DB5206 T81—2018 红薯脱毒种薯检验规程.pdf

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1、ICS 65.020B 30 DB5206铜 仁 市 地 方 标 准DB 5206/T 81 2018代 替 DB 522200/T 62-2009红 薯 脱 毒 种 薯 检 验 规 程 2018-12-06 发 布 2018-12-06 实 施铜 仁 市 质 量 技 术 监 督 局 发 布 DB 5206/T 81 2018 I 目 次前 言 .1 适 用 范 围 .12 规 范 性 引 用 文 件 .13 术 语 和 定 义 .14 控 制 和 汰 除 的 病 害 .25 质 量 要 求 .2 6 检 验 方 法 .27 判 定 规 则 .5 DB 5206/T 81 2018 II 前

2、言本 标 准 按 照 GB/T 1.1-2009 标 准 化 工 作 导 则 第 1部 分 ： 标 准 的 结 构 和 编 写 给 出 的 规则 起 草 。请 注 意 ： 本 文 件 的 某 些 内 容 可 能 涉 及 专 利 ， 本 文 件 的 发 布 机 构 不 承 担 识 别 这 些 专 利 的 责任 。 本 标 准 代 替 DB 522200/T 62-2009 红 薯 脱 毒 种 薯 检 验 规 程 。 主 要 变 化 是 进 行 编 辑 性 修改 。 本 规 程 由 铜 仁 市 农 业 委 员 会 提 出 并 归 口 。本 规 程 起 草 单 位 ： 铜 仁 市 种 子 管 理 站

3、 。本 规 程 参 加 单 位 ： 思 南 县 农 牧 科 局 、 松 桃 县 种 子 管 理 站 、 沿 河 县 种 子 管 理 站 、 石 阡 县 种 子 管 理 站 、 印 江 县 种 子 管 理 站 、 万 山 区 种 子 管 理 站 、 玉 屏 县 种 子 管 理 站 、 德 江 县 种 子 管 理 站江 口 县 种 子 管 理 站 、本 规 程 主 要 起 草 人 ： 李 朝 霞 、 李 永 凤 、 甘 坤 俊 、 罗 会 群 、 邓 娅 、 代 洪 江 、 冉 小 芳 、 安兴 智 、 张 羽 军 、 王 显 权 、 廖 雪 红 、 石 俊 、 陈 正 福 、 陈 忠本 标 准

4、的 历 次 版 本 发 布 情 况 为 ： DB 522200/T 62-2009。 DB 5206/T 81 2018 1 红 薯 脱 毒 种 薯 检 验 规 程1 适 用 范 围本 规 程 规 定 了 各 级 红 薯 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 的 质 量 标 准 、 检 验 方 法 、 判 定 规 则 。本 规 程 适 用 于 红 薯 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 繁 育 、 生 产 、 销 售 过 程 中 的 质 量 鉴 定 。2 规 范 性 引 用 文 件下 列 文 件 对 于 本 文 件 的 应 用 是 必 不 可 少 的 。 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 仅 所 注

5、日 期 的 版 本 适 用 于 本 文 件 。 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 （ 包 括 所 有 的 修 改 单 ） 适 用 于 本 文 件 。NY/T 1200 甘 薯 脱 毒 种 薯3 术 语 和 定 义下 列 术 语 和 定 义 适 用 于 本 规 程 。3.1 脱 毒 试 管 苗应 用 茎 尖 分 生 组 织 培 养 技 术 获 得 ， 经 检 测 确 认 不 带 红 薯 羽 毛 状 斑 驳 病 毒 、 红 薯 潜 隐 病 毒 、红 薯 褪 绿 斑 病 毒 的 试 管 苗 。3.2 脱 毒 种 薯 （ 苗 ）从 育 种 家 种 子 繁 殖 试 管

6、苗 开 始 ， 经 逐 代 繁 殖 增 加 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 数 量 的 种 薯 生 产 体 系 生产 出 来 的 种 薯 （ 苗 ） 。 分 为 育 种 家 种 子 、 原 原 种 、 原 种 、 生 产 用 种 四 个 级 别 。3.2.1育 种 家 种 子由 育 种 家 直 接 生 产 和 掌 握 的 原 始 种 子 ， 具 有 该 品 种 的 典 型 性 和 遗 传 稳 定 性 ， 纯 度 100%，不 带 病 毒 和 其 它 病 虫 害 ， 产 量 及 其 它 主 要 性 状 符 合 推 广 时 的 原 有 水 平 。3.2.2 原 原 种 ： 用 育 种 家 种 子 或

