SN T 5208-2021 短体线虫(非中国种)检疫鉴定方法.pdf
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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 5208 2021 短体线虫(非中国种)检疫鉴定方法 Detection and Identification of Pratylenchus spp. (non-Chinese species) Filipjev, 1936 ICS 65.020 CCS B 16 2021-11-22 发布 2022-06-01实施 中华人民共和国海关总署 发 布I SN / T 5208 2021 前 言 本 按照 GB / T1.1 2020给出的规则起草。 本 由 提出并归口。 本 起草单位:中国检验检疫科学研究院、 北京海关、 天 津海关、 宁波海关、
2、 广州海关。 本 主要起草人:葛建军、王旭、熊玉芬、边勇、王金成、顾建锋、赵立荣。1 SN / T 5208 2021 短体线虫(非中国种)检疫鉴定方法 1 范围 本标准规定了短体线虫 ( 非中国种 ) 检疫鉴定方法。 本标准适用于进出境植物苗木及携带土壤、植物栽培介质中的短体线虫(非中国种)检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 SN / T 2122 2008进出境植物及植物产品检疫抽样 GB / T 24831 2009香蕉穿孔线虫检疫鉴
3、定方法 3 短体线虫基本信息 中文名:短体线虫属 学名:Pratylenchus Filipjev, 1936 英文名:Root-lension nematodes 分类地位:线虫门 Nematoda、侧尾腺纲 Secementea、垫刃目 Tylenchida、垫刃亚目 Tylechina、垫 刃总科 Tylenchoidea、短体科 Pratylenchidae、短体亚科 Pratylenchinae。 传播途径:短体线虫主要依靠带根苗木、土壤等寄主材料的调运做远距离的传播;农事操作中 农机具和人员等的黏带以及灌溉和风雨运动可造成近距离扩散。 短体线虫属目前共有 78 个有效种,其中咖啡短
4、体线虫 P. coffeae、穿刺短体线虫 P. penetrans、伤 残短体线虫 P. vulnus、玉米短体线虫 P. zeae、艾蒿短体线虫 P. artemisiae、山药短体线虫 P. dioscoreae 和异玉米短体线虫 P. parazeae 为中国已有发生的种类,其余为非中国种。其寄主范围和地理分布等 相关信息参见附录 A。 4 方法原理 短体线虫主要在根部皮层取食,造成伤痕,引起根部组织坏死腐烂。在植物根上最明显的表现就 是在所取食的细根上存在明显的病斑。病斑呈淡黄色至褐色,病斑伸长方向和根的纵轴平行。病害严 重时根全部病成黄褐色。植株的根受害后可能会表现出根丛生或比正常
5、植株的根少。从寄主植物根系 及根围土壤或介质中分离获得线虫后,用显微镜观察。根据线虫成虫的形态特征,结合寄主范围、地 理分布和传播途径对线虫进行属种的判定。 5 仪器设备和主要试剂 5.1 仪器设备 显微镜(100 倍以上) 、体视显微镜 (10 倍以上 , 具透射光源 )、加热板、水浴锅、离心机。2 S N / T 5208 2021 5.2 器具 自封袋、钟面皿或培养皿、载玻片、盖玻片、网筛(20 目、100 目、500 目) 、烧杯 (500 mL、 1000 mL)、漏斗、漏斗架、乳胶管或硅胶管、止水夹、小镊子、剪刀、挑针、浅盘、线虫滤纸或卫生 纸、酒精灯、干燥器、试管。 5.3 主要
