DB21 T 4453-2026 辽东楤木组培繁殖技术规程.pdf

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1、ICS65.020.20CCS B 6121辽宁省地方标准DB21/T 44532026辽东楤木组培繁殖技术规程Technical regulation for tissue culture of Aralia elata2026-05-30 发布2026-06-30 实施辽宁省市场监督管理局发 布DB21/T 44532026I前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由辽宁省林业和草原局提出并归口。本文件起草单位：辽宁省森林经营研究所。本文件主要起草人：林晓坤

2、姜冬、常婧、张群野、宋诗雨、王品、马晓雨、高源、温福欣、苏蕾、杨双赫、罗彦昕、金鑫、尚福强、潘丕克、李沫蕊、任万福、任如月、张妍、于璐、邵立郡、刘晴、张丽艳、李成成、张利萍。本文件发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。归口管理部门通讯地址：辽宁省林业和草原局（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024-23448927。标准起草单位通讯地址：辽宁省森林经营研究所（丹东市元宝区金山镇新建街600号），联系电话：0415-4157090。DB21/T 445320261辽东楤木组培繁殖技术规程

3、1范围本文件规定了辽东楤木（Aralia elata）组培繁殖技术的术语和定义、培养基制备、外植体采集及处理、诱导培养、继代培养、生根培养、炼苗及移栽、苗木出圃和档案管理等技术与要求。本文件适用于辽东楤木组培繁殖育苗。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 42478 农产品生产档案记载规范LY/T 1882 林木组织培养育苗技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1辽东楤木 Aralia elata辽东楤木（Ar

4、alia elata），又名刺龙牙、刺嫩芽、刺老芽等，属五加科楤木属，落叶灌木或小乔木。形态特征和生物学特性参见附录A。3.2丛芽苗 multiple shoots培养材料在培养基上分化的多个基部相连的带芽小苗。3.3诱导培养 induction culture外植体接种到诱导培养基上，在适宜温湿度和光照条件下分化产生不定芽的过程。3.4继代培养 subculture诱导培养产生的不定芽切分成单株，转接到增殖培养基上继续培养扩增的过程。3.5DB21/T 445320262生根培养 rooting culture继代培养获得的无根芽苗转接到生根培养基上产生根的过程。4培养基制备4.1培养基配方

5、4.1.1基本培养基采用MS培养基，具体成分按照附录B执行。4.1.2诱导培养基MS0.5 mg/L 6-BA30 g/L 蔗糖7 g/L 琼脂，pH 5.86.2。4.1.3增殖培养基MS1.5 mg/L 6-BA0.6 mg/L IAA0.2 mg/L GA330 g/L 蔗糖7 g/L 琼脂，pH 5.86.2。4.1.4生根培养基1/2MS0.2 mg/L IAA30 g/L 蔗糖7 g/L 琼脂，pH 5.86.2。4.2培养基配制培养基配制方法按照LY/T 1882相关要求执行。4.3培养基灭菌将培养基放入高压蒸汽灭菌器内，在压力0.105 MPa下、温度121 时，灭菌20 mi

6、n。增殖培养基高压灭菌后放置在已灭菌的超净工作台中，冷却至50 60，加入通过0.22m滤膜过滤除菌的GA3。4.4培养基保存及使用灭菌后的培养基应保存于洁净环境中，注意避光和防尘。培养基常温条件下7 d内使用，2 4 条件下14 d内使用。5外植体采集及处理5.1外植体采集春季芽开始萌发时采集。选择无病虫害、生长健壮的优良无性系或优良单株，剪取萌发长度1 cm2 cm的嫩芽作为外植体，带回组培室，用流水冲洗干净。5.2外植体消毒外植体在超净工作台先用75%乙醇溶液浸泡消毒15 s，无菌水冲洗3次，再用0.1%升汞消毒10 min，期间不断摇晃，用无菌水冲洗4次5次，最后用无菌滤纸吸干水分，置

7、于无菌不锈钢小盘上。6诱导培养DB21/T 4453202636.1外植体接种在超净工作台上，用已灭菌的镊子和解剖刀剥去外植体鳞片和大部分幼叶，接种于诱导培养基中，数量为3个4个/瓶。将瓶口封好，备注材料名称、编号、接种日期等。6.2培养条件温度：252，光照强度：1500 lux2000 lux，光照时间：12 h/d14 h/d。6.3芽诱导将接种在诱导培养基的外植体置于培养室培养30 d35 d，萌发产生不定芽。7继代培养7.1继代接种将外植体诱导出的芽或继代培养产生的丛芽苗连带愈伤组织进行切分，每块愈伤组织1个2个芽，转接至增殖培养基，一般3块4块/瓶。7.2继代周期每隔30 d35