7、典 型 品 种 的 脱 毒 试 管 苗 在 防 虫 网 室 、 温 室 条 件 下 生 产 的 符合 质 量 标 准 的 种 薯 苗 。3.2.3 原 种 ： 用 原 原 种 作 种 薯 ， 在 良 好 隔 离 条 件 下 生 产 的 符 合 质 量 标 准 的 种 薯 （ 苗 ） 。3.2.4 生 产 用 种 ： 用 原 种 作 种 薯 ， 在 良 好 隔 离 条 件 下 生 产 的 符 合 质 量 标 准 的 种 薯 （ 苗 ） 。 3.3 病 虫 害 允 许 率指 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 繁 殖 田 中 病 害 株 比 率 和 虫 害 株 比 率 。3.3.1 病 害 株 ： 主 指

8、 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 病 毒 病 株 、 真 菌 病 株 、 细 菌 病 株 的 比 率 。 DB 5206/T 81 2018 2 3.3.2 虫 害 株 ： 主 指 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 虫 害 株 比 率 。3.4 混 杂 株 允 许 率主 指 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 繁 殖 田 中 混 杂 其 它 红 薯 品 种 植 株 比 率 。3.5 薯 块 整 齐 度单 块 质 量 在 100g 500g 的 块 根 质 量 占 块 根 总 质 量 的 比 率 。3.6 有 缺 陷 薯指 机 械 损 伤 、 虫 鼠 伤 、 畸 形 块 根 质 量 占 块 根 总 质 量 的 比

9、 率 。3.7 杂 质指 浮 土 、 块 根 上 所 沾 的 泥 土 、 无 种 用 价 值 的 块 根 ， 以 及 其 他 有 机 、 无 机 质 量 。4 控 制 和 汰 除 的 病 害4.1 控 制 的 病 害指 通 过 控 制 病 害 的 发 生 程 度 以 达 到 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 质 量 要 求 的 病 害 。主 指 红 薯 的 病 毒 病 （ 即 红 薯 羽 状 斑 驳 病 毒 、 红 薯 潜 陷 病 毒 、 红 薯 褪 绿 病 毒 ） 、 黑 斑 病 、疮 痂 病 、 蔓 割 病 、 茎 线 虫 病 。4.2 汰 除 的 病 虫 害指 不 能 在 达 到 质 量 要

10、求 的 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 上 发 生 的 病 虫 害 。 包 括 ： 根 结 线 虫 病 、 细 菌 性 萎 蔫 病 （ 红 薯 瘟 ） 、 根 腐 病 、 红 薯 蚁 象 。5 质 量 要 求5.1 各 级 别 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 繁 殖 田 中 带 病 植 株 允 许 率 应 符 合 附 录 A 表 A.1 要 求 。5.2 各 级 别 脱 毒 种 薯 块 根 质 量 指 标 应 符 合 附 录 A 表 A.2 要 求 。6 检 验 方 法6.1 脱 毒 苗 的 检 验某 一 品 种 经 茎 尖 分 生 组 织 获 得 一 批 组 培 再 生 苗 后 ， 要 逐 株 鉴

11、定 带 病 毒 状 况 ， 经 检 测 确 认 不 带 红 薯 羽 毛 状 斑 驳 病 毒 、 红 薯 潜 隐 病 毒 、 红 薯 褪 绿 斑 病 毒 的 组 培 苗 才 能 确 认 是 脱 毒 苗 。检 测 方 法 ： 有 目 测 法 、 指 示 植 物 确 认 法 、 血 清 法 （ 酶 联 免 疫 检 测 ） 。6.1.1 目 测 法目 测 法 是 根 据 红 薯 叶 片 和 薯 块 上 出 现 的 典 型 症 状 判 断 红 薯 是 否 感 染 病 毒 。 红 薯 病 毒 病的 症 状 主 要 包 括 ： （ 1） 叶 斑 型 ： 主 要 有 紫 色 羽 状 斑 、 紫 斑 、 紫 环

12、 斑 、 黄 色 斑 或 者 枯 斑 。 （ 2）花 叶 型 ： 苗 期 感 病 后 ， 初 期 叶 脉 呈 网 状 透 明 ， 然 后 沿 叶 脉 出 现 不 规 则 黄 绿 相 间 的 花 叶 斑 纹 。 DB 5206/T 81 2018 3 （ 3） 卷 叶 型 ： 叶 片 边 缘 上 卷 ， 严 重 者 可 形 成 杯 状 。 （ 4） 叶 片 皱 缩 型 ： 病 苗 叶 片 较 小 ， 皱 缩 ，叶 缘 不 整 齐 ， 甚 至 扭 曲 畸 形 。 （ 5） 叶 片 黄 化 型 ： 包 括 叶 片 黄 化 及 网 状 黄 脉 。 薯 块 上 的 症 状主 要 是 产 生 黑 褐 色