6、试剂 4% 甲醛、指甲油、甘油、无水乙醇、石蜡、蔗糖。 6 现场检疫 将其主要寄主植物作为现场检疫最重要的对象。注意观察植株的生长状况,重点对植物种苗的根 系进行检查,注意检查是否有变褐和坏死等症状;以及寄主植物及其产品是否带土壤或栽培介质。重 点选择上述可疑植物材料及土壤或栽培介质取样。如无可疑症状则按 SN / T 2122-2008 5.5 抽样。 7 实验室鉴定 7.1 线虫分离 按照 GB / T 24831-2009 附录 A 中的方法分离线虫。 7.2 体视显微镜观察 分离获得的线虫样品在生物体视显微镜下观察。雌虫和雄虫均为长蠕虫形,挑取线虫制成临时玻 片或永久玻片在生物显微镜下
7、观察线虫形态。 具体玻片标本制作方法参见 GB / T 24831-2009 附录 B。 7.3 生物显微镜观察和测量 在生物显微镜下观察线虫的形态结构,对照短体线虫的主要鉴定特征进行重点观察、拍摄、测 计。在线虫样品数量充足时,应观察雌、雄虫各 20 条以上。 8 形态鉴定特征 8.1 短体线虫属形态鉴定特征 8.1.1 短体线虫属形态特征描述 虫体短胖的圆柱形,长度小于 1mm。头部较宽阔,尾部钝圆。除了六沟纹短体线虫 (Pratylenchus hexincisus)有 6 条刻线以外,其侧区只有 4 条刻线,其它一些种类中有极少的个体存在差异。侧尾 腺口位于肛门后尾长的 1/3 处,或
8、更后一些。头骨架骨化,有折光性。口针粗,长 14m 19m, 具强壮的基部球。中食道球椭圆形,大于颈部 1/2 体宽。食道基部球向后伸展覆盖肠端,通常在腹侧 面与肠相交。 贲门、排泄孔均明显。 阴门横裂,阴道向内并略向前斜伸。 前卵巢伸展,后阴子宫囊退化。 通常较少发现雄虫。交合伞包裹尾部,具侧尾腺孔,位于交合伞基部附近。交合刺略成弓形。 8.1.2 短体线虫属与近似属的鉴定特征比较 短体线虫属与其近似属的鉴定特征比较参见附录 B C。3 SN / T 5208 2021 8.2 短体线虫属非中国种形态特征描述 8.2.1 草地短体线虫(附 录D图D.1) 学名 Ptatylenchus pr
9、atensis(De Man,1880)Filipjev,1936 雌虫 温热杀死后体略弯。侧区 4 条侧线,外部侧线锯齿状,侧带光滑无横纹,体中部侧区占体 宽的 1/4。唇区较高,前端略平,近圆形,唇环 3 条,第一条唇环窄于后两条唇环。头骨架发达,向 体后延伸至第一条体环的后缘。头小体位于第三条体环处。口针强壮,口针基球较大,呈杯状。背食 道腺开口距口针基部球末端 2.5m。中食道球卵圆形,占该处体直径的 1/2。排泄孔和食道与肠连接 处几乎处于同一水平线上,半月体在排泄孔的前方,有半月小体。食道腺从腹面和侧面覆盖肠前端, 长度约 25m。 单卵巢前伸,卵母细胞单行排列。 受精囊长方形或卵
