用、所用中和剂的种类和体积有变化、菌液回收方法变更及培养温度不同时，均应详细说明zj) 实验室的名称等识别资料及实验室负责人的姓名和签字;k) 试验开始日期z1) 试验报告日期。GB/T 31402-20 15/IS

29、O 22196:2007 附录A(规范性附录)生物材抖的质量要求A. 1 总则根据来源的不同，用于接种液制备的材料的质量会有所差异，从而对结果产生重大影响，因而其组成需要加以专门规范。A.2 1/500营养肉汤(1/500N)的化学成分牛肉膏和蛋白陈是控制1/500营养肉汤质量差异的关键成分。以下是本标准对商品化材料中总氮和r氨基氮化物要求，蛋白陈要求是酶蛋白的酶消解产物。牛肉膏总氮6.0%15.0%， -氨基氨2.0%5.0%。蛋白脏(醋蛋白的酶消解产物)总氮12.0%16.0%; a-氨基氮3.0%6.0%。9 GB/T 31402-2015月SO22196 :2007 B.1 背景附暴B

30、资料性附录)重复性和再现性本附录内容是基于大量研究结果所获得的本试验的重复性和再现性。该研究于2000年至2004年由日本国家技术与评价研究所完成，其目的一方面是采纳ISO/IEC17025: 2000作为实验室认可体系的一部分，另一方面是测定JISZ 2801:2000的不确定度，该方法是本试验标准制定的依据。B.2 摄述本方法的重复性和再现性是根据ISO5725-2的统计分析得到的。对两种经处理过的测试样品在5个实验室进行，从而得出抗菌性能的试验结果。在剔除一个实验室的数据后，根据其他实验室的数据分析，得到以下结果z同一实验室相同测试项目的重复性为0.087;不同实验室相同测试项目的再现性

31、为0.304.这些数据是用本方法获得的重复性和再现性的实例，但不能用于判定不同实验室的测试结果。B.3 试验实验室间测试所用的材料和应用的试验条件如表B.1。表B.1材料与试验条件PET膜，40mmX 40 mm，厚度0.055mm 经抗菌处理的试祥I类试样=丙烯酸树脂涂层，混合350问/g银化合物E类试祥=丙烯酸树脂涂层，混合450昭雄银化合物未经抗菌处理对照试样PET膜同上，但涂层中不加银化合物覆盖膜PE膜，50mm方块0.09mm厚菌种金黄葡萄球菌CGMCC1.291 0 (见注3)接种菌液体积0.4 mL -一参加实验室间测试的5个实验室都对两种样品进行了重复性测试。用于各个阶段的样品

32、数均遵照本标准要求。样品、菌种和培养基等，都在测试前提供给各个实验室。注1:样品包含涂了水溶性丙烯酸树脂涂层的PET薄膜。在涂涂料前混入一定茧的银系抗菌剂，以确保试验样品上的抗菌剂均匀分布.注2:由于丙烯酸树脂涂层是水溶性的，接种菌液容易扩散到涂层以外的区域。样品/涂层的结构与本标准的样品有所不同，所以，应先在薄膜上接种，然后将样品覆盖在其上。注3:仅用金黄色葡萄球菌是因为它比大局抨茵表现更大的变异性。10 F GB/T 31402-2015/囚022196:2007B.4 结果与讨论经初步分析，采用裂区分析计算得到一个实验室的Z值大于2.0，因此，该实验室的数据结果被弃用，数据分析仅采用剩余

33、4个实验室的测试结果。表B.2列出了抗菌性能的平均值和每种抗菌处理试样的标准差。重复性试验显示为下表第一组和第二组。表B.2平均抗菌性能和标准差样品种类平均抗菌性能(括号内为标准差)(见表B.1)第一组第二组I类试样1. 72(0.42) 1. 78(0.26) E类试佯2.29(0.45) 2.42(0.41) 每个实验室对两种类型样品均做了2次重复实验。每种类型样品采用3个相同的试样。考虑分析结果的变异性来源包括重复试验变异性VR(即结果或来自第一组或来自第二组)，实验室间变异性VL和3种被测试样之间的变异性Vs因为VR和VL不是随机的，每组都要单独分析。表B.3列出了方差分析结果和不确定

34、度。表B.3方差分析表与不确定度变异性来源平方和自由度平方平均值F-比率F(p=0.05) F(=0.01) F(测试重复，Va0.120 0 1 0.120 0 0.40 10.13 34.12 实验室，VL4.656 9 3 1.552 3 5.18 9.28 29.46 VaXVL(一阶误差el)0.899 1 3 0.229 7 13.84 2.90 4.46 a 试样，Vs4.440 8 l 4.440 8 205.12 4.15 7.50 a VLXVs 0.388 7 3 0.129 6 5.98 2.90 4.46 a VRXVs 0.013 3 1 0.013 3 0.62

35、4.15 7.50 VaXVLXVs 0.116 0 3 0.0387 1.79 2.90 4.46 二阶误差e20.692 8 32 0.021 7 总计11.327 7 47 3 1%显著差异水平。如表B.3所示，主要区组误差VRVL(一阶误差el)比二阶误差e2在1%水平时差异性更显著。另一方面，与e2相比，VRXVs和VRXVLXVs没有统计学意义。所以这两个量的影响就被合并于二阶误差e2中，表B.4列出了合并非显著性差异后的方差分析结果。表B.4万差分新表和不确定度(合并了非显著性差异)变异性来源平方和自由度平方平均值F-比率F(=0.05) F(=0.01) F(测试)重复，Va0

36、.120 0 l 0.1200 0.40 10.13 34.12 实验室，VL4.656 9 3 1.552 3 5.18 9.28 29.46 VaXVL(一阶误差el)0.899 1 3 13.84 2.90 4.46 a 11 GB/T 31402-20 15/ISO 22196:2007 变异性来源平方和试样.Vs4.440 8 VLXVs 0.388 7 二阶误差e;0.822 1 总计I 11.327 7 I a 1%显著差异水平.自由度3 36 47 表B.4(续)平方平均值IF-比率0.129 6 5.67 0.0228 F(p =0.05) I F(=队01)1F(测试4.1

37、1 I 7.50 2.87 I 4.4 6 上述结果证明，VR来源于重复性试验的差异;VL来源于实验室之间的差异，相互独立并无统计意义。本实验结果可得出下列结论:一-重复性z在3个重复性测试中，可重复性条件下的标准不确定度可由上述数据计算如下:(e2) =V(e)/3J川=(0.022 8/3)川二0.087一一再现性z在再现性条件下的标准不确定度可由上述数据计算如下:(el) = V(el) -V(e) J/3p/2 = (0.229 7一0.0228) /3J川=0.30412 v GB/T 31402-2015月SO22196:2007 参考文献lJ JIS Z 2801: 2000 ,

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