13、或 黄 褐 色 龟 裂 纹 。病 毒 病 的 症 状 可 因 病 毒 种 类 、 红 薯 品 种 以 及 环 境 条 件 等 因 素 的 影 响 而 改 变 ， 根 据 症 状 只能 作 初 步 判 断 。 另 外 ， 目 测 法 应 注 意 区 分 红 薯 品 种 特 性 以 及 由 于 土 壤 水 份 多 、 营 养 失 调 等 原因 造 成 的 生 理 病 害 与 病 毒 病 症 状 的 差 异 。6.1.2 指 示 植 物 法常 用 巴 西 牵 牛 (Ipomoea setosa)作 指 示 植 物 ， 几 乎 所 有 侵 染 红 薯 的 病 毒 都 能 感 染 巴 西 牵牛 ， 因

14、此 ， 将 薯 苗 嫁 接 在 巴 西 牵 牛 上 ， 从 巴 西 牵 牛 的 显 症 情 况 可 判 断 薯 苗 是 否 带 毒 。 具 体 嫁接 方 法 如 下 ： 以 薯 苗 芽 尖 作 接 穗 ， 将 芽 尖 削 成 楔 形 ， 将 具 3-4片 真 叶 的 巴 西 牵 牛 作 砧 木 ， 在其 茎 中 部 切 一 斜 口 把 楔 形 接 穗 插 入 ， 用 封 口 膜 扎 住 ， 置 防 虫 网 室 内 遮 阴 保 湿 3-4d， 然 后 在 自 然 光 照 下 观 察 记 载 牵 牛 的 显 症 情 况 ， 一 般 嫁 接 后 25 30d左 右 开 始 出 现 症 状 ,显 症

15、初 期 新 生叶 出 现 系 统 性 明 脉 ， 以 后 发 展 为 花 叶 或 皱 缩 等 症 状 。6.1.3 血 清 学 检 测常 用 的 血 清 学 检 测 方 法 为 酶 联 免 疫 吸 附 法 ， 它 具 有 快 速 和 能 检 测 大 量 样 品 的 特 点 ， 在 大量 检 测 样 品 时 较 常 应 用 。 具 体 检 测 方 法 如 下 ：(1)样 品 处 理 ： 取 直 径 约 为 1cm的 样 品 叶 片 （ 约 0.1g） ， 加 入 1ml抽 提 缓 冲 液 ， 迅 速 研 磨 ，置 于 离 心 管 中 ， 取 上 清 液 供 检 测 用 。(2)点 样 ： 将 N

16、C 膜 在 TBS(20mM Tris-HCl, pH7.5, 150mM NaCl, )中 充 分 湿 润 ， 然 后 放在 一 张 干 燥 滤 纸 上 ， 让 其 稍 事 干 燥 ， 用 铅 笔 作 好 记 号 ， 用 微 量 取 样 器 进 行 点 样 ， 点 样 后让 NC 膜 自 然 干 燥 。(3)反 应 : （ a） 封 闭 : 将 点 样 后 的 NC膜 转 入 封 闭 液 (TBST+5%脱 脂 奶 粉 )中 封 闭 1 小 时 或 4 封 闭 过夜 。 (b) 第 一 抗 体 反 应 : 封 闭 后 的 NC 膜 用 TBST(20mM Tris-HCl, pH7.5, 1

17、50mM NaCl, 0.05%Tween-20)漂 洗 2-3 次 , 每 次 5-10min, 加 入 用 TBST稀 释 的 病 毒 专 化 抗 血 清 (1:2000) 37保 温 1h, 再 用 TBST洗 膜 3 次 , 每 次 5-10min。(c) 第 二 抗 体 反 应 : 加 入 TBST稀 释 的 碱 性 磷 酸 酯 酶 标 记 的 羊 抗 兔 IgG(1:5000), 37 保温 1h, 再 用 TBST洗 膜 3次 , 每 次 5-10min。(d) 显 色 : 避 光 条 件 下 , 将 NC 膜 置 于 含 330 g/ml NBT和 165 g/ml BCIP的

18、 碱 性 磷 酸酯 酶 缓 冲 液 (100mM Tris-HCl, pH9.5, 100mM NaCl, 5mM MgCL 2)中 显 色 至 样 点 清 晰 , 将 膜 放入 蒸 馏 水 中 漂 洗 , 终 止 显 色 反 应 。 取 出 晾 干 , 拍 照 。6.2 脱 毒 试 管 苗 种 性 鉴 定 法 ： 将 脱 毒 试 管 苗 种 植 在 防 虫 网 室 内 ， 每 株 系 种 植 3 株 ， 对 照 原品 种 特 征 特 性 ， 剔 除 变 异 株 系 和 混 杂 株 系 ， 收 获 时 检 验 块 根 质 量 ， 与 原 品 种 一 致 的 株 系 进 行扩 大 繁 殖 。6.