10、圆形,内有精子。 后阴子宫囊较短, 长为阴门处体直径的 1.6 2.7 倍,未见细胞分化。阴道短、直。尾亚圆柱形或锥形,末端钝尖或圆。 尾端具环纹,侧尾腺孔位于尾的中后部,腹面尾环 27 条。 雄虫 虫体比雌虫略短,体前部与雌虫相似。交合伞中等宽度,长约 35m ;交合刺发达,长 20m ;引带长 3.3m。侧尾腺孔位于尾的中后部。 8.2.2 锐尾短体线虫(附 录D图D.2) 学名 P . acuticaudatus Braasch Q.serrata、山樱 日本 34 P . kasari 簇生银须草 俄罗斯、波兰 35 P . kralli 黑醋栗 秘鲁、爱沙尼亚 36 P . kuma
11、motoensis 菊花 日本 37 P .kumaoensis 杨属 印度 38 P . lentis 小扁豆 西西里岛33 续表 序 号 种名 寄主范围 地理分布 39 P .loosi 茶、柑橘、咖啡、面包树、香蕉 日本、韩国、斯里兰卡、印度、塞内加 尔、爪哇、美国、俄罗斯、中国台湾、瓜 德罗普岛、伊朗、佛罗里达、 萨摩亚 40 P .macrostylus Betura papyrifera、白云杉、黄衫、香脂冷杉、红 云杉、洋白菜 加拿大、美国、乌兹别克斯坦 41 P .manaliensis 苹果 印度 42 P .mediterraneus 埃及三叶草、鹰嘴豆、小扁豆、小麦、菊花
12、 土耳其、叙利亚、以色列、韩国 43 P .microstylus 假高粱 印度 44 P .morettoi Plagiobothrys stipitatus 根际土壤 美国 45 P .mulchandi 高粱 印度 46 P .neglectus 大麦草、卷心菜、草莓属、苹果、紫花苜蓿、马铃 薯、小麦、玉米、黄瓜 德国、加利福尼亚州、爱荷华州、纽约、 俄亥俄州、华盛顿、加拿大、保加利亚、 克罗地亚、爱沙尼亚、法国、意大利、波 兰、葡萄牙、俄罗斯、斯洛文尼亚、 、斯 洛伐克、西班牙、南斯拉夫、阿尔及利 亚、突尼斯、摩洛哥、南非、印度、伊 朗、日本、阿曼、土耳其、美国、阿根 廷、 、墨西哥、
13、澳大利亚 47 P .neobrachyurus 须芒草属根际土 哥伦比亚 48 P .okinawaensis 刺楸、算盘子、血桐、小叶交让木、海桐、木姜 子、酪梨、柳杉、琉球松 日本 49 P . oleae 橄榄 西班牙、突尼斯 50 P .panamaensis 咖啡根际 巴拿马 51 P . parafloridensis Panicum hemitomon 美国佛罗里达 52 P . parazeae 甘蔗 中国广西34 续表 序 号 种名 寄主范围 地理分布 53 P . penetrans 咖啡、黄葵、洋葱、 葱、大葱 , 韭葱、大蒜、旱芹、 花生、羽叶蕨、牛蒡、紫云英、燕麦、
14、厚皮菜、芥 菜 (原变种) 、欧洲油菜 ( 原变种 )、芥末、卷心菜、 花椰菜、芽甘蓝、羽衣甘蓝、 中国大白菜、芜箐甘 蓝、 日本芜菁、木豆、金盏花、茶、辣椒、番木 瓜、 菊花、 小菊、酸橙、柠檬、 脐橙、芋、鸭儿芹、 黄瓜、南瓜、西葫芦、榅桲、菜蓟、胡萝卜、薯 蓣、日本薯蓣、食用稗、牛筋草、草莓、大豆、棉 花、大麦、啤酒花、甘薯、苦荬菜、莴苣、胡枝子 属、截叶铁扫帚、滨菊、亚麻、多花黑麦草(意大 利黑麦草) 、百脉根、丝瓜、羽扇豆、番茄、苹果、 欧洲野苹果、薄荷、胡椒薄荷、留兰香、香蕉、甘 蕉、夹竹桃、烟草、黑种草、水稻、欧防风、蜂斗 菜、欧芹、红花菜豆、菜豆、梯牧草、天蓝绣球、 海枣、新西
