DB36 T 1000-2017 芦笋亲本繁殖与杂交制种技术规程.pdf

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1、 ICS 65.020.20 B 31 DB36 江西省 地方标准 DB36/T 1000 2017 芦笋亲本繁殖与杂交制种技术规程 Asparagus hybrid parents reproduction and hybrid seed production technology 2017 - 12 - 29 发布 2018 - 03 - 01 实施 江西省质量技术监督局 发布 DB36/T 1000 2017 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 亲本组培快繁 . 1 5 杂交制种 . 3 6 果实收获 . 3 7 种子脱取

2、与处理 . 3 附录 A（规范性附录） 培养基配方 . 4 DB36/T 1000 2017 II 前 言 本标准按 照 GB/T 1.1-2009标 准化工作导则 第 1部分：标准的结构和编写给 出的规则起草。 本标准由江西省农业厅提出 并 归口。 本标准起草单位：江西省农业科学院蔬菜花卉研究所 、江西省标准化研究院 。 本标准主要起草人： 罗绍春、周劲松、汤泳萍、张岳平、尹玉玲、谢启鑫、陈光宇 。 DB36/T 1000 2017 1 芦笋亲本繁殖与杂交制种技术规程 1 范围 本标准规定了芦笋 亲本繁殖与 杂交 制种 技术 的术语和定义、 亲本组培快繁、杂交制种、果实收获、 种子脱取与处理

3、等芦笋杂交品种亲本繁殖与杂交制种技术过程。 本 标准 适用于芦笋杂交品种亲本繁殖与杂交种子生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅 所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 3543.1 农作物种子检验规程 总则 NY/T 760 芦笋 NY/T 2496 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 芦笋 NY/T 5231 无公害食品 芦笋生产技术规程 TG/130/4 国际植物新品种保护联盟（ UPOV）指南 3 术语和 定义 下列术语 和 定义适用于本 文件 。 3.1 幼

4、株期 芦笋定植后至可开始采笋的生长时期。 3.2 外植体 用于植物组织培 养的 组织或器官 。 3.3 培 养周期 植物组织培 养过程中外植体培养 的 继代间隔 时间。 4 亲本组培快繁 4.1 外植体取材与表面消毒 春季 4月 5月份，分别 选择 父本与母本 生长健壮的植株（亲本选择应符合 NY/T 760 、 NY/T 2496 和 TG/130/4要求）， 采取新抽生 出的长约 25cm的健壮嫩茎为外植体。将它置于自来水下轻轻冲洗 5min DB36/T 1000 2017 2 10min，剪去顶端鳞片包被和底端纤维化程度高的部分。在超净工作台上先用 75%的酒精浸泡 30s，再用 2%

5、的次氯酸钠灭菌 8min 10min，无菌水清洗 3次 5次， 无菌滤纸吸干待用 。 4.2 无菌培养 4.2.1 培养条件 以 下 培养条件均为 温度 27 1，相对湿度 70% 80%，光照时间 12h/d，光照强度 2500Lux。 4.2.2 腋芽诱导培养 在超净工作台上，将 消毒完毕的嫩茎切成每个带有 1个 2个腋芽的茎段，切去外植体变色部分，生 长极性朝上，接种至腋芽诱导培养基，置于无菌培养室中培养 1个周期（ 20d 30d，下同 ），每个茎段 叶腋处长出 2个 3个嫩茎。 4.2.3 根丛诱导培养 将每个茎段腋芽处诱导长出的超过 5cm的嫩茎剪下，切去茎尖，平铺接种于根丛诱导培

6、养基上，置 于无菌培养室中培养 1个周期。每个叶腋处长出 1个 3个嫩茎，切除嫩茎茎尖，重新平铺接种 于根丛增 殖培养基上，继代培养 1个 2个 周期，直至每个叶腋处长出 3个 8个成簇的根丛。 4.2.4 根丛增殖培养 以根丛为单位，将母体茎段切成株高 2cm 3cm的根丛，然后接种到根丛增殖培养基上，置于无菌培 养室中培养 1个周期。取出根丛，分割成 2个 4个小根丛，接种于更新的根丛增殖培养基上，继代培养 1 个 2个周期。 4.2.5 生根预分化培养 将增殖获得的根丛，修剪至株高 2cm 3cm，接种至生根预分化培养基中，置于无菌培养室中继代培 养 1个 2个周期，部分根丛基部分化诱导