19、3 扩 繁 苗 的 检 验随 机 抽 取 1% 2%脱 毒 试 管 苗 经 目 测 法 淘 汰 弱 苗 和 显 症 苗 后 ， 再 进 行 指 示 植 物 确 认 ， 经指 示 植 物 检 测 为 不 显 症 或 为 阴 性 后 ， 方 可 用 于 扩 繁 ， 若 指 示 植 物 检 测 中 有 一 株 为 阳 性 ， 都 不能 进 行 扩 繁 ， 还 要 再 进 行 血 清 法 （ 酶 联 免 疫 检 测 ） 不 显 症 后 ， 方 可 用 于 扩 繁 。 DB 5206/T 81 2018 4 6.4 不 同 级 别 脱 毒 苗 的 检 测 方 法6.4.1 茎 尖 苗 的 检 测茎 尖

20、苗 的 检 测 ： 首 先 采 取 目 测 法 淘 汰 弱 苗 和 显 症 苗 （ 因 为 脱 毒 茎 尖 苗 和 带 毒 茎 尖 苗 在形 态 、 长 势 上 有 明 显 差 异 ， 前 者 生 长 快 、 叶 片 平 展 、 植 株 较 健 壮 ； 后 者 长 势 弱 ， 叶 片 上 常 出现 花 叶 、 明 脉 和 褪 绿 斑 等 症 状 ） 。 然 后 再 用 血 清 学 （ 酶 联 免 疫 检 测 ） 方 法 进 行 筛 选 ， 呈 阴 性的 样 品 再 进 行 嫁 接 。 每 个 茎 尖 苗 一 般 嫁 接 3-5株 ， 有 1株 发 病 即 认 为 该 样 品 带 病 毒 ， 待

21、 筛 选出 都 不 发 病 的 样 品 才 可 重 复 嫁 接 。6.4.2 原 原 种 田 的 检 测原 原 种 田 的 检 测 ： 首 先 在 防 虫 网 室 内 种 植 原 原 种 和 若 干 株 巴 西 牵 牛 ， 定 期 观 察 巴 西 牵 牛是 否 显 症 、 以 判 断 是 否 有 蚜 虫 传 毒 ； 对 原 原 种 田 还 要 进 行 定 期 普 查 ， 及 时 淘 汰 显 症 株 和 变 异株 ； 另 外 对 原 原 种 田 要 定 期 取 样 ， 用 嫁 接 指 示 植 物 法 或 酶 联 免 疫 检 测 法 进 行 检 测 ， 以 判 断 原 原 种 田 病 毒 的 感

22、染 情 况 ， 对 于 病 毒 感 染 率 超 标 的 繁 种 田 要 降 级 使 用 。6.4.3 原 种 田 的 检 测脱 毒 原 种 的 繁 殖 要 在 有 一 定 隔 离 区 的 地 方 进 行 ， 即 周 围 500m内 不 能 种 植 非 脱 毒 薯 。 原种 田 的 病 毒 检 测 以 目 测 法 和 田 间 种 植 巴 西 牵 牛 为 主 ， 必 要 时 田 间 取 样 用 酶 联 免 疫 检 测 病 毒 的感 染 率 。6.4.4 生 产 种 田 的 检 测生 产 种 田 的 病 毒 检 测 以 目 测 法 为 主 ， 定 期 对 生 产 种 田 的 发 病 率 进 行 调

23、查 ， 必 要 时 也 可抽 样 用 酶 联 免 疫 检 测 ， 当 发 病 率 超 过 一 定 标 准 时 就 不 能 再 作 为 种 薯 使 用 。6.5 不 同 级 别 脱 毒 苗 的 判 定 标 准根 据 不 同 级 别 脱 毒 苗 对 病 毒 感 染 率 的 不 同 要 求 ， 初 步 制 定 以 下 判 断 标 准 ， 病 毒 感 染 率 超过 一 定 标 准 的 应 降 级 使 用 （ 见 附 录 A 表 A.3） 。 6.6 田 间 检 验 要 求6.6.1 详 细 了 解 受 检 单 位 脱 毒 红 薯 种 薯 扩 繁 基 地 的 基 本 情 况 ， 包 括 基 地 繁 殖

24、面 积 、 隔 离 情 况 、海 拔 高 度 、 种 薯 来 源 （ 有 无 质 量 报 告 单 ） 、 田 间 生 长 情 况 、 品 种 纯 度 ， 是 否 建 立 生 产 档 案 以及 影 响 种 薯 质 量 的 主 要 病 害 类 型 和 发 病 率 。6.6.2 检 验 时 间 ：原 原 种 和 原 种 整 个 生 育 期 间 进 行 三 次 检 验 ， 分 别 于 分 枝 期 、 封 垄 前 、 收 获 前 2 周 。 生 产用 种 检 验 二 次 ， 分 别 于 封 垄 前 、 收 获 前 2 周 。 检 验 鉴 定 标 准 见 表 1。由 繁 种 单 位 检 验 ， 并 做 好

