ISO 15152-2003 Tobacco - Determination of the content of total alkaloids as nicotine - Continuous-flow analysis method《烟草 作为烟碱的总生物碱含量的测定 连续流分析法》.pdf

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1、NORME INTERNATIONALE ISO 15152 Premire dition 2003-04-15 Numro de rfrence ISO 15152:2003(F) ISO 2003 Tabac Dtermination de la teneur en alcalodes totaux exprims en nicotine Mthode par analyse en flux continu Tobacco Determination of the content of total alkaloids as nicotine Continuous-flow analysis

2、 methodISO 15152:2003(F) ii ISO 2003 Tous droits rservs PDF Exonration de responsabilit Le prsent fichier PDF peut contenir des polices de caractres intgres. Conformment aux conditions de licence dAdobe, ce fichier peut tre imprim ou visualis, mais ne doit pas tre modifi moins que lordinateur employ

3、 cet effet ne bnficie dune licence autorisant lutilisation de ces polices et que celles-ci y soient installes. Lors du tlchargement de ce fichier, les parties concernes acceptent de fait la responsabilit de ne pas enfreindre les conditions de licence dAdobe. Le Secrtariat central de lISO dcline tout

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5、es les mesures ont t prises pour garantir lexploitation de ce fichier par les comits membres de lISO. Dans le cas peu probable o surviendrait un problme dutilisation, veuillez en informer le Secrtariat central ladresse donne ci-dessous. ISO 2003 Droits de reproduction rservs. Sauf prescription diffr

6、ente, aucune partie de cette publication ne peut tre reproduite ni utilise sous quelque forme que ce soit et par aucun procd, lectronique ou mcanique, y compris la photocopie et les microfilms, sans laccord crit de lISO ladresse ci-aprs ou du comit membre de lISO dans le pays du demandeur. ISO copyr

7、ight office Case postale 56 CH-1211 Geneva 20 Tel. + 41 22 749 01 11 Fax + 41 22 749 09 47 E-mail copyrightiso.org Web www.iso.org Publi en SuisseISO 15152:2003(F) ISO 2003 Tous droits rservs iii Sommaire Page 1 Domaine dapplication . 1 2R frences normatives . 1 3 Principe . 1 4 Mesures de scurit 1

8、5R actifs . 4 6 Appareillage . 5 7 Mode opratoire . 6 8 Calculs 6 9R ptabilit et reproductibilit . 7 10 Rapport dessai 7 Annexe A (informative) Informations concernant des mthodes analytiques alternatives . 8 Annexe B (informative) Exemple danalyseur flux continu 9 Annexe C (informative) Prparation

9、dune bobine de mlange cinq spires faible diamtre intrieur . 10 Bibliographie 11ISO 15152:2003(F) iv ISO 2003 Tous droits rservs Avant-propos LISO (Organisation internationale de normalisation) est une fdration mondiale dorganismes nationaux de normalisation (comits membres de lISO). Llaboration des

10、Normes internationales est en gnral confie aux comits techniques de lISO. Chaque comit membre intress par une tude a le droit de faire partie du comit technique cr cet effet. Les organisations internationales, gouvernementales et non gouvernementales, en liaison avec lISO participent galement aux tr

11、avaux. LISO collabore troitement avec la Commission lectrotechnique internationale (CEI) en ce qui concerne la normalisation lectrotechnique. Les Normes internationales sont rdiges conformment aux rgles donnes dans les Directives ISO/CEI, Partie 2. La tche principale des comits techniques est dlabor

12、er les Normes internationales. Les projets de Normes internationales adopts par les comits techniques sont soumis aux comits membres pour vote. Leur publication comme Normes internationales requiert lapprobation de 75 % au moins des comits membres votants. Lattention est appele sur le fait que certa

13、ins des lments du prsent document peuvent faire lobjet de droits de proprit intellectuelle ou de droits analogues. LISO ne saurait tre tenue pour responsable de ne pas avoir identifi de tels droits de proprit et averti de leur existence. LISO 15152 a t labore par le comit technique ISO/TC 126, Tabac

