DB33 T 910-2013 龙泉灵芝生产技术规程.pdf

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1、ICS 67.040 X83 DB33 浙江省 地方标准 DB 33/T 910 2013 龙泉灵芝生产技术规程 Longquan Ganoderma lucidum Technical Regulations 2013 - 12 - 31 发布 2014 - 01 - 31 实施 浙江省质量技术监督局 发布 DB33/T 910 2013 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 地理 标志保护产品保护范围 . 1 4 术语和定义 . 2 5 自然环境 . 2 6 菌种 . 2 7 原木选择 . 3 8 菌段制作 . 3 9 栽培场所 . 4 10 栽培管

2、理 . 5 11 采收与干制 . 6 12 包装、标签、运输、贮存 . 6 13 生产档案建立 . 7 附录 A（规范性附录） 龙泉灵芝及龙泉灵芝孢子粉品质特征 . 8 附录 B（规范性附录） 灵芝三萜含量的测定方法 . 11 附录 C（规范性附录） 龙泉灵芝及龙泉灵芝 孢子粉地理标志产品保护范围图 . 13 附录 D（资料性附录） 龙泉灵芝标准化生产技术模式图 . 14 DB33/T 910 2013 II 前 言 本标准根据国家质量监督检验检疫总局地理标志产品保护规定（ 2005第 78号总局令）、 GB/T 17924地理标志产品标准通用要求和 GB/T 1.1-2009标准化工作导则

3、第 1部分：标准的结构和编写制定。 本标准由浙江省农业厅提出。 本标准由浙江省种植业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位 :龙泉市质量技术监督（食品加工业）协会、龙泉市产品质量监督检验所、浙江省食用菌质量检测中心（丽水质检院）、龙泉市农业局、龙泉市食品药品监督管理局、龙泉市卫生局、龙泉市兴龙科技开发研究所、浙江森芝宝生物科技有限公司、浙江龙泉佳宝生物科技有限公司、浙江科达生物科技有限公司。 本标准主要起草人 :曹隆枢、邹小龙、叶纪沟、何建芬、祝坚军、许年林、张伟、李朝谦、杨久根、蔡敦辉、叶伟平。 本标准为首次发布。 DB33/T 910 2013 1 龙泉灵芝生产技术规程 1 范围 本标准规

4、定了地理标志产品龙泉灵芝的保护范围、术语和定义、自然环境、菌种、原木选择、菌段制作、栽培场所、栽培管理、采收 与 干制、品质特征、试验方法 以 及包装、标签、运输和贮存。 本标准适用于国家质量监督检验检疫总局根据地理标志产品保护规定批准保护的龙泉灵芝。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 3095 环境空气质量标准 GB 5084 农田灌溉水质标准 GB 15618 土壤环境质量标准 GB 7096 食用菌卫生标准 GB/T 12728 食用菌术

5、语 GB/T 191 包装储运图示标志 GB 7718 食品安全国家标准 预包装食品标签通则 GB 5009.3 食品安全国家标准 食品中水分的测定 GB 5009.4 食品安全国家标准 食品中灰分的测定 GB 2760 食品安全国家标准食 品添加剂使用标准 GB 2762 食品中污染物限量 GB 2763 食品中农药最大残留限量 NY 5099 无公害食品 食用菌栽培基质安全技术要求 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1676 食用菌中粗多糖含量的测定 NY/T 1731 食用菌菌种良好作业规范 中华人民共和国药典 2010年版 3 地理标志保护产品保护范围 龙泉灵芝地理标

6、志产品保护范围限于国家质量监督检验检疫总局根据地理标志产品保护规定批准的范围，为浙 江省龙泉市西街街道、龙渊街道、剑池街道、宝溪乡、道太乡、小梅镇、锦溪镇等 19个乡镇、街道现辖行政区域，见附录 C。 4 术语和定义 4.1 龙泉灵芝 DB33/T 910 2013 2 真菌门、担子菌亚门、层菌纲、无隔担子菌亚纲、非褶菌目、灵芝菌科、灵芝属、赤芝种的子实体。子实体有柄、木 栓质、菌盖肾形或圆形，直径 3cm 32cm，厚 0.6cm 2cm，初期亮橘黄色，边缘白色，后期盖面红褐色，有漆样光泽。菌盖具有环状棱纹或辐射状皱纹，边缘薄，稍内卷。菌柄近似圆柱形、中实，长 2cm 20cm，与盖同色。盖