25、 记 录 报 检 验 部 门 备 案 ， 确 需 复 查 时 ， 由 检 验 部 门 派 合 格 检 验 员复 核 检 验 。6.6.3 抽 样 方 法 和 数 量检 测 人 员 对 田 间 生 长 的 植 株 作 整 体 观 察 后 ， 依 据 随 机 抽 样 法 确 定 抽 样 点 ， 其 抽 样 方 法 和 数 量 按 附 录 A 表 A.4和 表 A.5方 法 随 机 抽 样 检 验 并 记 录 于 附 录 A 表 A.6中 。6.6.4 检 验 内 容红 薯 植 株 的 主 要 病 害 与 纯 度 。6.6.4.1 植 株 的 主 要 病 害 ： 检 查 典 型 的 病 毒 病 、

26、细 菌 与 真 菌 发 病 症 状 。 其 主 要 发 病 症 状 目测 鉴 别 （ 见 附 录 A 表 A.9） 。6.6.4.2 纯 度 ： 检 查 品 种 的 植 物 学 形 态 特 征 ： 茎 的 颜 色 、 叶 的 形 态 ， 薯 皮 、 薯 肉 颜 色 ， 薯 DB 5206/T 81 2018 5 块 形 状 等 品 质 ， 找 出 杂 株 。6.6.4.3 计 算 结 果分 检 验 项 目 按 以 下 公 式 计 算病 株 或 混 杂 株 率 = %100100 样 点 数 株 株 数取 定 样 点 内 病 株 或 混 杂6.7 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 块 根 质 量 检

27、验经 过 植 株 检 验 的 种 薯 （ 苗 ） 必 须 进 行 块 根 质 量 检 验 ， 检 测 方 法 应 符 合 块 根 抽 样 数 量 标 准表 7 要 求 。块 根 质 量 检 验 抽 样 方 法 ： 根 据 块 根 抽 样 数 量 标 准 要 求 ， 重 点 检 测 块 根 杂 质 、 薯 块 整 齐 度 、有 无 缺 陷 薯 、 有 无 细 菌 性 萎 蔫 病 （ 红 薯 瘟 ） 、 有 无 黑 斑 病 、 有 无 蔓 割 病 、 有 无 根 腐 病 、 有 无软 腐 病 、 有 无 镰 刀 菌 干 腐 病 和 腐 烂 、 有 无 茎 线 虫 病 、 有 无 根 结 线 虫 病

28、 、 有 无 红 薯 蚁 象 以 及 能 表 现 该 品 种 特 征 特 性 的 种 薯 纯 度 ， 并 将 各 种 测 定 结 果 换 算 成 百 分 率 。7 判 定 规 则7.1 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 分 级以 繁 殖 田 播 种 的 种 薯 级 别 、 带 病 植 株 比 率 、 混 杂 植 株 比 率 为 定 级 标 准 。7.2 病 毒 病 、 蔓 割 病 、 黑 斑 病 、 茎 线 虫 病 、 疮 痂 病 以 及 混 杂 植 株 比 率 六 项 质 量 指 标 ， 任 何一 项 不 符 合 原 来 级 别 质 量 标 准 但 又 高 于 下 一 级 别 质 量 指 标 者

29、， 判 定 结 果 均 按 降 低 一 级 定 级别 ， 只 要 检 出 根 腐 病 、 根 结 线 虫 病 、 红 薯 瘟 、 红 薯 蚁 象 ， 皆 不 能 作 种 用 。 注 ： 各 种 病 害 症 状具 体 见 附 录 A 表 A.9。7.3 经 田 间 植 株 检 验 和 块 根 质 量 检 验 合 格 后 ， 签 发 红 薯 脱 毒 种 薯 质 量 合 格 证 书 见 附 录 A 表 A.8。 DB 5206/T 81 2018 6 附 录 A（ 资 料 性 附 录 ）标 准 中 的 记 录 表表 A.1 各 级 别 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 繁 殖 田 中 带 病 植 株 允

30、许 率表 A.1 各 级 别 脱 毒 种 薯 （ 苗 ） 繁 殖 田 中 带 病 植 株 允 许 率检 验时 期 种 薯 级 别 病 害 及 混 杂 株 率 （ %）病 毒 病 红 薯 瘟 根 腐 病 根 结 线 虫 病 红 薯蚁 象 黑 斑 病 疮 痂 病 蔓 割 病 茎 线虫 病 混 杂株 率分 枝期 检验 育 种家 种 子 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0原 原 种 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0原 种 5.0 0 0 0 0 5.0 0 1.0 0 1.0生 产 用 种 10.0 0 0 0 0 8.0 5.0 2.0 1.0 4.0 封 垄前 检验 育 种家 种 子 0

31、 0 0 0 0 0 0 0 0 0原 原 种 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0原 种 3.0 0 0 0 0 3.0 0 1.0 0 0.5生 产 用 种 10.0 0 0 0 0 5.0 3.0 2.0 1.0 2.0收 获前 2周 检 验 育 种 家种 子 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0原 原 种 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0原 种 2.0 0 0 0 0 1.0 0 1.0 0 0.5生 产 用 种 10.0 0 0 0 0 2.0 1.0 2.0 1.0 2.0注 ： 种 苗 质 量 应 符 合 分 枝 期 检 验 质 量 指 标 。 DB 5206/T 81