7、长出 1条 2条肉质根。 4.2.6 生根培养 将生根预分化培养的根丛取出，分 割成每个带 3个 5个茎的小根丛，株高 2cm 3cm，接种入生根培 养基中，置于无菌培养室中继代培养 1个 2个 周期， 80%以上根丛基部长出 3条 5条粗壮的肉质根，达 到移栽标准。 4.3 组培苗移栽与管理 4.3.1 移栽基质 用富含腐殖质的菜园土 6份，泥炭、蛭石、珍珠岩、沙各 1份配制移栽基质，或用 蔬菜育苗专用基质。 4.3.2 移栽时间和方法 选择温湿度适宜的春秋季，移栽前开瓶炼苗 7d 14d，以提高组培苗的移栽成活率。移栽前小心 洗 净根系上附着的培养基，然后栽入装有基质的营养钵中，并浇透水。

8、 4.3.3 日常管理 DB36/T 1000 2017 3 每天用微喷壶向叶面喷水保湿。 芦笋试管苗生 长温度在 15 28为宜，高温时遮阳网遮荫，低温 时覆盖小拱棚提温保护。 成活后适时喷施 MS营养液，促进壮苗。日常管理应符合 NY/T 5231技术规范要 求。 5 杂交制种 5.1 选地 选择地势平坦，土壤肥沃、质地沙壤、排灌便利、通风透光的地块，切忌重茬种植 。 5.2 隔离 与相邻芦笋田距离不得小于 1000m，并用 40目防虫网隔离。 5.3 亲本定植 杂交种生产采取塑料钢架连栋大棚设施栽培，父母本按 2:8比例梅花桩式定植，株距 50cm，行距 1.8m，单行种植。 5.4 去

9、杂去劣 在定植前、幼株期、成株期和开花期鉴定父母本，将杂、病和劣株全部拨 除，及时补足亲本。 5.5 幼株期管理 定植后幼株期不采笋，养苗促生，母本所结少量的果实及时摘除。 5.6 制种 5.6.1 错时留母茎 成株期错时留母茎制种。 4月上旬，母本每株先留取 3枝 4枝健壮母茎；父本则分两期留母茎，第 一期与母本同步留母茎， 5d 7d后每株再留 3枝 4枝健壮母茎，适时摘顶调节花期，以保证父母本花 期相遇。 5.6.2 授粉 4月下旬至 5月中上旬进入花期，揭开两侧和棚头薄膜，保留隔离纱网，每 4连栋大棚放入 1箱中华 蜂进行虫媒授粉。 6 果实收获 8月下旬至 9月上旬，待果实熟至深红色

10、，适时采摘 ， 分级收获。 7 种子脱取与处理 摘下果实及时 取种子，晒干、过筛分级，包装。种子分级、包装应符合 GB/T 3543.1技术规范。 DB36/T 1000 2017 4 附 录 A （规范性附录） 培养基配方 A.1 腋芽诱导培养基 MS + 0.2gL-1L-谷氨酰胺 + 0.1mgL-1KT + 0.1mgL-1NAA + 3%蔗糖 + 0.8%琼脂， pH5.8。 A.2 根丛诱导培养基 MS + 0.2gL-1L-谷氨酰胺 + 0.1mgL-1KT + 3%蔗糖 + 0.8%琼脂， pH 5.8。 A.3 根丛增殖培养基 MS + 0.2gL-1L-谷氨酰胺 + 0.1mgL-1KT + 0.1mgL-1嘧啶醇 + 3%蔗糖 + 0.8%琼脂， pH 5.8。 A.4 生根预分化培养基 MS + 0.2gL-1L-谷氨酰胺 + 0.1mgL-1NAA + 0.1mgL-1嘧啶醇 + 3%蔗糖 + 0.8%琼脂， pH 5.8。 A.5 生根培养基 MS + 0.2gL-1L-谷氨酰胺 + 0.1mgL-1NAA + 0.1mgL-1嘧啶醇 + 6%蔗糖 + 0.8%琼脂， pH 5.8。 _