7、肉白色至浅褐色，菌管褐色，管长 0.5cm 1.5cm，平 均每毫米 3 5个。 4.2 龙泉灵芝孢子粉 龙泉灵芝在成熟后期由菌管弹射的担孢子 ，集中起来后呈粉末状。孢子黄褐色，卵形，大小 9 11 m 5 8 m，顶端平截，双层 壁。外壁光滑，内壁有小刺，中间有油滴。 5 自然环境 5.1 地理 龙泉灵芝 产区位于 北纬 27 42 28 20和东经 118 42 119 25 之间。 东南、西北部山脉绵亘，龙泉溪（瓯江上游）从西南向东北贯穿中部，群山平行于河谷对称分布，表现为成层性，低、中山带占总面积 69.17%，丘陵占 27.92%，河谷平原仅占 2.91%。海拔最低 190m，最高

8、1929m。 5.2 气候 属亚热带季风气候，温暖湿润，四季分明；全年光热水同步增减配合好，山地垂直差异明显，不同海拔区域小气候丰富多彩，昼夜温差大。全年平均温度 17.6，年平均降雨量 1664mm，年平均相对空气湿度 79%，年平均日照 1823.8h，日照率 41.2%，年平均蒸发量 1412.7mm，无霜期 262d。 5.3 土壤 土壤结构以红壤和黄壤占多，水稻土土层深厚。 5.4 水质 地表水 31.5亿 m3，达国家一、二类水标准。 6 菌种 6.1 品种 6.1.1 灵芝应符合中华人民共和国药典 2010 年版（一部）的有关规定；菌种经鉴定，属于真菌门、担子菌亚门、层 菌纲、无

9、隔担子菌亚纲、非褶菌目、灵芝菌科、灵芝属的赤芝，拉丁学名为： Ganoderma lucidum (Leyss.ex Fr.) Karst. 6.1.2 采用本地筛选、驯化、培育，在龙泉保护范围内经 2 个以上周期栽培试验，经菌种管理部门确认其种性适合在本地栽培，具有较高药用价值的菌株。 6.2 菌种生产 灵芝菌种应来自具有相应资质的菌种生 产单位，其生产场地环境卫生及其他条件符合 NY/T 1731要求，菌种生产符合 NY/T 528要求和农业部食 用菌菌种管理办法。菌种生产流程如下： DB33/T 910 2013 3 6.3 菌种培养 6.3.1 培养基应符合 NY 5099。 6.3.

10、2 培养条件：根据灵芝的种性，灵芝菌种培养的几个要素见表 1。 表 1 菌种培养条件 菌种级别 培养基配方 适宜温度（） 菌龄（ d） 培养容器 母种 PDA琼脂培养基 25 28 8 12 玻璃试管（ 180 18mm或200 20mm） 原种 干木屑 78、麸皮 20、糖 1、石膏粉 1 30 35 750ml菌种瓶或 1530cm塑料袋 栽培种 25 35 15 30cm塑料袋 7 原木选择 7.1 树种 除松、杉、樟、桉等含油脂及芳香刺激性气味的树种不能用于栽培灵芝外，其他阔叶树均可用于栽培灵芝。选用壳斗科、杜英科、金缕梅科栽培为好。 7.2 采伐季节 在每年 11月至翌年 1月采伐。

11、 7.3 原木规格 直径 8 cm 20 cm。 8 菌段制作 8.1 原木截段 砍伐后 15 d 30 d内，原木的含水率在 40%左右时截成长为 18 cm 30 cm的段木。 8.2 装袋 将截好的段木剔去尖角和毛刺，装入筒径为扁宽 30 cm 35 cm，厚度 0.06 mm 0.08 mm的高密度低压聚乙烯筒袋裁成长度 60 cm 70 cm的袋子中，每袋视段木粗细可装 1 3根段木，装段木时要小心套入，防袋子破损，袋子两头用绳子扎好口。 8.3 灭菌 采用常压灭菌，用猛火使料袋内温度快速上升到 98 100 后用温火连续保温 10 h 16 h。 用于栽培接种 栽培种 原种 母种