32、 2018 7 表 A.2 各 级 别 脱 毒 种 薯 块 根 质 量 指 标表 A.2 各 级 别 脱 毒 种 薯 块 根 质 量 指 标项 目 允 许 率 （ %）育 种 家 种 子 原 原 种 原 种 生 产 用 种纯 度 100.0 100.0 99.5 98.0薯 块 整 齐 度 90.0 90.0 85.0 85.0有 缺 陷 薯 1.0 1.0 3.0 5.0杂 质 1.0 2.0 2.0 2.0软 腐 病 0 0 0 1.0 黑 斑 病 0 0 1.0 2.0茎 线 虫 病 0 0 0 1.0根 结 线 虫 病 0 0 0 0红 薯 蚁 象 0 0 0 0根 腐 病 0 0 0

33、 0红 薯 瘟 0 0 0 0表 A.3 红 薯 脱 毒 苗 病 毒 检 测 方 法 及 判 定 标 准 （ 试 行 ）表 A.3 红 薯 脱 毒 苗 病 毒 检 测 方 法 及 判 定 标 准 （ 试 行 ） 种 苗级 别 检 测 方 法 取 样 方 法 检 样数 量 重 复次 数 判 断 依 据 检 测 标 准 备 注试管苗 a.血 清 法 （ 酶 联免 疫 检 测 ）b.指 示 植 物 法 试 管 苗 3株 /株 系 2 a.血 清 学 检 测阴 性b.嫁 接 所 有 重复 均 不 显 症 显 症 率 为 0原 原种 苗 a.目 测 法b.血 清 法c.指 示 植 物 法 5点 样 方

34、取样 目 测 普 查50株 /亩100株 /亩 2 嫁 接 不 显 症 或血 清 反 应 阴 性 目 测 显 症 率 为0； 血 清 及 指 示植 物 阳 性 率 小于 0.1%. 目 测 显 症 率 大于 0.1%者 可 降级 为 原 种 使用 。 原种苗 a.目 测 法b.血 清 法c.指 示 植 物 法 5点 样 方 取样 多 点 普 查100株 /亩50株 /亩 2 同 上 目 测 显 症 率 小于 0.1%； 血 清 及指 示 植 物 阳 性率 小 于 1%. 显 症 率 大 于1.0%者 可 降 级为 生 产 种 使用 。生 产种 苗 a.目 测 法b.血 清 法 随 机 多 点

35、取样 100株 /点 3-5 依 症 状 判 断 目 测 显 症 率 小于 1.0%. DB 5206/T 81 2018 8 表 A.4 育 种 家 种 子 、 原 原 种 和 原 种 不 同 面 积 田 块 的 检 验 点 数 和 植 株 数表 A.4 育 种 家 种 子 、 原 原 种 和 原 种 不 同 面 积 田 块 的 检 验 点 数 和 植 株 数面 积 ， hm2 检 验 点 数 和 每 点 检 验 植 株 数 0.1 随 机 抽 样 检 验 3 个 点 ， 每 个 点 100 株0.11 1 随 机 抽 样 检 验 5 个 点 ， 每 个 点 100 株 1 随 机 抽 样

36、检 验 5个 点 ， 每 个 点 100株 ， 超 过 1 hm 2划 出 另 一 检 验 区 ， 按 本 检 验 标 准 规 定 的 不 同 面 积 的 检 验 点 取 样 。表 A.5 生 产 用 种 不 同 面 积 田 块 的 检 验 点 数 和 植 株 数表 5 生 产 用 种 不 同 面 积 田 块 的 检 验 点 数 和 植 株 数面 积 ， hm 2 检 验 点 数 和 每 点 检 验 植 株 数 0.1 随 机 抽 样 检 验 2个 点 ， 每 个 点 100株0.11 1 随 机 抽 样 检 验 5个 点 ， 每 个 点 100株1.1 5 随 机 抽 样 检 验 10个 点

37、 ， 每 个 点 100 株 。 5 随 机 抽 样 检 验 10个 点 ， 每 个 点 100株 ， 超 过 5 hm2 划 出 另 一 检 验 区 ， 按 本 检 验 标 准 规 定 的 不 同 面 积的 检 验 点 取 样 。表 A.6 检 验 记 录 表 A.6 检 验 记 录 扩 繁 单 位 ： 地 点 ：种 薯 来 源 ： 种 薯 级 别 ：前 作 ： 品 种 ： 海 拔 ：隔 离 情 况 ： 抽 检 面 积 ： 亩扩 繁 面 积 ： 亩 检 验 日 期 ： 年 月 日观 察 记载 项 目 物候期 每点株数 混杂株数 各 类 病 株 数 检 验员（ 签字 ） 备 注细 菌 性萎 蔫

