EJ T 1025-1996 肾功能检测用放射免疫分析试剂盒.pdf

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1、J谴E蚓行核国和共民人华中EJ/T 1025-1996 肾功能检测用放射免疫分析试剂盒06052401JOO3 1996-04-18发布1996-08-01实施中国核工业总公司发布目次前言1 范围.2 引用标准”.“.“”.”13 产品代号及试剂盒的组成”4 技术指标”.”25 检验方法”.“.“46 检验规则7 标志、包装、贮存和运输.附录A（标准的附录肾功能放射免疫分析试剂盒栓验方法. 8 附录B（提示的附录放射免疫分析试剂盒检验合格证书“.“.”14前富本标准主要依据世界卫生组织（WHO）生物标准化专家委员会第31届会议讨论有关免疫分析试剂盒标准化问题的要求，参照1994年颁布的GB15

2、477T3,T4放射免疫分析试剂盒标准，并结合我国实际情况，力求各项技术指标与国际先进厂家一致本标准规定的各项规则是涉及各生产单位统一这类产品质量控制的准则本标准从1996年8月1日起实施本标准从实施之日起，如与1994年通过的13a-MG放射免疫分析试剂盒技术条件核行业标准中规定的条文不一致时，应以本标准规定为准本标准的附录A是标准的附录，附录B是提示的附录本标准由中国核工业总公司提出本标准起草单位z中国原子能科学研究院同位素研究所本标准主要起草人E王衍真、韩世泉、刘一兵、陈所淑中华人民共和国核行业标准EJ/T 1025-1996 肾功能检测用放射免疫分析试剂盒1 范围本标准规定了用于测定人

3、肾功能的徽球蛋白以下简称仲MG）、自蛋白（以下简称Alb）、免疫球蛋白G（以下简称lgG）、龟徽球蛋白以下简称1-MG）、TammHorsfall糖蛋白（以下简称THP）五种放射免疫分析试剂盒的技术条件及检验方法等本标准适用于双抗体，聚乙二醇法的肾功能检测用放射免疫分析试剂盒（以下简称肾功能放射免疫分析试剂盒采用其它分离方法的肾功能放射免疫分析试剂盒也可参照使用2 引用标准下列标准包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文在标准出版时，所示版本均为有效所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB 11806-89 放射性物质安全运输规定EJ/T 804-

4、93 放射性同位素产品代号3 产品代号及试剂盒的组成3.1 产品代号根据EJ/T804规定，编写产品代号肾功能放射免疫分析试剂盒的产品代号见表1.表1肾功能放射免疫分析试剂盒的产品代号放射免疫分析试剂盒名称32-MG Alb IgG i-MG THP 3. 2 试剂盒的组成及主要试剂特性3. 2.1 试剂盒组成中国核工业总公司1996-04-18批准放射免疫分析试剂盒产品代号RIA I 125 4012 x RIA I 125 4022 x RIA I 125 4032 x RIA I 125 4042 x RIA I 125 4052 x 1”6-08-01实施1 试剂盒由试剂和说明书组成试

5、剂组成见表2.试剂盒名称岛，MG标记抗原125 I-13zMG 试标准品战MG标准晶剂抗体抗13z-MG抗体名非特异试剂一称缓冲液- 分离剂免疫分离试剂3. 2. 2 主要试剂特性3. 2. 2.1 标记抗原特性见表3.试剂盒名称MG 际记抗放射性比活度7 20 特性MBq mg 1 放化纯%90 3. 2. 2. 2 抗体特性见表4.试剂盒名称在2-MG抗体滴度1,200 抗亲合常数l.O 108 体L mol-1 特交叉反应率与Alb、lgG位0.001 % THP90 90 90 90 表4抗体特性Alb lgG 1-MG THP 1,500 1.500 11500 112000 1.0

6、 108 l.O 108 1.0 109 l. 0 109 与13z-MG、与Alb、THP与13z-MG、与13z-MG40 50 40 30 40 技精密度D% 批内T)运8同MG同MG同MG同tMG全部在允许范围内指回收率（R)95 126 90 110 % 90 115 90 108 95 108 标相关系数的1r1 0.990 O. 990 0.990 O. 990 o. 990 有效剂量值S)三个ED值全部同岛，MG同MG同酌，MG同MGED 在测定范围内测定范围mg L 1 0.2 10.0 1 50 1 32 o. 025 0.8 0.05 2.0 有效期6d 42 42 42

7、 42 42 注，1)最大结合率也o）也称零标准结合率2）用样品测定值的变异系数（%）表示（n注10).3）计算质量控制血清测定值的标准差（SD).在一次测定中低、中、高三个剂量的控制血清的测定值，均应在允许范围（X士2SD)内的剂量响应幽线的相关系数绝对值5）剂量响应曲线的有效剂量ED25、ED50、ED75（即结合率分别为25%、50%、75侈时的对应值应在测定范围内，其变化均应在X土2SD范围内的在28条件下贮存，从生产日期计算有效期3 EJ/T 1025-1996 5试瞌方法按附录A（标准的附录实验程序操作，也可用其它等效方法5.1 灵敏度的测定按附录A（标准的附录实验程序操作求出零标