12、孢子或组织分离 DB33/T 910 2013 4 8.4 接种 8.4.1 接种时间 12月至翌年 2月，在气温 25以下时进行，白天气温高时，选在早、晚进行接种。 8.4.2 接种方法 按接种室的操作要求，当灭菌后的段木温度 30 、气温 25 时在无菌条件下进行两头接种。在料袋两头放入菌种，铺满两头截面，然后扎紧袋口。 8.4.3 培养 8.4.3.1 培养室要求洁净、通风、控温、遮光。 8.4.3.2 将接种后的菌袋搬入培养室中，墙式层叠 10 层 12 层。在 15 30 温度下培养 90 d110 d，培养室空气湿度要求低于 70%。 8.4.3.3 菌段培养成熟特征：菌丝洁白长满

13、整个段木，菌段表面出现浅黄色的菌皮，个别菌段出现原基，手指重压菌段有弹性。 9 栽培场所 9.1 地点选择 栽培场选在海拔 300 m 600 m，地处平整开阔、通风向阳，土质疏松、排灌方便、无洪涝灾害、无白蚁危害活动区块，与生活污染 源、禽畜养殖场有 100 m以上距离；前 2年没有栽培过灵芝。 9.2 环境质量要求 9.2.1 土壤 应达到 GB 15618 规定的 二级 标准 。 9.2.2 栽培场地所用水质 应达到 GB 5084 规定的 农田灌溉用水水质要求。 9.2.3 空气 环境质量应达到 GB 3095 规定的 二级 标准 。 9.3 荫棚 依栽培场地搭建高 2.5m 3.0m

14、的棚架，覆盖遮阳网等遮阳材料，棚架四周用遮阳材料围住。 9.4 整畦 棚架下做畦，畦宽 2.1 m 2.2 m，畦高 20 cm 25 cm，畦沟宽 35 cm 40 cm，畦底和畦沟撒石灰粉消毒。四周挖好排水沟。 9.5 菌段排放 在 4月至 6月选择晴天下地排放。菌段排放 在畦上，每畦排放 6段。通风 5 d 10 d以后再脱去菌袋，依次横放在畦上，菌段间距 5 cm 10 cm，行距 20 cm 25 cm，在菌段间填满泥土，并覆盖菌段不外露，覆土厚度 1 cm 2 cm。覆土后应对畦面喷一次重水，使土壤湿润并与菌段接触紧密，喷水后菌段表面泥土被水冲刷而外露的要及时补上覆土。每畦插上弧形

15、毛竹片，构成拱形架，架中间离畦面 50 cm 60 cm，架上盖塑料薄膜，将整个畦罩住。 10 栽培管理 DB33/T 910 2013 5 10.1 水分管理 10.1.1 空气相对湿度 菌芽形成至子实体开片时，空气湿度保持在 90% 95%；子实体开片基本完成，菌盖边缘稍有黄色时，空气 湿度保持在 85% 95%；子实体趋于成熟至孢子弹射期，空气湿度保持 80% 85%。 10.1.2 土壤湿度 10.1.2.1 在原基形成和幼芝生长期，对土表干燥发白的地方要适当喷水增湿，但要防止畦内泥土过湿，影响菌段通气性。 10.1.2.2 喷水要细缓，防止泥土溅到芝体上。 10.1.2.3 灵芝采收

16、前 7 d 10 d 停止喷水。 10.2 温度管理 10.2.1 菌芽形成至开片时温度控制在 20 25 。 10.2.2 子实体趋于成熟至散发孢子期 25 30 。 10.2.3 通过遮阴、喷水掀膜通风等方法调节出芝场的温度。 10.3 通风管理 10.3.1 在灵芝原基还未形成时，不需要揭膜通风。 10.3.2 当灵芝菌芽形成到幼芝生长期，要利用棚两端薄膜掀开方式通 风，使空气中 CO2的浓度低于0.1%。 10.3.3 子实体完全开片时卷起拱形棚两侧薄膜，加大通风量。 10.4 光照管理 10.4.1 根据气温和日照情况，在盛夏高温强日照下增加遮阴，使棚内光照强度保持在七分阴三分阳。

17、10.4.2 对整个棚的遮阴要统一安排，使光照均匀，不致产生偏光，防止灵芝偏向生长。 10.5 疏芝管理 10.5.1 对同一菌段原基形成过多，用锋利小刀从基部割去，每根段木保留 1 朵 2 朵灵芝。 10.5.2 疏芝原则为去弱留强，去密留疏。 10.5.3 通过改变菌段方向位置的方法调节灵芝生长疏密度，使各个灵芝各自生长，不相粘连。 10.6 越冬管理 采收结束做好清场，撤去覆膜，对外露的菌段用泥土覆盖 保护，厚度 2 cm 5 cm。 10.7 病虫害防治 10.7.1 防治原则 坚持预防为主，综合防治的原则。注意观察，尽早发现病虫害迹象，采取措施，把病虫害控制在初始阶段。 10.7.2