38、 病 黑斑病 疮痂病 蔓割病 根腐病 根 结 线虫 病 茎线虫病 软腐病 镰 刀 菌干 腐 病 红薯蚁象 12345合 计% DB 5206/T 81 2018 9 表 A.7 脱 毒 种 薯 块 根 抽 样 数 量 标 准 表表 A.7 脱 毒 种 薯 块 根 抽 样 数 量 标 准 表种 类 总 量 抽 样 百 分 率 % 抽 样 最 低 数 量种 薯 10000kg 10000kg 6 103 5 100kg注 ： 不 足 抽 样 最 低 数 量 的 全 部 作 为 混 合 样 品 。表 A.8 红 薯 脱 毒 种 薯 质 量 检 验 合 格 证 书表 A.8 红 薯 脱 毒 种 薯 质

39、 量 检 验 合 格 证 书 红 薯 脱 毒 种 薯 质 量 检 验 合 格 证 书年 月 日 编 号 ：种 薯 生 产 单 位 ：种 薯 级 别 ： 品 种 名 称 ： 重 量 ： kg上 述 种 薯 经 按 铜 仁 市 地 方 标 准 （ DB 5222/T 83-2018 红 薯 脱 毒 种 薯 检 验 规 程 ） 检 验 合 格 ， 特 发 此 证 。检 验 人 ： （ 签 字 ）检 验 机 关 ： （ 印 章 ）表 A.9 红 薯 种 薯 （ 苗 ） 田 间 带 病 植 株 症 状表 A.9 红 薯 种 薯 （ 苗 ） 田 间 带 病 植 株 症 状 病 害 名 称 植 株 块 根细

40、 菌 性 萎蔫 病（ 红 薯 瘟 ） 从 育 苗 至 结 薯 均 能 发 病 。 晴 天 中 午 ， 病 苗 顶 部 叶 片萎 蔫 ， 茎 基 黑 褐 色 水 烂 症 状 ， 维 管 束 从 下 而 上 黄 褐色 条 纹 症 状 ， 严 重 时 茎 内 全 部 腐 烂 ， 成 株 发 病 ， 叶色 暗 淡 无 光 泽 ， 蔓 出 现 水 渍 症 状 斑 点 且 呈 黑 褐 色 ，剖 视 维 管 束 ， 褐 色 条 纹 用 手 拉 易 脱 皮 ， 留 下 纤 维 。 轻 病 薯 块 乳 汁 明 显 减 少 ， 有 苦 臭 味 ， 煮 不 烂 ，外 表 症 状 常 不 明 显 ， 仅 薯 蒂 附

41、近 呈 黑 褐 色 或 尾根 呈 不 同 程 度 病 变 ， 剖 开 横 切 面 为 分 散 的 小 斑点 或 黄 褐 色 至 深 褐 色 斑 块 ， 重 症 薯 块 ， 整 块 呈黑 褐 色 腐 烂 或 一 端 腐 烂 ， 有 脓 液 状 或 淡 黄 色 菌液 ， 臭 味 很 重 。黑 斑 病 茎 基 部 形 成 黑 褐 色 梭 形 或 椭 圆 形 病 斑 ， 病 斑 初 期 有灰 色 霉 层 ， 后 变 成 黑 色 粉 状 物 ， 病 斑 逐 渐 扩 大 ， 重者 基 部 全 部 变 黑 至 枯 死 。 薯 块 上 形 成 黑 色 圆 形 病 斑 ， 病 部 轮 廓 清 晰 ， 组织 坚

42、实 ， 薯 肉 呈 青 褐 色 或 黑 褐 色 ， 有 苦 味 和 强烈 的 臭 味 ， 病 部 木 栓 化 ， 坚 硬 、 干 腐 ， 在 适 当 条 件 下 病 斑 中 央 会 长 出 黑 色 子 囊 壳 。疮 痂 病 叶 片 卷 皱 、 嫩 芽 僵 缩 ， 茎 蔓 和 叶 柄 生 出 无 数 凹 凸 不平 的 粗 糙 病 斑 ， 顶 芽 受 害 病 斑 初 为 透 明 深 红 色 ， 扩大 后 逐 渐 变 黑 呈 褐 色 而 枯 死 ， 新 梢 和 幼 叶 不 能 长大 ， 整 个 顶 梢 收 缩 僵 硬 而 直 立 ， 表 现 粗 糙 。 不 表 现 症 状 DB 5206/T 81