8、准结合率（Bo）的标准差SD(n注lO)t以零标准结合率的均值减去2SD所得结合率的相应剂量值，即为试剂盒的灵敏度S.2 NSB的测定按附录A（标准的附录实验程序操作，NSB按公式(1）计算NSB = (Cn一Cb)/(C,- Cb) 100% .( 1) 式中：C.一一非特异管计数率，计数min1Cb一一仪器本底计数率，计数minic.总放射性管计数率，计数min.5.3 Bo的测定按附录A标准的附录实验程序操作，B。按公式（2）计算B.（C。一C.)/(C，一Cb）100%(2) 式中：Co零标准管汁数率，计数min.5.4精密度的测定精密度用样品测定值的变异系数表示按附录A实验程序操作，

9、Y按公式（3）计算。CV= (SD/X) 100% (3) 式中：SD一n次测定样晶值的标准差，mgL一II X一n(n注10）次测定样品值的均值，mgL一1.s. 5准确度的测定按附录A（标准的附录实验程序操作，用低、中、高三个剂量的质量控制血清测定值计算SD.5.6 R的测定在已知抗原含量的血样或尿样中加入定量的抗原，然后测定血样或尿样中总抗原含量。按附录A（标准的附录实验程序操作，R按公式（4）计算R = (D, - Dk)/D.) 100% ”(4) 4 EJ/T 1025-1996 式中1D.一一血样或尿样中测得的总抗原值，mgL-1, Dk一一血样或原样中已知的抗原值，mgL-1,

10、 D.一一血样或尿样中加入的抗原值，mgL-1. s. 7剂量响应曲线的绘制及r和ED值的计算按附录A（标准的附录实验程序操作各标准剂量点的放射性结合事B（习惯用B/Bo表示按公式（5）计算B【（C，一C.)/(C。一C.）100%.”（5)式中：C.一一各标准剂量点结合物的放射性计数率，计数min.以各标准剂量点的B为纵坐标，以各相应的标准剂量点的浓度为横坐标，绘制剂量响应曲线，并求出r和ED值6撞验规则产品的质量检验分为型式栓验和出厂检验两项6.1 型式幢验产品投产前及投产后工艺流程改变、原料变更，均须按本标准第4章技术指标中规定的内容检验6.2 出厂检验6. 2.1全检项目试剂盒组份、包

11、装及标志等6. 2.2抽检项目NSB、B。、剂量响应曲线及质量控制血清测定值。6.2.3抽检方式及结果判断抽检采取随机取样方式批量100盒以下抽取一盒、101300盒抽取二盒、301500盒抽取三盒、501盒以上抽取四盒如果检验结果有一项不符合本标准的要求时，应重新以两倍的数量随机取样进行复检复栓的结果，有一项指标不符合本标准所规定的要求，本批试剂盒判为不合格6.2. 4检验证书产品应有检验合格证书，见附录B（提示的附录7 标志、包肇、贮存和运输7. 1标志包括试剂盒封面标志、放射性试剂标志、试剂标志7. 1.1 试剂盒封面标志试剂盒封面标志内容包括za) 生产厂家F5 b) 产品名称，c)

12、注册商标Fd) 产品代号Pe) 产品批号，的批准文号，g) 注意事项，b) 有效期7.1. 2 放射性试剂瓶标志放射性试剂瓶标志内容包括za) 名称Fb) 批号Fc) 放射性活度，d) 测量日期，e) 放射性标志7.1. 3试剂瓶标志试剂瓶标志内容包括za) 名称，b) 批号，c) 浓度，d) 贮存条件，e) 有效期7.2包装和运输7. 2.1 包装EJ/T 1025-16 包装必须保证运输及防护安全，应符合GB11806豁免运输包装规定包装盒内必须附有产品使用说明书说明书内容包括2a) 生产厂家Fb) 产品名称sc) 产品代号Fd) 批准文号Fe) 产品批号，。适用范围Fg) 方法原理，b)

13、 试剂配制F。操作程序Fj) 结果计算，k) 技术指标，I) 注意事项，6 m) 有效期，n) 参考文献7.2. 2运输运输应符合GB11806的规定7. 3贮存试剂盒应贮存于28EJ/T 1025-1996 7 附录A（标准的附录肾功能放射免疫分析试剂盒的检验方法Al 方法提要测定人体血或尿液中f3z-MG、THP及尿液中的lgG、ALb.,.a1-MG的浓度为临床肾功能检测提供可靠依据。肾功能的放射免疫分析的基本原理是将1251抗原、非标记抗原（标准晶或待测样品和有限量抗体在适宜条件下进行竞争性结合反应一部分1251抗原与抗体结合，而另一部分则呈游离状态非标记抗原含量高，则游离的1251抗