14、 et produits du tabac, sous-comit SC 2, Tabacs en feuilles.ISO 15152:2003(F) ISO 2003 Tous droits rservs v Introduction Un groupe de travail du CORESTA 1)a tudi les diffrents modes opratoires utiliss pour la dtermination des alcalodes totaux dans le tabac afin den retenir un qui deviendra la mthode

15、recommande par le CORESTA. Deux modes opratoires ont t adopts: lISO 2881 et la prsente Norme internationale. Des tudes menes par le groupe de travail du CORESTA entre 1989 et 1993 ont montr que ces deux mthodes peuvent ne pas donner les mmes rsultats pour certains tabacs bruns ou pour ceux contenant

16、 des niveaux significatifs dalcalodes autres que la nicotine. Ces tudes ont indiqu que ces diffrences pouvaient tre dues au fait que les taux de rcupration et de sensibilit de dtection de ces mthodes vis-vis des alcalodes autres que la nicotine sont diffrents. 1) CORESTA: Centre de coopration pour l

17、es recherches scientifiques relatives au tabac vi NORME INTERNATIONALE ISO 15152:2003(F) ISO 2003 Tous droits rservs 1 Tabac Dtermination de la teneur en alcalodes totaux exprims en nicotine Mthode par analyse en flux continu 1 Domaine dapplication La prsente Norme internationale spcifie une mthode

18、pour la dtermination de la teneur en alcalodes totaux exprims en nicotine dans le tabac, par analyse en flux continu. La prsente mthode est applicable aux tabacs bruts et aux tabacs manufacturs. 2R frences normatives Les documents de rfrence suivants sont indispensables pour lapplication du prsent d

19、ocument. Pour les rfrences dates, seule ldition cite sapplique. Pour les rfrences non dates, la dernire dition du document de rfrence sapplique (y compris les ventuels amendements). ISO 13276, Tabac et produits du tabac Dtermination de la puret de la nicotine Mthode gravimtrique lacide tungstosilici

20、que 3P r i n c i p e Un extrait aqueux (voir ci-dessous) de tabac est prpar et la teneur en alcalodes totaux (exprims en nicotine) contenue dans lextrait est dtermine par raction avec de lacide sulfanilique et du chlorure de cyanogne. Le chlorure de cyanogne est produit in situ par la raction du cya

21、nure de potassium avec la chloramine T (voir lAnnexe A). La couleur produite est mesure . Des essais interlaboratoires ont montr que cette mthode donne des rsultats quivalents pour lextraction leau et lacide actique . Il est recommand dutiliser des extraits lacide actique dans le cas danalyses simul

22、tanes des alcalodes totaux (exprims en nicotine), des substances rductrices (voir lISO 15153) ou des hydrates de carbone rducteurs (voir lISO 15154). 4 Mesures de scurit AVERTISSEMENT Le cyanure de potassium est un ractif toxique et irritant, cest pourquoi toutes les prcautions de scurit doivent tre

23、 observes lors de sa manipulation. Les solutions doivent tre prpares par une personne dsigne responsable de cette opration. Il est ncessaire de toujours porter des gants et des lunettes de protection lors de la prparation des solutions. Les flacons de ractifs doivent toujours tre transports dans des

24、 dispositifs de scurit appropris. Afin dviter toute manation de vapeur dans le laboratoire, des tubes plongeurs doivent passer travers un pige soude caustique et dboucher dans le flacon de ractif (voir la Figure 1). Les solutions A et B de neutralisation du cyanure (5.5 et 5.6) doivent tre pompes co

25、mme illustr sur le schma oprationnel (voir la Figure B.1) et mlanges dans une fiole de type Bchner de 2 litres laide dun agitateur magntique (voir la Figure2). Toutes les solutions de rsidus qui contiennent du chlorure de cyanogne doivent tre diriges dans cette fiole dans laquelle la transformation

