GA T 187-2021 法庭科学 生物检材中敌敌畏和敌百虫检验 气相色谱-质谱和液相色谱-质谱法.pdf
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1、 HHP ICS 13.310 CCS A 92 中 华 人 民 共 和 国 公 共 安 全 行 业 标 准 GA GA/T 187 代替 GA/T 187-1998 法庭 科学 生物检材 中敌敌畏 和 敌百虫 检 验 气 相色谱-质谱 和 液相色谱- 质谱法 Forensic sciences Examination methods for dichlorvos and trichlorfon in biological samples GC-MS and LC-MS - 发布 - - 实施 中 华 人 民 共 和 国 公 安 部 发布 GA/T 187 I 前 言 本文件 按 照 GB/T
2、 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第 1 部分: 标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规定 起草。 本 文件 代替 GA/T 1871998 中 毒检 材中 敌敌 畏、 敌 百虫的 定性 及定 量分 析方 法 , 与 GA/T 187 1998 相比 ,除 编辑 性修 改 外主要 技术 变化 如下 : 修 改了 标准 名称 (见 封面,1998 年 版的 封面 ) ; 修 改了 范围 的有 关内 容(见 第 1 章,1998 年 版 的第 1 章) 增 加了 液相 色谱 定性 定量分 析方 法( 见 第 1 章 第 8 章 ); 修 改了 规范 性引 用文 件的有 关内 容( 见
3、 第 2 章,1998 年 版的 第 2 章) 修 改了 气相 色谱 法的 原理( 见 第 4 章,1998 年 版的 第 4 章 ); 修 改了 气相 色谱 法的 试剂( 见 第 5 章,1998 年 版的 第 5 章 ); 修 改了 气相 色谱 法的 仪器 与 器材 (见 第 6 章,1998 年 版的 第 6 章) ; 修 改了 气相 色谱 法的 定性定 量分 析( 见 第 7 章,1998 年 版的 第 7 章) ; 删 除了 薄层 色谱 法的 有关内 容( 见 1998 年版 的 第 11 章 第 16 章 ); 删 除了 化学 快速 检验 法的有 关内 容( 见 1998 年 版的
4、 第 17 章) ; 修 改了 附 录 A 的有 关 内容( 见附 录 A ,1998 年 版的附 录 A ) ; 增 加了 附 录 B 的有 关 内容( 见附 录 B ) 。 请注意 本文 件的 某些 内容 可能涉 及专 利 。 本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任 。 本文件 由全 国刑 事技 术标 准化技 术委 员会 毒物 分析 分技术 委员 会 (SAC/TC 179/SC 1 ) 提 出并归 口 。 本文件 起草 单位 :公安 部 物证鉴 定中 心 、 濮阳 市公安 局。 本文件 主要 起草 人 : 董 林 沛、 任昕 昕 、 王瑞 花、 张梦 娟、 王爱 华、 常靖
5、、 于 忠山 、 张 云峰 、 魏 春明 。 本标准 的历 次版 本发 布情 况为: GA/T 1871998 。 GA/T 187 1 法庭科学 生 物检 材 中 敌敌 畏 和敌百 虫 检验 气相色谱-质谱 和 液相色谱-质谱 法 1 范围 本 文件 规定 了法 庭科 学领域 生物 检材 ( 血 、 尿 、 肝 、 肾、 胃及 胃内 容 等)中 敌 敌畏 的 气相 色谱- 质谱 (GC-MS )定性 检 验方 法 和敌敌 畏、 敌百 虫的 液相 色谱- 质 谱(LC-MS ) 定性 定量 检 验方 法 。 本 文件 适用 于 法 庭科 学领域 生物 检材 ( 血 、 尿 、 肝 、 肾、 胃