14、原量就多，反之，非标记抗原含量低，游离的1251抗原量就少用二抗和聚乙二醇为分离剂，将抗原，抗体复合物沉淀下来，测定沉淀物的放射性计数事，用不同浓度的抗原作标准晶，获得有画数关系的剂量响应曲线。从剂量响应曲线上查出待测样晶中抗原的含量A2 仪器及设备计数器、微量加样器、放免试管、负压泵、离心机、恒温水浴锅和一般生物化学实验室仪器设备A3 实验程序A3.1 按说明书要求配制有关试剂A3.2 试管编号。1,2为总放射性管（T管）叶，4为非特异管（NSB),5,6为零标准管1718为标准管,19管以后为质量控制血清及样品管A3.3操作顺序，按表AI、表A2、表A3.，.表A4、表A5实验顺序进行操作

15、，逐步加入相应的试剂。溶液量以L表示。表Al良MG测定操作顺序表L 试管总T管非特异管零标准管标准管血样管尿样管(1）零标准品250 50 - (2）标准晶一50 (3）血样一一50 一(4）尿样1)一200 (5) i2s1MG 100 100 100 100 100 100 (6) MG抗体一200 200 200 200 (7) 播匀后，室温(1030），0.5 lh (8）免疫分离试剂500 500 500 500 500 (9) 播匀后，室温(1030），15min注,1）尿样测定采用200L，实际不影响测定结果8 表A2Alb测定操作顺序表L 试管T管非特异管零标准管标准管尿样管(

16、1)缓冲液 300 100 一(2）标准晶- 100 (3）待测尿样1) 一100 (4) 1251-Alb 100 100 100 100 100 (5）抗Alb抗体 200 200 200 (6) 混匀后，放37水浴），30min(7）免疫分离试剂- 500 500 500 500 (8) 混匀后，室温30min注，1)为稀释后的尿样表A3lgG测定操作顺序表L 试管T管非特异管零标准管标准管样晶管(1）缓冲液- 100 100 (2）标准品100 (3）样品I) 100 (4) 1251-lgG 100 100 100 100 100 (5) NSB 200 (6）抗lgG抗体- 200

17、 200 200 (7）二抗- 200 200 200 200 (8) 摇匀后，37温育，3h(9) PEG 100 100 100 100 注，1)为稀释后的样品9 表A4屿，MG测定操作顺序表p.L 试管总T管非特异管零标准管标准管尿样管(1)蟹冲液50 50 一一(2）标准晶一50 一(3）尿样I)一一一50 (4) 125l-a1 MG 100 100 100 100 100 (5) NSB 200 一(6) 1-MG抗体一200 200 200 (7) 摇匀后，37温育，3h(8）免疫分离剂500 500 500 500 (9) 充分撼匀，室温（1030），15min注11）为稀释后

18、的尿样表ASTHP测定操作顺序表p.L 试管T管非申奇异管零标准管标准管尿样管(1）缓冲液100 100 - (2）标准晶- 一100 (3）尿样I)- 一100 (4) 1251-THP 100 100 100 100 100 (5) NSB 200 一(6）抗THP抗体- 200 200 200 (7) 撼匀后，37温育，3h(8）二抗200 200 200 200 (9) 播匀后，室温(lo30），15min(10) PEG 200 200 200 200 注，1)为稀释后的尿样上述操作完毕后，氓匀，离心（3500rpm)20min0吸出上清液T管除外。测量T管和各管结合物的放射性计数率

19、。10 A4结果计算各管结合物的放射性计数率减去NSB的放射性计数率，标准管的B按公式（5）计算，样品管的B计算见下式B（Cp一Cn)/(C。一Cn）100%(Al) 式中：Cp一一待测样品管结合物的放射性计数率，计数min.以各标准管的B为纵坐标，抗原标准剂量点的浓度为横坐标，绘制剂量响应曲线根据待测样品的B，在剂量响应曲线上查得样品含量见图Al、图A2、图A3、图A4、图A5).I JJj ub m nu 咱4AU F气nu o nu 电aARu nu 。，“口图Al日z-MG剂量响应曲线11 80 . B% 70 . 60卡50卡，. 40 30卡, 20 I- . 10卡 . 孟。5

20、10 20 SOmg/L 图A2Alb剂量响应曲线B号也80卡 70卡60 50卡 30卡 20卡 、10 2 4 8 16 32mg/L 图A3lgG剂量响应曲线12 B% 80 60t 4N 。o.025 o. 050. 1 O. 2 o. 4 o. 8mg/L 图A41-MG剂量响应曲线100 80 60 40 20 0. 05 0. 1 0. 2 0. 5 1. 0 2. Omg/L 图A5THP剂量响应曲线13 附景B（提示的附录放射免疫分析试剂盒撞撞舍格证书产品名称一一一批号一一一一一生产人员一一一一一放化纯度比活度每瓶放射性活度标记物% kBq g 1 kBq 标准品批号抗血清批号质量控制血清检批号理金NSB Bo r ED25 EDSO ED75 剂量低值中值离值指范围标实测结论检验复核撞撞单位印章年月日14 四WAFAE同lmmhe同H同国