26、en complexe bleu de Prusse a lieu. Le trop-plein du contenu de la fiole de type Bchner doit pouvoir se dverser dans une fiole de stockage dont le contenu doit tre stock toute une nuit dans une hotte et mis au rebut. 460 nm 5% 5%ISO 15152:2003(F) 2 ISO 2003 Tous droits rservs Des trousses de soins co

27、ntre lempoisonnement au cyanure sont disponibles auprs des fournisseurs de matriel de laboratoire. Elles doivent se trouver proximit de lanalyseur et tre utilises par une personne comptente. Lgende 1 soude caustique 2 ouate 3 tube plongeur pour prlever le ractif 4 fiole de stockage 5r actif Figure 1

28、 Pige soude caustiqueISO 15152:2003(F) ISO 2003 Tous droits rservs 3 Lgende 1p i ges soude caustique 2 tube en PVC de de diamtre 3 fiole de type Bchner 4 flacon Winchester 5 agitateur magntique NOTE Lquipement comprend une fiole de type Bchner de 2 litres pose sur un agitateur magntique, dans laquel

29、le a t introduit un tube en PVC de de diamtre travers un bouchon en caoutchouc afin que le tube se trouve juste au-dessus du barreau magntique contenu dans la fiole. Quatre trous sont percs dans le tube sur lesquels sont colls des raccords. Sur ces raccords sont relis la conduite de reflux et la con

30、duite de dgazage qui contient le chlorure de cyanogne ainsi que les deux neutralisants. Dans ce montage, le chlorure de cyanogne doit remplir tout le tube et le fond de la fiole avant de se dverser dans le flacon de stockage des rsidus, ce qui assure une neutralisation complte. Figure 2 quipement de

31、 destruction du chlorure de cyanogne 2cm 2cmISO 15152:2003(F) 4 ISO 2003 Tous droits rservs 5R actifs Tous les ractifs doivent tre utiliss selon les bonnes pratiques de laboratoire et les rglementations nationales en vigueur. Utiliser de leau distille ou de puret au moins quivalente. 5.1 ther lauriq

32、ue de polyoxythylne (solution de Brij 35) Ajouter 1 litre deau de solution de Brij 35. Chauffer et agiter jusqu dissolution. 5.2 Solution tampon A Dissoudre de chlorure de sodium (NaCl) et de ttraborate de sodium (Na 2 B 4 O 7 ,10H 2 O) dans de leau. Verser cette solution dans une fiole jauge de 1 l

33、itre, ajouter de solution de Brij 35 (5.1) et complter au volume avec de leau. Filtrer la solution travers un papier-filtre Whatman n 1 2)(ou lquivalent) avant utilisation. 5.3 Solution tampon B Dissoudre dorthophosphate de sodium anhydre (Na 2 HPO 4 ), dacide citrique monohydrat COH(COOH)(CH 2 COOH

34、) 2 ,H 2 O et dacide sulfanilique (NH 2 C 6 H 4 SO 3 H) dans de leau. Verser dans une fiole jauge de 1 litre, ajouter de solution de Brij 35 (5.1) et complter au volume avec de leau. Filtrer la solution travers un papier-filtre Whatman n 1 2)(ou lquivalent) avant utilisation. 5.4 Solution de chloram

35、ineT CH 3 C 6 H 4 SO 2 N(Na)Cl,3H 2 O (sel sodique de N-chloro mthyl-4 benznesulfonamide). Dissoudre de chloramine T dans de leau. Verser dans une fiole jauge de et complter au volume avec de leau. Filtrer la solution travers un papier-filtre Whatman n 1 2)(ou lquivalent) avant utilisation. 5.5 Solu

36、tion A de neutralisation du cyanure Dissoudre dacide citrique (voir 5.3) et de sulfate de fer(II) (FeSO 4 ,7H 2 O) dans de leau et complter 1li tre . Cette solution de neutralisation peut galement tre prpare en mlangeant dhydroxyde de sodium en fraction massique avec dhypochlorite de sodium, contena