18、 防治方法 DB33/T 910 2013 6 采用生物和物理方法进行防治。并且做到勤观察，一旦发现虫害，如扁蝽危害，及时进行人工捕捉或杀虫灯诱杀 ， 并用生石灰对绿霉进行防治。 11 采收与干制 11.1 采收 11.1.1 子实体采收 采收标准为菌盖不再增大，边缘有增厚层；菌盖表面的色泽一致；采收方法为在晴天用果树剪在灵芝留柄 1.5cm 2cm处剪下菌盖，然后沿基部剪下菌柄。 11.1.2 孢子粉采收 采 收标准为菌盖有大量的褐色孢子弹射并且弹射 量逐渐减少时。采收方法可以采用套筒 采集 法， 将芝盖上的孢子粉刷下，然后将接粉薄膜上的孢子粉刷下，将收集好的孢子粉放置在干净的容器里。 11

19、.2 干制 11.2.1 子实体干制 在采收当天使用热风循环烘干机将子实体烘干，控制热源，使烘干温度在 40 55 ，并控制好进出风量，风量要求先大后小。 11.2.2 孢子粉干制 在采收当天将孢子粉摊晒在 不锈钢 等安全 材料 上，再使用热风循环烘干机或专用烘干机将孢子粉烘干。控制热源，使烘干温度在 50 65 ，并控制好进出风量，风量要求比子实体干制要小。 12 包装、标签、运输、贮存 12.1 包装 按 GB/T 191规定执行。 12.2 标签 按 GB 7718规定执行。 12.3 运输 12.3.1 运输工具应清洁、卫生、干燥。 12.3.2 不得与有毒、有害、有异味的物品混装、混

20、运。 12.3.3 运输时应防雨、防潮、防暴晒。 12.4 贮存 12.4.1 产品应贮存于通风干燥的仓库内，严禁与有毒、有害、有异味的物品混放。 12.4.2 产品堆放应用离地面 10 cm 以上的木制、塑料垫板等铺垫地面。产品堆垛应离四周墙壁 50 cm以上。堆垛间应保留 50 cm 通道。 DB33/T 910 2013 7 13 生产档案建立 在生产过程中建立栽培管理和采收加工等相关的档案，并且档案记录保存三年以上。 DB33/T 910 2013 8 A A 附 录 A （规范性附录） 龙泉灵芝及龙泉灵芝孢子粉品质特征 A.1 品质特征 A.1.1 分级指标 龙泉灵 芝子实体按感官指

21、标分为一级、二级、三级和等外级，采集孢子粉后的子实体为等外级；其感官指标应符合表 2规定。龙泉灵芝孢子粉感官指标应符合表 3规定。 表 2 龙泉灵芝子实体分级指 标 项目 一 级 二 级 三 级 等 外 级 朵形 单朵、肾形或圆形，不畸形 朵形不完整，丛生、 叠生或畸形 菌盖 色泽 表面褐黄色或褐红色，有光泽，背面菌管层淡黄色 无要求 孢子粉 有 菌盖中心厚度， 1.5 无要求 直径， 12 9 11.9 6 8.9 5.9 菌柄， 2 虫孔、霉变， % 无 3 褐斑 无 允许有 杂质， % 无 滋味、气味 味苦，具有本品固有的气味，无异味 表 3 龙泉灵芝孢子粉感官 指标 项目 指 标 色泽

22、 棕褐色或咖啡色 滋味、气味 具有本品特有的滋味、几无苦味，略带灵芝气味，无异味 性状 在高倍显微镜下，孢子呈近椭圆形至卵圆形 ；粉状无结块、无杂质 DB33/T 910 2013 9 A.1.2 理化指标 龙泉灵芝子实体理化指标应符合表 4的规定，龙泉灵芝孢子粉理化指标应符合表 5的规定。 表 4 龙泉灵芝子实体理化指标 项 目 指 标 水分， % 13 灰分， % 1.5 粗多糖（以葡萄糖计） ， % 0.8 三萜（以齐墩果酸计）， % 1.1 表 5 龙泉灵芝孢子粉理化指标 项 目 指 标 水分， % 10 灰分， % 2.0 粗多糖（以葡萄糖计）， % 2.0 A.1.3 产品安全及其