8、d将继代苗转接至增殖培养基，继代培养控制在8代内，培养条件见6.2。8生根培养将生长健壮、高度2 cm3 cm的丛芽苗切分成单株，切除全部愈伤组织，转接至生根培养基，接种数量10株/瓶，培养25 d30 d，培养条件见6.2。9炼苗及移栽9.1炼苗选择苗高3 cm4 cm、具3片5片绿叶、根数5条、根长2 cm以上、生长健壮的组培苗进行炼苗。炼苗在温室内进行，遮光70%80%，温度控制在18 28，湿度80%90%，去除培养瓶的封口材料，开瓶锻炼1 d3 d。9.2移栽9.2.1移栽时间组培苗移至温室栽培可全年进行。9.2.2移栽容器及基质移栽容器为上口径3.4 cm，底部1.5 cm，深度4

9、0 cm的穴盘。移栽基质为草炭、蛭石与珠岩，按照311的比例混匀，装满穴孔，浇透水。9.2.3洗苗将组培苗从培养瓶取出，用18 20 清水洗净根部培养基，保湿备用。DB21/T 4453202649.2.4穴盘移栽用直径0.5 cm木棍在穴盘基质上插孔，镊子轻夹幼苗根部轻置于孔底，让根系尽量舒展，摆正小苗，用基质覆盖至组培苗基部，稍微压实。9.3移栽管理9.3.1穴盘苗管理将穴盘组培苗摆放在温室拱棚中，遮阴50%，每天喷雾，保证拱棚内空气湿度90%以上，白天温度控制在23 30，夜间温度不低于15。移栽10 d14 d即缓苗期过后逐渐揭膜通风，减少喷雾次数，20 d后可撤掉拱棚薄膜。移栽30

10、 d后，喷施0.2%的尿素和磷酸二氢钾1 次。9.3.2营养钵苗管理组培苗在穴盘中生长30 d40 d后，可移栽至营养钵中。移栽时要求基质不散落，埋土至根基，压实浇透水。移栽后遮阴35%40%，1个月后撤掉遮阴网。10苗木出圃10.1苗木等级划分对生长健壮，地径、苗高和根系达到一定标准的苗木进行等级划分，详见附录C。10.2苗木出圃营养钵苗生长达到苗木等级、级，即可成苗、出圃。11档案管理建立育苗管理档案，具体按GB/T 42478执行。DB21/T 445320265AA附录A（资料性）辽东楤木形态特征和生物学特性落叶灌木或小乔木，高达1.5 m6 m。树皮灰色，少分枝。小枝灰褐色，密生或疏

11、生针刺。二至三回奇数羽状复叶，长达80 cm，总叶柄长，基部抱茎，常集生于枝端；叶柄、叶轴及小叶轴均有刺；叶片卵形或椭圆状卵形，基部圆形，宽楔形或微心型，先端渐尖，边缘疏生锯齿。伞形花序聚生为伞房状圆锥花序，顶生；花萼杯状，萼齿5；花瓣5，淡黄色；雄蕊5；子房下位，5室，花柱5，离生或基部合生。果具5棱，熟时黑色，径为0.4 cm。花期7月8月，果期9月10月。产于中国东北及河北等地。朝鲜、俄罗斯和日本有分布。喜光，较耐阴，喜湿润肥沃土壤，常生于阔叶林及针阔混交林内或林缘、山谷、阴坡较湿润处。DB21/T 445320266BB附录B（规范性）MS 基本培养基配方MS基本培养基配方见表B.1。

12、表 B.1 MS 基本培养基配方母液种类及倍数试剂配方规定量（mg/L）配1 L母液称取量（mg）配1 L培养基吸取量（mL）大量元素（50 x）KNO31900950020NH4NO3165082500MgSO47H2O37018500KH2PO41708500CaCl22H2O44022000铁元素（500 x）Na2EDTA2H2O37.3186502FeSO47H2O27.813900有机物（500 x）盐酸硫胺素0.1502盐酸吡哆醇0.5250烟酸0.5250甘氨酸21000肌醇10050000微量元素（500 x）MnSO44H2O22.3111502ZnSO47H2O8.64300H3BO36.23100KI0.83415Na2MoO42H2O0.25125CuSO45H2O0.02512.5CoCl26H2O0.02512.5DB21/T 445320267CC附录C（资料性）辽东楤木组织培养苗木等级划分辽东楤木组织培养苗木等级划分参照表C.1执行。表 C.1辽东楤木组织培养苗木等级划分组培苗苗木等级综合控制指标级苗级苗地径（cm）苗高（cm）侧根地径（cm）苗高（cm）侧根长度（cm）根数（个）长度（cm）根数（个）0.8101280.50.861081258苗健壮、叶完整、根系无损伤、无病虫害。