37、nt une fraction massique de de chlore actif. 5.6 Solution B de neutralisation du cyanure Dissoudre de carbonate de sodium anhydre (Na 2 CO 3 ) dans de leau et complter 1l i t r e . Cette solution de neutralisation peut galement tre prpare en mlangeant dhydroxyde de sodium en fraction massique avec d

38、hypochlorite de sodium, contenant une fraction massique de de chlore actif. 5.7 Solution de cyanure de potassium (KCN) AVERTISSEMENT Le cyanure de potassium est extrmement toxique. Voir les prcautions de scurit donnes dans lArticle 4. Sous une hotte, peser de cyanure de potassium et placer dans un b

39、cher de 1 litre. Ajouter deau et mlanger ( lagitateur magntique) jusqu dissolution complte de tout lment solide. Conserver dans un flacon en verre teint. 2) Whatman n 1 est un exemple de produit appropri disponible sur le march. Cette information est donne lintention des utilisateurs de la prsente N

40、orme internationale et ne signifie nullement que lISO approuve ou recommande lemploi exclusif du produit ainsi dsign. 250 g 2,35 g 7,60 g 1ml 26 g 10,4 g 7g 1ml 8,65 g 500 ml 1 g 10 g 500 ml 20 % 70 ml 5 % 10 g 500 ml 20 % 70 ml 5 % 2 g 500 mlISO 15152:2003(F) ISO 2003 Tous droits rservs 5 5.8 Hydro

41、gnotartrate de nicotine C 10 H 14 N 2 (C 4 H 6 O 6 ) 2 ,2H 2 O Vrifier la puret de lhydrognotartrate de nicotine conformment lISO 13276. 5.9 Solutions talons de nicotine Vrifier la puret de lhydrognotartrate de nicotine conformment lISO 13276. 5.9.1 Solution mre Peser, prs, environ dhydrognotartrate

42、 de nicotine (5.8). Dissoudre dans de leau, verser dans une fiole jauge un trait de et complter au volume avec de leau. La solution mre de nicotine peut galement tre prpare partir de nicotine ou dautres sels de nicotine dont la puret est connue. 5.9.2 Solutions dtalonnage partir de la solution mre (

43、5.9.1), prparer une srie dau moins cinq solutions dtalonnage dont les concentrations en nicotine couvrent la gamme de concentrations prsumes des chantillons analyser (par exemple de ). Si de lacide actique doit tre utilis (5 fois) pour extraire la nicotine de lchantillon pour essai en 7.2, les solut

44、ions dtalonnage doivent tre prpares toutes les deux semaines partir de la solution mre en utilisant de lacide actique la place de leau. 6 Appareillage Matriel courant de laboratoire et, en particulier, ce qui suit. 6.1 Analyseur flux continu, comprenant un chantillonneur, une pompe volumtrique, un d

45、ialyseur, des bobines de raction, un colorimtre (ou lquivalent) avec filtre(s) de , un enregistreur. Voir un exemple lAnnexe B. 6.2 Bobine pour produire du chlorure de cyanogne Il est possible dutiliser une bobine de mlange de faible diamtre intrieur disponible dans le commerce pour produire in situ

46、 du chlorure de cyanogne. Il est galement possible de prparer une bobine de mlange cinq spires (voir lAnnexe C). 7 Mode opratoire 7.1 Prparation des chantillons analyser Broyer les chantillons de tabac analyser (il convient que la totalit de lchantillon passe travers un tamis de douverture de maille

47、) et en dterminer le taux dhumidit. Si le tabac est trop humide pour tre broy, il peut tre sch une temprature nexcdant pas . 0,1 mg 1,3 g 250 ml 0,04 mg/ml 0,80 mg/ml 5% 5% 460 nm 1mm 40 CISO 15152:2003(F) 6 ISO 2003 Tous droits rservs 7.2 Prise dessai Peser, prs, environ de tabac dans une fiole conique sche de . Ajouter deau, boucher la fiole et agiter pendant . 7.3 Prparation de lextrait pour ess