DIN 58988-2010 Haemostaseology - Reference method for the VWF multimeres Text in German and English《止血学 血管性血友病因子用参考方法 德文和英文文本》.pdf
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1、Mrz 2010DEUTSCHE NORM Normenausschuss Medizin (NAMed) im DINPreisgruppe 9DIN Deutsches Institut fr Normung e.V. Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e.V., Berlin, gestattet.ICS 11.100.30!$Zal“1556273www.din.deDDIN 58988Hmostaseolo
2、gie Referenzmethode zur Bestimmung der von Willebrand Faktor Multimere;Text Deutsch und EnglischHaemostaseology Reference method for the VWF multimeres; TextinGermanandEnglishHmostase Mthode de rfrence pour la dtermination des multimres du VWF; Texte en allemandet anglaisAlleinverkauf der Normen dur
3、ch Beuth Verlag GmbH, 10772 Berlin www.beuth.deGesamtumfang 13 SeitenDIN 58988:2010-03 Inhalt SeiteVorwort 31 Anwendungsbereich . 42 Normative Verweisungen 43 Begriffe . 44 Abkrzungen 55 Bezeichnung. 56 Entnahme und Aufbereitung des Blutes. 67 Durchfhrung. 67.1 Gerte, Materialien und Reagenzien . 67
4、.1.1 Gerte und Ausrstung. 77.1.2 Agarose. 77.1.3 Puffersysteme 77.1.4 Referenzmaterial 87.2 Durchfhrung der Bestimmung . 87.2.1 Allgemeine Richtlinien 87.2.2 Vorbereiten der Agarosegele 87.2.3 Probenvorbereitung. 97.2.4 Elektrophorese. 97.2.5 Detektion der VWF-Multimere. 97.3 Leistungsdaten 107.3.1
5、Mindestanforderungen 107.3.2 Kalibrier- und Messbereich. 108 Auswertung 108.1 Allgemeines 108.2 Visuelle Auswertung . 108.3 Densitometrische Auswertung. 118.4 Validierung des Testsystems . 118.5 Referenzintervall 119 Potentielle Interferenzen . 129.1 Probenvorbereitung. 129.2 Beeinflussung der Inter
6、pretation . 12Literaturhinweise 13Contents PageForeword 31 Scope.42 Normative references.43 Terms and definitions 44 Abbreviations .55 Designation.56 Collection and processing of blood67 Procedure67.1 Apparatus, materials and reagents.67.1.1 Apparatus and equipment.77.1.2 Agarose .77.1.3 Buffer syst
7、em .77.1.4 Reference material .87.2 Determination procedure.87.2.1 General guidelines .87.2.2 Preparation of the agarose gels .87.2.3 Sample preparation97.2.4 Electrophoresis 97.2.5 Detection of the VWF multimeres.97.3 Performance data .107.3.1 Minimum requirement107.3.2 Calibration and reportable r
8、ange108 Evaluation .108.1 General 108.2 Visual evaluation 108.3 Densitometric evaluation.118.4 Validation of the test system.118.5 Reference interval 119 Potential interferences.129.1 Sample preparation129.2 Influence on interpretation12Bibliography.132 DIN 58988:2010-03 Vorwort Diese Norm wurde vom
9、 NA 063-03-05 AA Hmo-staseologie“ des Normenausschusses Medizin (NAMed) im DIN Deutsches Institut fr Normung e. V. erarbeitet. Foreword This standard has been prepared by NA 063-03-05 AA “Hmostaseologie” (Haemosta-seology) of Normenausschuss Medizin (NAMed)(Medical Standards Committee) in the DIN De
10、ut-sches Institut fr Normung e. V. (German Institute for Standardization). 3 DIN 58988:2010-03 1 Anwendungsbereich Diese Norm gilt fr die Bestimmung der Anzahl bzw. der Grenverteilung der Multimere des humanen von Willebrand Faktors sowie der Beur-teilung der Substrukturen der VWF-Multimere in Citra
11、tplasma oder in Faktorenkonzentraten. 1 Scope This standard applies to the determination of the number or the size distribution, respectively, of the multimeres of the human von Willebrand factor as well as the assessment of the substructures of the VWF multimeres in citrated plasma or in factor con
12、centrates. 2 Normative Verweisungen Die folgenden zitierten Dokumente sind fr die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisun-gen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genom-menen Dokuments (einschlielich aller