6、及 胃内 容 等 ) 中 敌 敌畏 的 气相 色谱- 质谱 定性分 析和 敌敌 畏 、 敌百 虫 的液 相色 谱-质谱 定 性定 量分析 。其他 检材 可 参照 使用。 2 规范 性引 用文 件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款 。 其 中 , 注日 期的 引用 文件, 仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件; 不注 日期 的引 用文件 , 其 最新 版本 (包 括所有 的修 改单 ) 适 用于 本 文件。 GB/T 6682 分析 实验 室用 水规格 和试 验方 法 GA/T 122 毒物 分析 名词 术语 3 术语 和定 义 GA
7、/T 122 界 定的 术语 和定 义适用 于本 文件 。 4 原理 以空白 样品 和添 加样 品做 对照, 按平 行操 作的 要求 , 对生 物检 材样 品进 行提 取、 净 化及 浓缩 , 采 用 气相色 谱- 质谱 法检 测, 以 保留时 间 、 质 谱特 征离 子 和离子 丰度 比作 为定 性判 断依据 ; 采用 液相 色谱- 质 谱法检 测 , 以保 留时 间、 质谱特 征离 子对 和离 子对 丰度比 作为 定性 判断 依据 , 以峰 面积 为依 据, 采用 外 标法进 行定 量分 析。 5 试剂 和材 料 5.1 试剂 气 相 色 谱- 质谱法 实 验 用 水 应 符 合GB/T
8、6682 中 规 定 的 三 级 水 , 液 相 色 谱- 质谱 法 实 验 用 水 应 符 合 GB/T 6682 中规 定的 一级 水 。除非 另有 说明 ,在 分析 中使用 的试 剂均 为分 析纯 ,试剂 包括 : a) 乙酸乙 酯 ; b) 二氯甲 烷 ; c) 乙腈( 色谱 纯) ; d) 甲醇; e) 盐酸溶 液 : 移取 盐酸 (含 量 36%38% )1mL 溶 于水 中 ,并 定容 至 100mL ; f) 0.1% 甲 酸溶 液 : 移取 甲酸 (色谱 纯)1mL 溶于 水中 ,并定 容 至 1000mL ; g) 标准溶 液 ; GA/T 187 2 1) 1.0mg/m
9、L 标 准物 质储备 液 :根据 敌敌 畏和 敌百 虫标 准物质 的纯 度, 称取 适量 ,分 别 用甲醇 配制 1.0mg/mL 敌 敌畏和 敌百 虫标 准物 质溶 液, 密 封,04 保存 。 有效期 6 个月 。或 采用 市售 标准 溶液; 2) 10.0 g/mL 单 一标 准工 作 溶液 : 移取 1.0mg/mL 的 敌敌畏 和敌 百虫 标准 物质 储备液 各 0.1mL ,分别 用 甲醇 配制 成 浓度 为 10.0 g/mL 的 单一 标准工 作溶 液 , 密封 ,04 保存。 有效 期 1 个月 。 实 验中所 用其 他浓 度的 单一 标准工 作溶 液均 由 10.0 g/m
10、L 标 准工作 溶 液 用甲 醇配制 得 到。 5.2 材料 材料 包 括: a) 具盖离 心管 ; b) 具塞玻 璃试 管 ; c) 固相萃 取柱 :Oasis HLB 柱或等 效固 相萃 取柱 ; 注:Oasis HLB 柱是 Waters 公司产品的商品名称, 给出这一信息是为了方便本标准的使用者, 并不是表示对该产 品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果,则可使用这些等效产品。 d) 一次性 注射 器 ; e) 有机系 微孔 滤膜 :0.22 m 。 6 仪器 和设 备 仪器和 设备 包括 : a) 气相色 谱- 质 谱仪 :配 有电 子轰击 源(EI); b) 液相色 谱- 质 谱
11、仪 : 配 有电 喷雾离 子源 (ESI ) 和三 重 四极杆 质量 分析 器 ; c) 电子天 平 : 分度 值 d0.01mg ; d) 离心机 ; e) 振荡器; f) 移液器 ; g) 浓缩器 。 7 操作 方法 7.1 定 性分 析 7.1.1 样品 前处 理 7.1.1.1 液液 萃取 移取血液等液体检材样 品1.0mL ,或称取铰碎或 匀浆 的肝脏等 固体检材样品1.0g 于具盖离心管中, 加入乙酸乙酯4.0mL ,振荡5min ,以不低于8000r/min 离心10min ,分离有机相 ; 重复提取一次,合 并两 次提取 的有 机相 , 置于 浓 缩器上45 浓缩 至干 , 残