23、它质量技术要求 应 符合 GB 2760、 GB 2762、 GB 2763规定。 A.2 检验方法 A.2.1 感官指标的测定 采用游标卡尺、手摸、眼观、鼻嗅和口尝及显微镜像的方法测定。 A.2.2 理化指标的测定 A.2.2.1 水分 按 GB 5009.3 规定执行。 A.2.2.2 灰分 按 GB 5009.4规定执行。 A.2.2.3 粗多糖 按 NY/T 1676 规定执行。 A.2.2.4 三萜 按附录 B规定执行。 A.3 检验规则 DB33/T 910 2013 10 A.3.1 抽样方法 来自同一产地按 CCGF 108.3规定执行。 A.3.2 判 定 规则 A.3.2.

24、1 检验结果中如有不合格项，对不合格项应加倍取样进行复检，若复检结果仍不合格，则判定该批产品不合格。 A.3.2.2 感官指标中以最低一项指标判定等级 。 DB33/T 910 2013 11 B B 附 录 B （规范性附录） 灵芝三萜含量的测定方法 B.1 范围 本标准规定了灵芝三萜的测定方法。 本标准适用于灵芝及其产品中灵芝 三萜含量的测定。 B.2 原理 灵芝及其产品中含有 100多种灵芝三萜，用乙醇加热回流并超声破壁，采用齐墩果酸作为对照品，经香草醛 高氯酸溶液显色后作全波长测定，以此计算样品中三萜含 量。 B.3 试剂 B.3.1 95%乙醇 分析纯 。 B.3.2 高氯酸 分析纯

25、 一级无机酸性腐蚀物品 。 B.3.3 冰醋酸 分析纯 。 B.3.4 香草醛 分析纯 称取香草醛 5克，加入冰醋酸 100 mL，溶解即得。 B.3.5 甲醇 分析纯 。 B.3.6 齐墩果酸标准溶液 ：精密称取 105干燥至恒重的齐墩果酸 10 mg，置于 10 mL的容量瓶中，加甲醇定容至刻度。 B.4 仪器、设备 B.4.1 分析天平：感量 0.0001 g。 B.4.2 752分光光度计 B.4.3 电热水浴锅 B.4.4 超声仪 B.4.5 离心机 B.5 测定步骤 B.5.1 样品的制备 DB33/T 910 2013 12 精密称取烘干的样品 0.5 g，用 95%的乙醇浸泡所

26、称样品并定容至 50 mL，超声提取 2 小时，其间经常摇动，于 4000 转 /分钟的离心机中离心 10 分钟，取上清液备用。 B.5.2 标准曲线绘制 精密吸取齐墩果酸标准溶液 0、 20 L、 40 L、 60L、 80 L、 100L、置于 10 mL 具塞试管中，用蒸馏水补足至 100 L，以下同 B.5.3，求得回归方程。 B.5.3 样品测定 精密吸取样品溶液 0.1 mL 于 10 mL 具塞试管中 ,加香草醛 0.2 mL, 高氯酸 0.5 mL,混匀后于 60 水浴中保温 20 分钟 ,取出后迅速冷却 , 再加入 5.00 mL 的冰醋酸，混匀后于 550 nm 处测定吸光

27、度。 B.6 计算公式 灵芝三萜含量 （ %）按公示 B.1计算： 10021 mVCVw . (B.1) 式中： w 灵芝三萜含量， %； C 从标准曲线上查得样品分解液的三萜含量， g； 1V 样品定容体积， mL； m 样品质量， g； 2V 比色测定时所移取试样分解液的体积， mL。 B.7 重复性 同一样品做两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 B.8 相对 误 差 10% 相对 误 差 10%。 DB33/T 910 2013 13 C C 附 录 C （规范性附录） 龙泉灵芝及龙泉灵芝孢子粉地理标志产品保护范围图 龙泉灵芝及龙泉灵芝孢子粉地理标志产品保护范围见图 C.1 图 C.1 龙泉灵芝及龙泉灵芝孢子粉地理标志产品保护范围 D DB33/T 910 2013 14 附 录 D （资料性附录） 龙泉灵芝标准化生产技术模式图 图 D.1 龙泉灵芝标准化生产技术模式图 _