15、兰麻、黄连木属、阿月浑子、豌豆、紫 花豌豆、地早熟禾、萹蓄、核果、扁桃、杏、甜 樱桃、樱桃李、欧洲酸樱桃、欧洲李、圆叶樱桃、 桃、野黑樱桃、西洋梨、杂配藜、皋月杜鹃、黑醋 栗、红醋栗、醋栗、蔊菜、蔷薇、伞房蔷薇、多 花蔷薇、树莓、甘蔗、黑麦、芝麻、马铃薯、苏丹 草、菠菜、除虫菊、红花除虫菊、可可、白花紫露 草、瑞士三叶草、白三叶草、半纤毛白三叶、郁金 香、美国榆树、蓝莓、小巢菜、大巢菜、长柔毛 野豌豆、玉米。中国有报道的寄主有甘薯、蒺藜 .、 梨树、核桃 阿塞拜疆、巴基斯坦、朝鲜、菲律宾、吉 尔吉斯斯坦、科威特、日本、沙特阿拉 伯、土耳其、乌兹别克斯坦、新加坡、印 度、越南、阿尔巴尼亚、爱沙尼
16、亚、保加 利亚、比利时、波兰、丹麦、德国、俄罗 斯、法国、芬兰、荷兰、捷克斯洛伐克、 罗马尼亚、摩尔多瓦、挪威、葡萄牙、瑞 典、瑞士、塞尔维亚和 Montenegro、塞浦 路斯、斯洛伐克、西班牙、希腊、匈牙 利、意大利、英国、阿尔及利亚、埃及、 津巴布韦、肯尼亚、利比亚、摩洛哥、纳 米比亚、南非、尼日利亚、坦桑尼亚、突 尼斯、澳大利亚、库克群岛、新西兰、加 拿大、美国、墨西哥、阿根廷、巴西、委 内瑞拉、中美洲和加勒比地区 哥斯达黎 加、立尼达和多巴哥、中国福建、吉林、 江西、陕西、四川、浙江和台湾。 54 P .pinguicaudatus 小麦、谷物、草本植物 英国、北非、保加利亚、波兰、
17、西班牙、 澳大利亚 55 P . pratensis 葡萄 、草坪 、牧场 、谷物 、水果 、玉米 、小麦 、 龙眼、甘蔗、草莓、苹果、猕猴桃、康乃馨、烟 草、番茄、水稻、Valeriana officinalis、Dimocarpus longan、Actinidia deliciosa 印度、荷兰、芬兰、德国、比利时、保 加利亚、意大利、俄罗斯、美国、加拿 大、古巴、墨西哥、摩尔达维亚、斯洛伐 克、斯洛文尼亚、波兰、西班牙、阿尔及 利亚、利比亚、南非、阿塞拜疆、巴基斯 坦、乌兹别克斯坦 56 P .pratensisobrinus 堇菜属 、亚香茅 、榛子果园 、 Viola langsd
18、orffii、 Cymbopogon nardus (L.)R. 美国、泰国、土耳其 57 P .pseudocoffeae 菊花、小艾、 Artemisia feddei Lev.er Van. 日本、美国 58 P .pseudofallax 苹果 巴西 59 P .pseudopratensis 高粱 、草莓 、苹果 、玉米 、 Pennisetum typhoides (L.)Leeke、大豆、Armoracia rusticana 土耳其、荷兰、俄罗斯、美国、波兰、斯 洛文尼亚、非洲西部、巴西、巴基斯坦 60 P .roseus 长春花、辣椒、麻风树、蔷薇 巴基斯坦 61 P .sc
19、ribneri 棉花 、苹果 、荷兰薄荷 、银胶菊 、马铃薯 、假 高粱 、玉米 、玫瑰 、 Cymbidium sp. 、洋葱 、大 豆、Setaria 番 茄、Amaryllis、甘蔗 、 Lathyrus、 Prunus、 Berberis、香蕉 、烟草 、 Hippeastrum、 Saccharumofficinarum L. 美国、墨西哥、阿根廷、委内瑞拉、巴 西、日本、阿曼、印度、巴基斯坦、韩 国、以色列、土耳其、保加利亚、瑞典、 斯洛文尼亚、澳大利亚、意大利、埃及、 南非、尼日利亚、 约旦、巴西 62 P .sensillatus 猫尾草、燕麦 加拿大35 续表 序 号 种名
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