GB 7650-1987 谷物籽粒色氨酸测定法.pdf
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1、GB 765087 1 适用范围 本标准适用于测定谷物籽粒色氨酸含量。 2 原理 谷物蛋白质碱解后,降解成肽和游离的氨基酸。在酸性介质中,有硝酸盐存在条件下,色氨酸吲哚环与对二甲胺基苯甲醛反应,生成蓝色化合物,在一定范围内颜色深浅与色氨酸含量成正比。 3 仪器、设备 3.1 分析天平,感量0.1mg。 3.2 实验室用粉碎机。 3.3 721型分光光度计,或相当的仪器。 3.4 离心机,4000r/min。 3.5 培养箱。 3.6 20ml具塞刻度玻璃试管(须校准)。 4 试剂 除注明者外均为分析纯。水为蒸馏水。 4.1 浓盐酸(GB 62277),比重1.19。 4.2 10盐酸溶液:22
2、.7ml浓盐酸加水至100ml。 4.3 5对二甲胺基苯甲醛(HGB 348662)溶液:5g 对二甲胺基苯甲醛溶于10盐酸中,并定容100ml。 4.4 1硝酸钠(GB 63677)水溶液( m/V)。 注:4冰箱中保存,一周内使用有效。 4.5 10氢氧化钾(GB 230680)水溶液( m/V)。 4.6 L-色氨酸,层析纯。 4.7 L-色氨酸标准溶液:准确称25mgL-色氨酸(105干燥2h),加少量0.1mol/L氢氧化钠(GB 62981)使之溶解,定量地转移到250ml棕色容量瓶中,用水定容。浓度为100 g/ml。 注:4冰箱中保存,一个月内使用有效。 5 试样的选取与制备
3、页码,1/3GB 7650872006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR765000A.htm 5.1 选取具有代表性谷物籽粒,挑拣干净,按四分法缩减取样,样量不得少于20g。籽粒充分风干后用粉碎机磨碎(带壳籽粒先脱壳),使95以上通过0.25mm孔径筛。 5.2 按GB 290682谷类、油料作物种子粗脂肪测定法脱脂并测定脂肪含量。脱脂样品风干后,混匀,装入磨口瓶中备用。 6 校准曲线的绘制 吸L-色氨酸标准溶液0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7ml分别置于20ml具塞刻度玻璃试管中,加1ml 10氢氧化钾溶液,摇匀;加0.2ml5对二甲胺基苯
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