12、 留物用 甲醇0.2mL溶解 , 作 为检材 样品 提取 液 , 供GC- MS分析 或经0.22m 的有机 系微孔 滤膜 过滤 后, 作为 检材样 品提 取液 ,供LC-MS 分析 。 注: 检材样品取样量、提取溶剂体积及定容体积可根据实际情况调整。 7.1.1.2 蛋 白沉 淀 移取血 液等 液体 检材 样品 0.5mL , 或称 取铰 碎或 匀浆 的肝脏 等 固 体检 材样 品 0.5g 于具盖 离心 管中 ,GA/T 187 3 加入 1.5mL 乙腈, 振 荡 10min , 用离心 机 以 不低 于 8000r/min 离心 10min , 取 上 清液 经 0.22m 的 有机
13、系 微孔滤 膜过 滤, 作为 检材 样品提 取液 , 供 LC-MS 分析 。 注: 检材样品取样量和乙腈体积可根据实际情况调整。 7.1.1.3 固 相萃 取 移取血液等液体检材样 品1.0mL ,或称取铰碎或 匀浆 的肝脏等 固体检材样品1.0g 于具盖离心管中, 加入4mL1% 盐酸 溶液 稀释 ,振荡10min ,以不 低于8000r/min 离心10min 。 取上 清液转移 至已 活化好 的固 相萃取 柱中 (使 用前 依次 用甲醇 、 水 进行 活化 ) , 上 清液过 柱流 速 不 超过0.5mL/min , 依次用 水1mL、甲 醇/ 水溶液( 体 积比5:95) 1mL 淋
14、 洗, 抽 干弃 去淋 洗液 , 挤干水 分或 离心 或真 空抽 固相萃 取柱2min , 用 乙酸 乙酯或二氯甲烷3mL 洗脱 , 洗脱液 流速不超过0.5mL/min 。收集洗脱液并置于浓缩器上45 浓缩至干 , 残留物用甲醇0.2mL 溶解, 作为检材样品提取液 , 供GC-MS 分 析或用0.22m 的有机系微孔滤膜过滤 后, 作为检 材样 品提 取液 , 供LC-MS 分析。 注: 检材样品取样量、定容体积可根据实际情况调整。 7.1.1.4 质控 样 品制 备 取等量 相似 基质 的空 白样 品 ( 若无 相似 基质 空白 样 品可用 血液 替代 ) 两份 于 具盖离 心管 中 ,
15、 一 份作 为空白 样品 , 一 份添 加单一 标准 工作 溶液 , 使 敌敌 畏 浓度 为1.0 g/mL (g) ( 用于GC-MS 分 析) 或 使敌 百虫 、 敌 敌畏 浓度 为20ng/mL (g) ( 用于LC-MS 分 析 ) , 作 为添 加样 品 , 与 检 材样品 平行 操作 , 得到 空 白样品 提取 液和 添加 样品 提取液 ,供 仪器 检测 。 7.1.2 仪器 检测 7.1.2.1 仪 器条 件 7.1.2.1.1 气相 色谱-质谱 仪条件 以下为 参考 条件 ,可 根据 不同品 牌仪 器和 不同 样品 等实际 情况 进行 调整 : a) 色谱柱 :DB-5MS 毛
16、细 色 谱柱 (30m 0.25mm ,0.25 m ) 或等效 色谱 柱 ; 注:DB-5MS 毛细色谱柱是 Agilent 公司产品的商品名称,给 出这一信息是为了方便本标准的使用者,并不是表示 对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果,则可使用这些等效产品。 b) 色谱柱 升温 程序 :80保持 2min,以 30/min 速率 升温 至 280 , 保持 15min ; c) 进样口 温度 :280 ; d) 传输线 温度 :230 ; e) 载气: 氦气 ; f) 电子轰 击能 量:70eV ; g) 离子源 温度 :230 ; h) 载气: 高纯 氦 ; i) 扫描方 式:
17、全扫 描(SCAN ), 敌 敌畏 的定性 离子 m/z79,m/z109 ,m/z185 ; j) 溶剂延 迟:3min ; k) 柱流量 :1.0mL/min ; l) 进样方 式: 分流 进样 ;分 流比:10:1 ; m) 质量范 围:40amu 460amu 。 7.1.2.1.2 液相 色谱-串联 质谱仪 条件 以下为 参考 条件 ,可 根据 不同品 牌仪 器和 不同 样品 等实际 情况 进行 调整 : a) 色谱柱 :ACQUITY UPLC HSS T 3 (2.1mm 150mm, 1.7 m) 或 其他 等效 柱; GA/T 187 4 注:ACQUITY UPLC HSS
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