43、2018 10 表 A.9 红 薯 种 薯 （ 苗 ） 田 间 带 病 植 株 症 状 （ 续 ）病 害名 称 植 株 块 根茎 线 虫 病 苗 期 ： 发 病 重 的 出 苗 少 、 矮 小 、 发 黄 ， 剖 视 茎 基部 ， 内 有 褐 色 空 隙 ， 剪 断 后 不 流 或 流 出 的 白 浆 狠少 ， 后 期 侵 入 部 位 表 皮 形 成 小 口 ， 剪 断 后 无 白 浆 。茎 蔓 症 状 ： 主 蔓 基 部 先 白 色 干 腐 ， 后 渐 变 褐 色 ，严 重 时 基 部 蔓 短 、 叶 黄 ， 甚 至 主 蔓 枯 死 。根 部 症 状 ： 根 部 表 皮 坏 裂 。 糠 心

44、型 ： 薯 苗 、 种 薯 带 病 ， 先 块 根 纵 剖 面 内 部 呈稀 絮 状 白 色 糠 道 ， 后 期 由 于 伴 随 其 他 杂 菌 形 成 褐色 相 间 的 褐 色 糠 道 ， 有 时 内 部 虽 坏 死 ， 但 表 皮 接近 健 康 。裂 皮 型 ： 轻 病 者 肉 眼 不 易 看 出 ， 开 始 外 皮 褐 色 ，不 久 变 青 色 ， 有 的 稍 凹 陷 ， 有 的 有 小 裂 口 ， 皮 下组 织 变 褐 色 ， 最 后 皮 色 呈 暗 紫 色 ， 并 多 龟 裂 ， 内部 呈 褐 白 相 间 的 干 腐 。 蔓 割 病 幼 叶 、 叶 脉 间 叶 肉 变 黄 ， 潮 湿

45、 叶 病 部 产 生 白 色 至淡 红 色 的 霉 层 ， 轻 者 表 皮 似 裂 呈 丝 状 ， 重 者 病 发生 全 株 枯 萎 、 死 亡 ， 地 上 部 叶 片 自 下 而 上 变 黄 脱落 ， 最 后 茎 开 裂 。 维 管 束 变 褐 色 ， 横 切 薯 块 可 见 褐 色 圆 环 形 斑 点 ，严 重 时 ， 上 部 茎 蔓 枯 死 ， 而 薯 块 并 不 腐 烂 。根 腐 病 根 系 腐 烂 ， 从 不 定 根 的 尖 端 或 中 部 开 始 变 黑 ， 逐渐 向 上 蔓 延 至 根 茎 部 位 1-2个 叶 节 ， 形 成 黑 褐 色病 斑 ， 病 斑 表 皮 纵 裂 ， 重

46、 病 株 地 下 根 茎 变 黑 ， 地上 部 茎 蔓 缩 短 ， 分 枝 少 ， 形 成 独 干 苗 ， 叶 片 发 黄 、反 卷 、 变 小 ， 组 织 硬 化 ， 一 般 不 结 薯 ， 轻 者 结 薯 畸 形 ， 呈 大 肠 症 状 或 葫 芦症 状 ， 表 皮 松 软 ， 表 面 小 病 斑 ， 用 手 一 拉 就 下 来 。根 结线 虫 病 根 系 形 成 绳 结 症 状 ， 毛 根 纵 生 ， 细 根 上 有 米 粒 大小 的 根 结 ， 有 的 成 串 ， 剥 开 根 结 ， 可 见 一 至 数 个瞧 虫 。 龟 裂 形 ： 块 根 畸 形 ， 褐 色 纵 裂 口 。棒 根 形

47、 ： 粗 1-2cm， 棒 状 块 根 。线 根 形 ： 只 有 线 状 牛 蒡 根 ， 不 膨 大 成 薯 块 。 软 腐 病 地 上 部 植 株 无 症 状 表 现 开 始 时 仅 薯 块 变 软 ， 小 渍 症 状 ， 发 黏 ， 以 后 薯 块表 现 长 出 茂 盛 的 菌 丝 和 孢 子 囊 ， 用 手 指 一 触 ， 即流 出 草 黄 色 法 液 ， 具 芳 香 酒 味 ， 如 被 次 生 寄 生 生物 入 侵 则 变 成 霉 酸 或 臭 味 ， 以 后 干 缩 成 硬 块 ， 病菌 侵 入 时 由 一 点 或 多 点 横 向 发 展 。镰 刀 菌干 腐 病 地 上 部 植 株 无 症 状 表 现 薯 块 上 先 产 生 黑 褐 色 凹 陷 小 斑 点 ， 后 扩 展 成 圆 形凹 陷 斑 ， 表 面 有 粉 红 色 或 白 色 霉 状 物 ， 最 后 薯 块干 腐 成 褐 色 僵 块 。红 薯 蚁 象 外 露 的 块 根 和 茎 叶 被 啃 食 ， 常 使 植 株 变 黄 ， 重 者死 亡 ， 造 成 田 间 缺 苗 。 块 根 变 褐 、 黑 褐 色 ， 木 质 化 ， 钻 成 伤 口 和 孔 道 ，伴 有 臭 味 。