13、 nderun-gen). 2 Normative references The following referenced documents are indispens-able for the application of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies. DIN 58909-1
14、, Hmostaseologie Bestimmung der Faktor VIII-Gerinnungsaktivitt (F VIII C) Teil 1: Referenzmessverfahren fr die Einstufen-methode DIN 58909-1, Haemostaseology Determination of factor VIII coagulant activity (F VIII C) Part 1: Reference measurement procedure for the one-stage method 3 Begriffe Fr die
15、Anwendung dieses Dokuments gelten die folgenden Begriffe. 3 Terms and definitions For the purposes of this document, the following terms and definitions apply. 3.1 von Willebrand Faktor humanes Glykoprotein groer Moleklmasse, das in der primren Hmostase sowohl fr die Inter-aktion zwischen Thrombozyt
16、 und Gefwand als auch von Thrombozyten untereinander verant-wortlich ist, und in der sekundren Hmostase das Trgerprotein des F VIII ist und dessen Genort auf dem kurzen Arm des Chromosoms 12 liegt 3.1 von Willebrand factor human glycoprotein of high molecular mass which, in primary haemostasis, is r
17、esponsible for both the interaction between the thrombocytes and the vascular wall and the interaction of the thrombo-cytes among each other and, in secondary haemo-stasis, is the carrier protein of the F VIII, and whose gene locus is on the short arm of chromo-some 12 4 DIN 58988:2010-03 3.2 VWF-Mu
18、ltimere Oligomere und Polymere des VWF Monomers ANMERKUNG VWF wird als monomeres Polypeptidvon 2 050 Aminosuren exprimiert und durch posttrans-lationale Modifizierungsschritte einschlielich der Bildungvon intramolekularen Disulfidbrcken zu Oligo- und Poly-meren polymerisiert. Diese, auch als Multime
19、re bezeich-neten Polymere haben Moleklmassen von bis zu20 Millionen Dalton oder mehr. In Plasma und in pharma-zeutischen Prparaten liegt VWF in Mischungen vonMultimeren verschiedener Moleklmassen vor, die durchdie Methode der Bestimmung der VWF-Multimere sicht-bar gemacht und semiquantitativ bestimm
20、t werdenknnen 1, 2. Darber hinaus erlaubt die Methode auchdie charakteristische Substruktur, die so genanntenSatellitenbanden, von VWF zu analysieren, die durchlimitierte Proteolyse durch ADAMTS 13 entsteht.ADAMTS 13 ist eine spezifische Protease, welche alsphysiologisches Enzym den Multimerisierung
21、sgrad vonVWF reguliert 3. 3.2 VWF multimeres oligomeres and polymeres of the VWF monomer Note VWF is expressed as a monomere polypeptide of2 050 amino acids and polymerized, by means ofposttranslational modification steps including the for-mation of intramolecular disulphide bridges, to form oligo-m
22、eres and polymeres. These polymeres, which are alsocalled multimeres, exhibit molecular masses of up to20 million daltons or more. In plasma and in pharma-ceutical preparations, VWF is present in the form ofmixtures of multimeres with various molecular masseswhich can be made visible, and determined
23、 semi-quanti-tatively, by the method of determining the VWF multi-meres 1, 2. Furthermore, the method enables to ana-lyze the characteristic substructure, i.e., the so-calledsatellite bands, of the VWF which is the result of limitedproteolysis by means of ADAMTS 13. ADAMTS 13 is aspecific protease w
24、hich, in its function as a physiologicalenzyme, regulates the degree of multimerization of VWF3. 4 Abkrzungen 4 Abbreviations Tabelle 1/Table 1 Abkrzungen, die in der Norm verwendet werden/ Abbreviations used in the standard Abkrzung/Abbreviation Vollstndige Bezeichnung/Full name SDS Sodiumdodecylsu
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