GB T 18448.3-2001 实验动物 兔脑原虫检测方法.pdf

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1、ICS 65.020. 30 B 44 国v 中华人民共和国国家标准GB/ T 18448. 1 r-y 18448. 10- 2001 实验动物寄生虫学检测方法Laboratory animal- Parasitological examination methods 2001- 08-29发布中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2002- 05-01实施发布GB/ T 18448.3- 2001 前本标准由GB/T14926.35一1994实验动物兔脑胞内原虫检验方法修订而成。本标准删除了原标准中不宜操作的3.1.1活体动物的取样的有关内容。将脑胞内原虫改为脑原虫。本标准由中华人民共和国

2、科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:李冠民、诸欣平、潜振业、刘兆铭。本标准于1994年1月首次发布。9 中华人民共和国国家标准GB / T 18448. 3- 2001 实验动物兔脑原虫检测方法代替GB/T14926.35- 1994 Laboratory animal- Method for examination of Encephalitozoon cuniculi 1 范围本标准规定了兔脑原虫的取样、染色检测方法及结果判定，井描述了其形态特征。本标准适用于兔脑原虫的检测。2 原理主要在腹腔巨噬细胞内增殖的脑原虫，通过涂片染色可直接用显微镜观察。3

3、材料和试剂3. 1 载玻片。3. 2 甘油。3. 3 甲醇。3. 4 姬姆萨(Giemsa)染液:姬姆萨染剂粉1 g 纯甘油50 mL 甲醇50 mL 3. 5 姬姆萨稀释液:1520份PBS液与1份姬姆萨染液充分混合。3. 6 显微镜。4 检测步骤4. 1 取样麻醉处死动物，立即打开腹腔，用吸管吸取少许腹腔液涂片，或用干净载玻片在动物腹腔脏器表面轻压一下，制成压印片，编号。4. 2 固定和染色涂片或压印片晾干，用甲醇固定5min.中性缓冲液冲洗，晾干。姬姆萨稀释液染色15min20 min. 中性缓冲液冲去多余染液，蒸馆水冲洗，晾干。也可取兔脑组织固定，常规石蜡切片，HE染色。5 结果判定在

4、光学显微镜高倍镜或油镜下对染好的涂片、压印片或组织切片进行仔细检查，在腹腔巨噬细胞或脑细胞胞质内查找原虫子抱子，检查到抱子或滋养体都判为阳性。兔脑原虫的抱子为卵圆形或杆形，平均大小为1.5m2.5m，内有一核及少量空泡，囊壁厚，两端或中间有少量空泡;一端有极体，由此发出极丝，沿内壁盘绕。极丝常自然伸出。该虫在宿主脑细胞或腹腔巨噬细胞胞质内行抱子生殖，姬姆萨染色将抱子染成蓝色。检查中在巨噬细胞内常见的是假包囊中华人民共和国国家质量监督检验检瘟总局2001-08-29批准2002 - 05-01实施10 GBj T 18448. 3- 2001 (直径约30m)，无囊壁，上百个滋养体聚积在一起。6 结果报告根据判定结果，作出报告。11 CON-2.叮叮;二叮叮同筒。华人民共和国家标准实验动物寄生虫学检测方法GB/ T 18448.1-18448.10-2001 国由t号峰中国标准出版社出版北京复兴门外兰里河北街16号邮政编码:100 045 电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经售a峰开本880X1230 1/ 16 印张2字数45千字2001年12月第一版2001年12月第一次印刷印数1-2000* 定价15.00元网址版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533书号:155066 . 1- 17994